临界胶束浓度 (CMC) 可以近似定义为可观量(> 总量的 5%)的胶束聚集体首先开始出现在平衡状态下的脂质单体浓度:nM1Mn
CMC VALUESLipidCMC (mM)5:0 PC906:0 PC157:0 PC1.48:0 PC0.279:0 PC0.02910:0 PC0.00512:0 PC90 nM14:0 PC6 nM16:0 PC0 .46 nM8:0 PG1.2110:0 PG0.4212:0 PG0.1314:0 PG0.0114:0 PS (5mM Ca2+)†45:0 PS (5mM Ca2+)†26:0 PS (5mM Ca2+)†1.27 :0 PS (5mM Ca2+)†0.88:0 PS (5mM Ca2+)†0.48:0 PS2.28210:0 PS0.0968:0 Lyso PC6010:0 Lyso PC6-812:0 Lyso PC0.4-0.914:0 Lyso PC0 .043-0.09016:0 Lyso PC4-8.3 µM18:0 Lyso PC0.4 µM† 数据由北卡罗来纳大学教堂山分校生物化学系 Rinku Majumder 博士提供。
LIPID 缩写键PC = 磷脂酰胆碱PG = 磷脂酰甘油PS = 磷脂酰丝氨酸
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CMC 是通过使用芘荧光技术在室内确定的或从文献中获得。许多文献值已通过我们的内部方法得到证实。
该方法的一般概述如下:用于临界胶束浓度的荧光探针
参考手册脂质双层膜作者:Derek Marsh。 ISBN 0849332559。CRC Press, Inc.物理性质甘油磷脂的相变温度磷脂二元混合物的混溶性磷脂的电离常数临界胶束浓度 (CMC)合成 PIPs 的 TLC 程序制备 5% 草酸钾水溶液将 TLC 板浸入草酸钾溶液中干燥并激活 TLC 板用脂质轻轻点样板;不要在板上涂太多脂质,因为它会导致条纹。在氯仿:甲醇:水:乙酸(10:10:3:1,v/v)中显影板,使用合适的检测系统(例如碘蒸气或PIP 的钼酸盐 sprayRf(这些值是参考点;实际结果可能因板的活性和环境条件而异):PIP2:0.3-0.4PIP3:~0.2紫外/可见光谱法测定磷脂氧化定义磷脂的氧化百分比可以通过使用比尔定律根据其在 234 nm 处的吸光度计算过氧化磷脂的浓度来确定。
范围适用于所有不饱和
仪器 UV/VIS 分光光度计 HELLMA UV 石英样品池 (QS 1.000)Kimwipes 一次性玻璃管试剂乙醇(200 标准,脱水 USP)去离子水#850355:二棕榈酰磷脂酰胆碱 (DPPC) Avanti Cat. #850355程序准备 DPPC 样品。准备至少 3 mL 的 1mg/mL DPPC 溶解在乙醇/去离子水 (9:1) 中的溶液。准备样品。准备至少 3 mL 的 1mg/mL DPPC 溶液溶解在乙醇/去离子水 (9:1) 中的磷脂样品。运行空白。空白(背景)是用于溶解磷脂样品的溶剂。用溶剂冲洗样品池 3 次以去除池中的任何残留污染物.填充样品ce的3/4将与参考一起使用。使用 Kimwipe 擦去样品池外部的所有指纹和污染物。将样品池插入分光光度计并运行空白光谱。运行 DPPC 样品。将空白溶剂从样品池中倒出.用 DPPC 样品溶液填充样品池的 3/4。从样品池外部去除指纹。将样品池插入分光光度计并运行 DPPC 光谱。运行样品。将 DPPC 样品从样品中倒出池。用溶剂冲洗样品池 3 次以去除池中任何残留的 DPPC。用磷脂样品填充样品池的 3/4。从样品池外部去除指纹。将样品池插入分光光度计并运行样品光谱。从样品光谱中减去 DPPC 光谱并记录磷脂样品在 234 nm 处的吸光度读数 (OD)。计算过氧化脂质浓度 (D) = A/( B*C)A = 吸光度读数 (OD) 在 234 nmB = 消光系数 (OD*mL)/(mmol*cm)(过氧化脂质为 27,000)C = 路径长度(厘米) 氧化百分比 = D/E * 100D = 过氧化脂质浓度(毫克/毫升)=脂质样品浓度 = 1.0 mg/mL
REFERENCESR.S.金 & F.S.拉贝拉 (1987)。监测真实脂质自氧化谱的分析方法比较。脂质研究 28:1110-1117。分析程序脂质提取总磷的测定磷脂的薄层色谱分析合成 PIP 的薄层色谱程序薄层色谱溶剂系统 - 脂质迁移薄层色谱检测方法通过 GC/FIDO 对磷脂进行脂肪酸分析通过紫外/可见光对磷脂氧化进行分析提取和薄层色谱分析线粒体磷脂