多年来,我们设计并生成了无数用于蛋白质、核酸和聚糖的报告探针。我们特别感兴趣的是用于体外和体内标记遗传编码蛋白质标记系统的选择性探针,例如 SNAP 标签和 CLIP 标签。我们努力合成具有荧光染料、生物素标签、寡核苷酸和功能化的化学结合物具有独特属性的构件使研究人员能够以更高的分辨率和更少的背景研究生物过程。我们正在进行的项目旨在扩大多功能和可切割探针的范围,以检测蛋白质-蛋白质和蛋白质-核酸相互作用并推进单分子成像应用。
用于标记的功能化探针概述SNAP 标签和 CLIP 标签融合蛋白质。
主页研究实验室洛曼实验室洛曼实验室多核苷酸连接酶的动力学和机制多核苷酸连接酶的动力学和机制DNA 连接酶通过三个不同的催化步骤催化相邻 5\' PO4 和 3\' OH 之间形成磷酸二酯键:a) 自腺苷酸化 b) 腺苷酸转移和 c) 磷酸二酯键形成。我们正在使用快速化学淬灭、停流和大量荧光测量来确定在几种病毒、古细菌和人类 DNA 连接酶中驱动这些催化事件中的每一个的微观动力学速率。我们的工作旨在了解 DNA 结合的机制细节、连接位点定位、转换过程中的构象变化以及连接的化学步骤。此外,我们的目标不仅是了解生物学相关的切口封闭事件,而且还包括在没有辅助因素的情况下的末端连接,这是生物技术连接应用的关键活动。
我们正在进行多项合作,旨在拓宽我们解决这些问题的方法。与 University of University 的 Hoskin 实验室合作Wisconsin-Madison,我们正在使用荧光标记的 DNA 连接酶、单分子 FRET 和 bulk FRET,研究连接过程中 DNA 连接酶的实时构象变化,并探测连接酶-核酸结合相互作用。与 Keck 实验室合作,也是在威斯康星大学麦迪逊分校,我们的目标是捕获与 DNA 末端连接和其他底物结合的 DNA 连接酶。
产品描述
1)晶体学和 SeMet 标记的理想选择
2)BL21 源增强型菌株
3)无动物来源产品
4)抗 T1 噬菌体感染(fhuA2)
概述:T7 表达晶体 E.coli 感受态细胞适用于高效转化和蛋白表达,专用于 X 射线结晶学研究。非常适合于对蛋白进行硒代蛋氨酸标记。
基因型:fhuA2 lacZ::T7 gene1 [lon] ompT gal sulA11R(mcr-73::miniTn10--TetS)2 [dcm] R(zgb-210::Tn10--TetS) endA1metB1 (mcrC-mrr)114::IS10
特性:
1)T7 Express 的衍生物,T7 RNA 聚合酶位于染色体上并受 lac 调控
2)Lon 和 OmpT 蛋白酶缺失
转化效率:
高效级:0.6–1 x 109 cfu/μg pUC19 DNA
未被转化的细胞需要检测抗 Φ80 噬菌体感染的能力,这是检测抗 T1 噬菌体感染能力的标准检测法。此外,未转化细胞还要检测其对氨苄青霉素、氯霉素、卡那霉素、链霉素和四环素的敏感性。
随产品提供:
20ml SOC Outgrowth 培养基 (室温贮存)
0.025 ml 50 pg/μl pUC19 对照 DNA(–20 °C 贮存)
注意事项:感受态细胞应贮存于 –80°C,一旦融化,就不能再被冻存。 –20°C 贮存会显著降低其转化效率。只要温度高于 –80°C,即使未被融化,细胞转化效率也会降低为零。