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REGISTER LOGIN Molecular Devices opens Organoid Innovation Center Apr 14, 2021 Modular, automated 3D cell culture and image analysis lab enables customers to streamline and scale organoid interrogation, advancing drug discovery…Read more酶联免疫吸附实验 (ELISA) 是一种用来定量检测样本中某种抗原的方法。抗原是一种会导致动物免疫系统发起防御反应的毒素或其他外来物质,例如流感病毒或环境污染物。潜在抗原的范围很广,因此在许多研究和检测领域中使用 ELISA 来检测和定量各种样本类型中的抗原。使用 ELISA 分析细胞裂解物、血样、食品等特定物质。ELISA 有四种主要类型:直接法、间接法、竞争法和双抗夹心法。每种类型的描述如下,并用图说明了分析物和抗体是如何结合和使用的。
在直接 ELISA 法中,抗原包被在微孔板孔底,然后再结合对该抗原有特异性的抗体,抗体上偶联了可进行检测的酶或其他分子。
在间接 ELISA 法中,抗原包被在微孔板孔底,然后加入对该抗原有特异性的抗体。随后加入酶或其他检测分子的二抗结合一抗。
在竞争法 ELISA 中,参照抗原包被在微孔板孔底。将样品和抗体加入孔中,如果样品中存在抗原,则它会与参照抗原竞争结合抗体。洗掉没有结合的物质。样品中的抗原越多,最终孔底结合的参照抗原的抗体就越少,信号就越弱。
对于双抗夹心法 ELISA,使用对靶标抗原上的两个不同表位具有特异性的两种抗体。捕获抗体结合到微孔板孔底,并结合该抗原的一个表位。检测抗体结合该抗原的不同表位,并偶联可进行检测的酶。(如果检测抗体未偶联,则需要酶偶联的检测二抗)。
大多数夹心 ELISA 都在微孔板中进行,其中微孔板孔的底部用作抗体与其他试剂结合的固体表面。微孔板洗板机用于洗去孔中的非特异性物质,而吸光度 ELISA 微孔板读板机则检测存在靶抗原时产生的颜色变化。而且,读板机软件也可用于绘制标准曲线并计算结果。
下图显示了标准双抗夹心法 ELISA 检测的工作流程:
讨论您的解决方案
第 1 步: 捕获抗体与 ELISA 板孔结合
第 2 步: 将样品添加到孔中 – 样品中的抗原与捕获抗体结合。
第 3 步: 洗涤微孔板 – 洗去未结合的物质,仅留下感兴趣抗原
第 4 步: 添加检测抗体 – 酶偶联检测抗体与感兴趣抗原上的第二个位点结合
第 5 步: 洗涤微孔板 – 洗去未结合的抗体,仅留下对感兴趣靶标具有特异性的抗体
第 6 步: 添加底物 – 底物通过检测抗体上的酶发生转化,从而产生颜色变化
第 7 步: 读取板 – 微孔板读板机检测有色反应产物并输出光密度 (OD) 值
第 8 步: 计算结果 – 计算并分析每份样品中的抗原量
查看 ELISA 实验步骤
ELISA 检测与应用
酶联免疫吸附实验是许多研究和生物技术实验室中常用的一种分析技术。以下是与 ELISA 检测和应用相关的一系列应用说明、研究和技术。
血管内皮生长因子 (VEGFs) 是分泌多肽家族,与哺乳动物血管发育以及正常血管生长的疾病过程有关。
阅读应用说明: 使用 SpectraMax L 微孔板发光计进行化学发光 VEGF ELISA
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在此,我们展示了如何将 AgraQuant Total Aflatoxin 4/40 ELISA 试剂盒与 SpectraMax® ABS Plus 微孔板读板机和 SpectraMax® iD5 多功能微孔板读板机一同用于检测一种最常见的大麻产品(花)中的黄曲霉毒素 B1、B2、G1 和 G2 水平。
阅读应用说明: 使用 ELISA 方法测定大麻中的黄曲霉毒素总量
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典型的 ELISA 实验步骤较为耗时,有多个孵育和洗涤步骤。CatchPoint SimpleStep ELISA 试剂盒为用户提供了一个 90 分钟的 ELISA 工作流程,与传统 ELISA 相比,时间缩短了大约三分之二。
阅读应用说明: 使用 CatchPoint SimpleStep ELISA 试剂盒更快地获得 ELISA 结果
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检测 6 种市售啤酒中的麦胶蛋白水平,以使用 RIDASCREEN 麦胶蛋白竞争性 ELISA 测定谷蛋白水平。
阅读应用说明: 使用一种经美国酿造化学家协会 (ASBC) 批准的 ELISA 方法对啤酒中的谷蛋白进行定量
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探索 ELISA 的起源以及这些年来该方法是如何发展演变的,从而促进当代某些最重要的科学突破。
阅读博客: ELISA 从创建之初到 COVID-19 研究的历史
