小鼠乳腺上皮细胞形成过程中Lactogenic分化的微球体 doi: 10.3791/1265 Published: October 6, 2009 Summary HC11 lactogenic分化的特点可以简称为微球体的半球形结构的形成。相衬显微镜的结构可以枚举援助量化lactogenic分化。 Abstract 常用的表型措施，以确定在小鼠乳腺上皮细胞培养的lactogenic分化程度是圆顶形细胞结构的形成，被称为微球体 Protocol Log in or Start trial to access full content. Learn more about your institution’s access to JoVE content here 6天的RPMI 1640培养基中，10％小牛血清，5μg/ml胰岛素，10毫米的HEPES，在10ng/ml表皮生长因子（EGF），建立能力，HC11细胞生长汇合。 细胞用PBS洗涤，并保持24小时，在没有表皮生长因子生长介质。 为了诱导lactogenic分化的细胞培养分化的媒体，即地塞米松（10 -6 M）的RPMI，胰岛素（5微克/毫升）和催乳素（5微克/毫升），简称为DIP 。 在规定的时间后DIP此外，微球体进行了拍照，并列举使用数码相机奥林巴斯IX71显微镜相衬显微镜。 代表性的成果： 正常乳腺上皮细胞单层和多个微球体的低功率放大，以及作为一个单一的微球体的高功率放大如图1所示，分别为。 图1。 （一） 微球体。正常乳腺上皮细胞单层应显示为一个平层的融合细胞。 （二），经过3-5天的DIP刺激出现多个微球体。拍照后5天的DIP此外。 （三）高倍率后的DIP另外5天微球体含有一个单一的领域。 Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian. Discussion Log in or Start trial to access full content. Learn more about your institution’s access to JoVE content here为了使这项技术获得成功，最好的质量，必须保持上皮细胞在合流之前被lactogenic激素诱导。有可能有无数的微球体，这使得难以量化的情况下。因此，定量的目的，最好在一个时间点拍摄时的微球体，能算的微球体。 虽然有各种分子标记，用于确定乳腺上皮细胞的lactogenic分化程度，有几个用于2D文化细胞生长的形态标记。上皮细胞单层的能力，形成微型穹顶结构，牛奶蛋白质，可以积累提供了一个可以监视形态的变化，在这个发展过程中出现的模式。 Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian. Acknowledgments 从国会导演医学研究基金资助（DAMD17 - 01 - 0264）ML卡特勒和美国军事癌症研究所ML卡特勒的资金支持工作。 Cite this Article Morrison, B., Cutler, M. L. Mouse Mammary Epithelial Cells form Mammospheres During Lactogenic Differentiation. J. Vis. Exp. (32), e1265, doi:10.3791/1265 (2009). More Morrison, B., Cutler, M. L. Mouse Mammary Epithelial Cells form Mammospheres During Lactogenic Differentiation. J. Vis. Exp. (32), e1265, doi:10.3791/1265 (2009). Less Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions Please enter your email address so we may send you a link to reset your password. We use/store this info to ensure you have proper access and that your account is secure. We may use this info to send you notifications about your account, your institutional access, and/or other related products. To learn more about our GDPR policies click here. If you want more info regarding data storage, please contact gdpr@jove.com. 我们使用/存储此信息以确保您具有适当的访问权限并确保您的帐户安全。我们可能会使用此信息向您发送有关您的帐户，您的机构访问权限和/或其他相关产品的通知。要了解有关我们的GDPR政策的更多信息，请点击这里。 如果您需要有关数据存储的更多信息，请联系gdpr@jove.com. 我们使用/存储此信息以确保您具有适当的访问权限并确保您的帐户安全。我们可能会使用此信息向您发送有关您的帐户，您的机构访问权限和/或其他相关产品的通知。要了解有关我们的GDPR政策的更多信息，请点击这里。 如果您需要有关数据存储的更多信息，请联系gdpr@jove.com。 我们使用/存储此信息以确保您具有适当的访问权限并确保您的帐户安全。我们可能会使用此信息向您发送有关您的帐户，您的机构访问权限和/或其他相关产品的通知。要了解有关我们的GDPR政策的更多信息，请点击这里。 如果您需要有关数据存储的更多信息，请联系gdpr@jove.com。 您已经请求试用，JoVE代表将很快与您联系。如果您需要立即的帮助，请通过subscriptions@jove.com给我们发送电子邮件。 请点击此处激活您的12小时免费试用版。如果您不想立即开始试用，则可以随时重新登录JoVE。 开始试用 We use cookies to enhance your experience on our website. By continuing to use our website or clicking “Continue”, you are agreeing to accept our cookies. Your free access has ended. Thank you for taking us up on our offer of free access to JoVE Education until June 15th. Your access has now expired. If you would like to continue using JoVE, please let your librarian know as they consider the most appropriate subscription options for your institution’s academic community. Provide feedback to your librarian If you have any questions, please do not hesitate to reach out to our customer success team.