研究自身免疫、炎症和癌症中 T 细胞动力学的平衡
简化您对 T 的研究使用 SBI 的即用型预构建 Treg 和 Th17 载体和细胞系进行细胞动力学分析。使用 pMSCV-Mouse Foxp3-EF1α-GFP-T2A-Puro for Foxp3 Overexpression,您可以选择三种不同的方法来研究来自 MSCV 启动子的 Foxp3 过表达以在造血细胞和干细胞中强表达:
/ p>基于慢病毒载体的抗转染细胞系
使用 SBI 备受推崇且可靠的慢病毒载体技术,将 MSCV-小鼠 Foxp3-EF1α-GFP-T2A-Puro 表达盒整合到基因组中,从而创建稳定的 Foxp3 过表达细胞系。借助我们的慢病毒技术,您可以利用我们的高滴度慢病毒包装系统,通过转导将您的 Foxp3 过表达盒高效地递送至细胞——非常适合 tr抗感染细胞系。
通过整合 MSCV 创建稳定的 Foxp3 过表达细胞系-使用 SBI 简单且一致的 PiggyBac 转座子系统将小鼠 Foxp3-EF1α-GFP-T2A-Puro 表达盒导入基因组。使用我们的 PiggyBac 转座子系统,您可以在抗感染细胞系中获得 Foxp3 过表达的简单且一致的转基因。
使用我们预构建的 Jurkat 细胞系快速启动您的 Treg 研究 that 已经将 MSCV-Mouse Foxp3-EF1α-GFP-T2A-Puro 表达盒整合到基因组中。我们使用 MSCV-小鼠 Foxp3-EF1α-GFP-T2A-Puro 表达盒转导了 Jurkat 细胞,并验证了 Foxp3 过表达,因此您不必 - 只需培养细胞并开始您的研究。
*客户协议
学术客户可以购买 PiggyBac 转座子系统组件用于内部研究目的并无限期使用,而商业客户必须签署客户协议以获得为期六个月的有限使用许可以测试该技术。
p>有关最终用户许可信息,请参阅以下内容:
学术客户—最终用户许可信息商业客户—最终用户许可信息* SBI 已获得完全许可,可以作为合作伙伴分发 PiggyBac 载体Transposagen Biopharmaceuticals, Inc.
How It WorksHow It Works快速介绍 SBI 的慢病毒包装和 PiggyBac 转座子技术
开始生产 lentivirus
PiggyBac 转座子系统的剪切和粘贴机制
高效的 PiggyBac 转座子系统使用剪切和粘贴机制将 DNA 从PiggyBac 载体进入基因组。如果只需要临时基因组整合,则可以瞬时表达仅切除的 PiggyBac 转座酶,以无足迹去除插入片段,从而重建原始基因组序列。
图 1. PiggyBac 转座子系统的剪切和粘贴机制。
Super PiggyBac 转座酶结合特定的反转在 PiggyBac 克隆和表达载体中编辑末端重复序列 (ITR) 并切除 ITR 和间插 DNA。Super PiggyBac 转座酶将 ITR-表达盒-ITR 片段插入基因组的 TTAA 位点。仅切除的 Super PiggyBac 转座酶可以用于从基因组中移除 ITR-Expression Cassette-ITR 片段,实现无足迹移除支持数据支持数据Foxp3 的稳健过度表达
图 2. SBI 的人和小鼠 Foxp3 慢病毒载体和 PiggyBac 质粒提供强大的 Foxp3 过表达。人和小鼠 Foxp3 慢病毒载体 Cat.# TCL200A-1(人)和 Cat.# TCL100A-1(小鼠)以及 PiggyBac 转座子构建体 Cat.# TCL200PB-1(人)和 Cat.# TCL100PB-1(小鼠)暂时地转染 293FT 细胞。 24 小时后,制备细胞裂解物并进行蛋白质印迹分析以使用可检测人和小鼠蛋白的抗 Foxp3 抗体检测 Foxp3 蛋白表达。与未转染的细胞裂解物对照(泳道 5)相比,可以清楚地观察到人(泳道 1,3)和小鼠(泳道 2,4)Foxp3 蛋白的稳健过表达,微管蛋白作为上样对照。
图 3.SBI 的 MSCV-小鼠 Foxp3-EF1α-GFP-T2A-Puro Jurkat 细胞系显示强 Foxp3过度表达。使用 Cat.# TCL200A-1(人)或 Cat.# TCL100A-1(小鼠)预包装慢病毒转导人 Jurkat T 细胞,并使用嘌呤霉素选择建立稳定细胞系 7 天。 Fo的过度表达通过使用流式细胞术和细胞裂解物的蛋白质印迹分析以及使用抗 Foxp3 抗体测量 GFP 水平来评估 xp3。这两种方法都表明 SBI 的 Foxp3 过表达 Jurkat 细胞系具有很强的 Foxp3 过表达。
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研究自身免疫、炎症和癌症中 T 细胞动力学的平衡