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本视频就如何在 SoftMax Pro 软件中设置 ELISA 终点实验方案提供了逐步说明。使用实验方案中的模板功能能够实现快速、自动化数据分析。曲线拟合可提供准确的结果可视化。
查看按需网络研讨会
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四部分网络研讨会系列的第 1 部分介绍了 SoftMax® Pro 7.1.1 GxP 采集和分析软件,并展示了快速轻松运行您的检测并获得结果有多么容易。
简短的介绍之后,您将观看如何使用 SoftMax Pro GxP 软件和 SpectraMax® iD3 多功能微孔板读板机并通过 ELISA 检测示例来设置并获取数据的现场演示。我们将在探讨分析的基本要素之前解释获取数据所必需的软件设置。我们将使用一个真实的数据集来介绍数据简化,从而创建模板并生成标准曲线。
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有机三聚氰胺被用于制造许多产品,包括塑料、阻燃剂、色素和肥料。最近报告了存在向动物饲料和供人食用的食品中添加三聚氰胺以增加表观蛋白含量的做法。由于三聚氰胺可导致严重疾病或死亡,人们越来越关注可用于检测各种食物产品中是否存在三聚氰胺污染的方法的确定。
阅读应用说明:
自动生成和分析基质胶中的 3D 细胞培养物使用 Romer Labs AgraQuant 三聚氰胺测定法进行高通量三聚氰胺检测有机三聚氰胺被用于制造许多产品,包括塑料、阻燃剂、色素和肥料。最近报告了存在向动物饲料和供人食用的食品中添加三聚氰胺以增加表观蛋白含量的做法。由于三聚氰胺可导致严重疾病或死亡,人们越来越关注可用于检测各种食物产品中是否存在三聚氰胺污染的方法的确定。
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自动生成和分析基质胶中的 3D 细胞培养物使用 Romer Labs AgraQuant 三聚氰胺测定法进行高通量三聚氰胺检测使用双抗夹心法 ELISA 比较 EMax Plus 微孔板读板机和 EMax 终点读板机的性能,以对细胞因子 Interleukin-22(小鼠/大鼠 IL-22)的水平进行定量。
阅读应用说明: 使用 EMax Plus 微孔板读板机进行蛋白定量
使用双抗夹心法 ELISA 比较 EMax Plus 微孔板读板机和 EMax 终点读板机的性能,以对细胞因子 Interleukin-22(小鼠/大鼠 IL-22)的水平进行定量。
阅读应用说明: 使用 EMax Plus 微孔板读板机进行蛋白定量
了解如何在 SpectraMax® ABS Plus 微孔板读板机(酶标仪)上使用便利的预设方法进行人 IL-8 SimpleStep ELISA 检测。
阅读应用说明: 在 SpectraMax ABS Plus 微孔板读板机上使用 SimpleStep ELISA 试剂盒定量白细胞介素-8 的浓度
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一个典型夹心 ELISA 实验步骤的工作流程涉及多个试剂添加、孵育和洗涤步骤。在此,我们强调了进行 ELISA 检测的每一步以及所需的仪器和工具,包括微孔板洗板机、吸光度 ELISA 读板机和软件。
大多数 ELISA 在 96 或 384 孔微孔板中进行,96 孔板最为常见,有时也称为酶标板。微孔板孔底作为抗体和其他试剂附着的固体表面。微孔板通常包含在 ELISA 试剂盒中。
CatchPoint SimpleStep ELISA 试剂盒在短短 90 分钟内即可产生结果!
了解更多信息使用带有 SoftMax Pro 数据采集软件的 EMax Plus 微孔板读板机和 MultiWash+ 微孔板洗板机可为您的 ELISA 工作流程提供全套解决方案。
查看产品洗掉没有结合的抗体,仅留下对目的靶标具有特异性的抗体,并再次最大程度降低背景信号的可能性。
AquaMax 微孔板洗板机:在所有孔中同时进行 96 和 384 孔吸液和分液,从而实现高精度检测和更快的微孔板处理,无需进行孔板设置或象限处理。
查看产品微孔板读板机可检测彩色反应产物并输出光密度 (OD) 值,这个值表明每个孔的内容物吸收了多少光。
SpectraMax ABS Plus Absorbance ELISA 微孔板读板机等 ELISA 读板机可检测存在靶标抗原时产生的颜色变化。通过测量孔内物质吸收了多少通过微孔板孔的光即可完成。存在的抗原越多,吸光度值越高。
查看产品我们的 SoftMax Pro 数据分析软件等 ELISA 读板机软件用于绘制标准曲线,并根据微孔板读板机提供的吸光度值来计算结果。
根据标准曲线精确计算每份样品中的抗原量。预配置的实验步骤可自动计算结果,从而节省时间。
查看产品 在过去的 30 年中,ELISA(或酶联免疫吸附剂检测)已成为许多研究领域中的关键,且经证实可用于许多应用:从检测食品和…使用 EMax plus 微孔板读板机(酶标仪)和 MultiWash+ 微孔板洗板机进行的 ELISA 工作流程
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