特异性标记生物分子的新型化学和生物学策略的概念是转化科学的核心。我们的实验室致力于将合成化学和分子生物学的概念联系起来，以扩展研究生物系统的工具箱。我们特别感兴趣的是开发试剂和技术来跟踪、操作、分离和询问核酸。我们专注于为核酸配备可检测标记的创新方法，以及用于核酸富集和测序的新型试剂。我们目前的项目之一是使用化学酶促方法将 5\'-修饰的帽结构部署到 RNA 天然序列。我们采用这种方法通过纳米孔测序鉴定全长 RNA 亚型，并同时检测 miRNA 及其目标基因转录本。我们也渴望结合化学衍生化和逆转录来映射 RNA 中修饰或损坏的核碱基。

用于装备 an 的化学酶方法带有修饰帽的 RNA，有助于通过纳米孔测序鉴定全长亚型。

共价化学修饰是 RNA 分子最保守的特征之一。目前，生命的所有三个领域中的 RNA 修饰总数超过 250。其中，伪尿苷（9U 或 Y）是编码和非编码 RNA 中发生的最普遍的 RNA 修饰。这种 RNA 修饰由称为假尿苷合酶的蛋白质家族安装。然而，这些酶的 RNA 偏好尚不清楚。目前尚不清楚基板的结构要求是什么。修饰的动力学参数和反应的辅因子尚未确定。为了回答这些问题，我们使用生物化学、结构生物学和质谱方法进一步表征候选酶。

酵母PUS1晶体结构叠加（pin k) 与人类的 RNA 底物（黑色）结合tRNA（灰色）已知在其反密码子环（红色球体）内被 PUS1 修饰。该结构由我们小组与 Fred Hutchinson 癌症研究中心的 Barry Stoddard 实验室合作解析。

产品描述

1）DH5αTM 衍生物

2）无动物来源产品

3）抗T1噬菌体感染 ( fhuA2 )

4）该产品还同时提供电转级感受态细胞

概述：NEB 5-alpha E.coli 感受态细胞，广泛应用于多种高效级转化。

基因型：fhuA2 Δ(argF-lacZ)U169 phoA glnV44 Φ80Δ (lacZ)M15 gyrA96 recA1 relA1 endA1 thi-1 hsdR17

特性：

1）针对来源于PCR、cDNA及其他来源（hsdR）的未甲基化DNA进行转化

2）可用于蓝/白斑筛选

3）缺失非特异性核酸内切酶I（endA1）活性，可用于制备高质量质粒

4）可减少克隆DNA的重组反应 （recA1）

转化效率：

高效级： 1–3 x 109 cfu/μg pUC19 DNA

亚克隆效级：> 1 x 106 cfu/μg pUC19 DNA

电转级： 1–3x 1010 cfu/μg pUC19 DNA

未被转化的细胞需要检测抗 φ 80 噬菌体感染的能力，这是检测抗T1噬菌体感染能力的标准检测法。此外，未转化细胞还要检测其抗链霉素抗性以及对氨苄青霉素、氯霉素、卡那霉素和四环素的敏感性。使用pUC19 质粒通过对β−半乳糖基因的 α-互补分析显示：这些细胞也适宜进行蓝/白斑筛选。

注意事项：感受态细胞应贮存于–80°C，一旦融化，就不能再被冻存。–20°C贮存会显著降低其转化效率。只要温度高于–80°C，即使未被融化，细胞转化效率也会降低为零。