NEB 为 CLIP-tag 融合蛋白提供大量荧光标记(底物)。 CLIP-tag™ 底物由荧光团组成,该荧光团通过苄基接头与胞嘧啶离去基团偶联。底物标记 CLIP 标签,无需额外的酶。细胞渗透性底物 (CLIP-Cell™) 适用于细胞内和细胞表面标记,而非细胞渗透性底物 (CLIP-Surface™) 仅对在细胞表面表达的融合蛋白具有特异性。
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1)克隆毒性基因
2)含 F 因子的菌株,具有极高的转化效率
3)DH5αTM 衍生物
4)无动物来源产品
5)抗 T1 噬菌体感染(fhuA2)
概述:该 E.coli 感受态细胞广泛应用于多种高效级转化。
基因型:F´ proA+B+ lacIq Δ(lacZ)M15 zzf::Tn10 (TetR)/fhuA2Δ(argF-lacZ)U169 phoA glnV44 Ø80 Δ(lacZ)M15gyrA96 recA1 endA1 thi-1 hsdR17
特性:1)高效转化未甲基化DNA,如:PCR、cDNA及其他DNA (hsdR)
2)可用于蓝/白斑筛选
3)通过lacIq精确控制表达,从而允许克隆潜在的毒性基因
4)缺失非特异性核酸内切酶I (endA1)活性,可用于制备高质量质粒
5)可减少克隆DNA的重组反应 (recA1)
6)适用于M13噬菌体克隆的繁殖
转化效率:高效级:1–3 x 109 cfu/μg pUC19 DNA
未被转化的细胞需要检测抗 Ø80噬菌体感染的能力,这是检测抗T1噬菌体感染能力的标准检测法。此外,未转化细胞还要检测其抗链霉素抗性以及对氨苄青霉素、氯霉素、卡那霉素和四环素的敏感性。使用pUC19质粒通过对β−半乳糖基因的α-互补分析显示:这些细胞也适宜进行蓝/白斑筛选。
随产品提供:
25ml SOC Outgrowth 培养基 (室温贮存)
0.025 ml 50 pg/μl pUC19 对照 DNA (–20°C贮存)
注意事项:感受态细胞应贮存于–80°C,一旦融化,就不能再被冻存。–20°C贮存会显著降低其转化效率。只要温度高于–80°C,即使未被融化,细胞转化效率也会降低为零。