主页工具和资源使用指南植物 RNA 纯化指南植物 RNA 纯化指南新鲜或冷冻的植物组织可以使用君主总 RNA 小量提取试剂盒 (NEB T#2010) 进行处理。使用适量的起始材料。植物组织的最大输入量为100 毫克。使用过多的样品可能会降低裂解效率，引入过量的 RNA 以外的细胞成分，并影响 RNA 与 RNA 纯化柱的结合。可以使用研钵和研杵将冷冻和新鲜组织粉碎成粉末。研钵和研杵在干冰上预冷，然后将液氮倒入研钵中，在粉碎的同时快速冷冻样品。保持粉碎的粉末冷冻，直到与君主 DNA/RNA 保护试剂 (NEB #T2011) 混合。然后可以通过珠均质化对样品进行裂解/均质化。将冷冻样品保持冷冻状态，直到与 DNA/RNA 保护试剂混合。添加保护试剂后，重要的是立即进行机械裂解（例如，珠子均质化）。如有必要，可将 Protection Reagent 中的样品暂时置于冰上，直至可以进行处理。务必使用 1X Monarch DNA/RNA Protection Reagent 溶液。提供的 2X 浓缩液可用无核酸酶水稀释。处理植物样品不需要蛋白酶 K 消化。添加君主 RNA 裂解缓冲液 (NEB #T2012) 和所有后续步骤应在室温下进行。处理植物样品时, 需要更大体积的 DNA/RNA 保护试剂。因此，还需要更大体积的 RNA 裂解缓冲液和乙醇，并且必须重新加载柱子。为减少样品体积和柱子的重新加载，RNA 裂解缓冲液可用于机械裂解而不是 DNA/RNA 保护试剂

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使用君主总 RNA 小量制备试剂盒成功纯化 RNA 的一般指南选择指南使用时的样本输入量ng the Monarch Total RNA Miniprep Kit RNA 纯化故障排除指南主页工具和资源使用指南从白细胞（WBC、PBMC）中纯化 RNA 的指南从白细胞（WBC、PBMC）中纯化 RNA 的指南The Monarch Total RNA Miniprep Kit (NEB #T2010) 可用于纯化多达 1x107 个白细胞（WBC、PBMC） .务必使用 1X Monarch DNA/RNA Protection Reagent 溶液。用等体积的无核酸酶水稀释所需体积的所提供的 2X 浓缩液，制备 1X 溶液。对于储存在 Monarch DNA/RNA 保护试剂中的样品，在处理前让样品平衡至室温。确保保护试剂的体积与方案建议一致，并在必要时进行调整。在 55°C 下进行蛋白酶 K 消化 30 分钟，以确保完全消化。添加君主 RNA 裂解缓冲液 (NEB #T2012) 和所有后续步骤都应该是在室温下进行。

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产品描述

概述：T7 表达 IysY E.coli 感受态细胞适用于高效级转化和蛋白表达。

基因型：MiniF lysY (CamR) / fhuA2 lacZ::T7 gene1[lon] ompTgal sulA11 R(mcr-73::miniTn10--TetS)2 [dcm]R(zgb-210::Tn10--TetS) endA1 D(mcrC-mrr)114::IS10

特性：

1）在 lac 操纵子上有 T7 RNA 聚合酶，无 λ 前噬菌体

2）通过溶菌酶对 T7 RNA 聚合酶进行调控，从而允许克隆潜在的毒性基因

3）LysY 作为特殊的 T7 溶菌酶，因缺少酰胺酶活性，从而降低细胞在诱导过程中的溶菌现象

4）Lon 和 OmpT 蛋白酶缺失

5）不受限于 DNA 是否甲基化

转化效率：高效级：0.6–1 x 109 cfu/μg pUC19 DNA

未被转化的细胞需要检测抗 Φ80 噬菌体感染的能力，这是检测抗 T1 噬菌体感染能力的标准检测法。此外，未转化细胞还要检测其对氨苄青霉素、四环素、卡那霉素和链霉素的敏感性。结果显示未被转化的该感受态细胞抗氯霉素。

随产品提供的试剂：

20ml SOC Outgrowth 培养基（室温贮存）

0.025 ml, 50 pg/μl pUC19 对照 DNA（–20°C 贮存）

注意事项：感受态细胞应贮存于 –80°C，一旦融化，就不能再被冻存。–20°C 贮存会显著降低其转化效率。只要温度高于 –80°C，即使未被融化，细胞转化效率也会降低为零。