使用 SBI 的即用型,简化您对 T 细胞动力学的研究,预构建的 Treg 和 Th17 载体和细胞系。使用 pMSCV-Mouse Foxp3-EF1α-GFP-T2A-Puro for Foxp3 Overexpression,您可以选择三种不同的方法来研究来自 MSCV 启动子的 Foxp3 过表达,以在造血和干细胞:
基于慢病毒载体的转染抗性细胞系通过整合 MSCV-小鼠 Foxp3-EF1α-GFP-T2A-Puro 表达盒构建稳定的 Foxp3 过表达细胞系使用 SBI 备受推崇和可靠的慢病毒载体技术进入基因组。借助我们的慢病毒载体技术,您可以利用我们的高滴度慢病毒载体包装系统,通过转导将您的 Foxp3 过表达盒高效地递送至细胞——非常适合抗转染细胞系。
通过整合 MSCV 创建稳定的 Foxp3 过表达细胞系-使用 SBI 简单且一致的 PiggyBac 转座子系统将小鼠 Foxp3-EF1α-GFP-T2A-Puro 表达盒导入基因组。用我们的PiggyBac 转座子系统,您可以在抗感染细胞系中获得 Foxp3 过表达的简单且一致的转基因。
使用我们的预构建 Jurkat 细胞系快速启动您的 Treg 研究,该细胞系已经将 MSCV-小鼠 Foxp3-EF1α-GFP-T2A-Puro 表达盒整合到基因组中。我们使用 MSCV-小鼠 Foxp3-EF1α-GFP-T2A-Puro 表达盒转导了 Jurkat 细胞,并验证了 Foxp3 过表达,因此您不必 - 只需培养细胞并开始您的研究。
*客户协议
学术客户可以购买 PiggyBac 转座子系统组件用于内部研究目的并无限期使用,而商业客户必须签署客户协议才能使用六个月的有限使用许可,用于测试该技术。
有关最终用户许可信息,请参阅以下内容:
学术客户 - 最终用户许可信息商业客户 - 最终用户许可信息* 作为与 Transposagen Biopharmaceuticals, Inc. 的合作伙伴关系,SBI 获得了经销 PiggyBac 载体的完全许可。工作原理如何工作SBI 的慢病毒包装和 PiggyBac 转座子技术的快速介绍
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PiggyBac 转座子系统的剪切和粘贴机制
高效的 PiggyBac 转座子系统使用剪切和粘贴机制将 DNA 从PiggyBac 载体进入基因组。如果只需要临时基因组整合,则 Excision-only PiggyBac Transpo可以瞬时表达 sase 以无足迹去除插入片段,从而重建原始基因组序列。
图 1. PiggyBac 转座子系统的剪切-和粘贴机制。
Super PiggyBac 转座酶结合 PiggyBac 克隆和表达载体中特定的反向末端重复序列 (ITR),并切除 ITR 和插入的 DNA。Super PiggyBac 转座酶插入 ITR-Expression Cassette-ITR片段进入基因组的 TTAA 位点。仅切除的 Super PiggyBac 转座酶可用于从基因组中移除 ITR 表达盒-ITR 片段,实现无足迹移除支持数据支持数据Foxp3 的稳健过表达
图 2. SBI 的人和小鼠 Foxp3 慢病毒载体和 PiggyBac 质粒提供稳健的 Foxp3 过表达。人类和小鼠 Foxp3 慢病毒载体 Cat.# TCL200A-1(人类)和 Cat.# TCL100A-1(小鼠)和 PiggyBac 转座子构建 Cat.# TCL200PB-1(人类)和 Cat.# TCL100PB-1(小鼠)被瞬时转染到 293FT 细胞中。24 小时后,制备细胞裂解物并使用可检测人和小鼠蛋白的抗 Foxp3 抗体进行蛋白质印迹分析以检测 Foxp3 蛋白表达。与未转染的细胞裂解物对照(泳道 5)相比,可以清楚地观察到人(泳道 1,3)和小鼠(泳道 2,4)Foxp3 蛋白的稳健过表达,微管蛋白作为上样对照。
图 3。 SBI 的 MSCV-小鼠 Foxp3-EF1α-GFP-T2A-Puro Jurkat 细胞系显示出强烈的 Foxp3 过表达。使用 Cat.# TCL200A-1(人)或 Cat.# TCL100A-1(小鼠)预包装慢病毒转导人 Jurkat T 细胞,并使用嘌呤霉素选择建立稳定细胞系 7 天。通过使用流式细胞术和细胞裂解物的蛋白质印迹分析以及使用抗 Foxp3 抗体测量 GFP 水平来评估 Foxp3 的过表达。这两种方法都表明 SBI 的 Foxp3 过表达 Jurkat 细胞系具有很强的 Foxp3 过表达。
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