松弛的 pHOT-1 DNA - TopoGEN TopoGEN中国-蚂蚁淘生物

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松弛 pHOT -1 质粒 DNA 是检测 DNA 旋转酶超螺旋活性的理想底物。

SKU：TG2035类别：DNA 底物标签：dna 底物e, phot1, 松弛 dna 底物, 松弛 phot1 说明产品信息运输和储存资源

松弛 pHOT-1 是一种 DNA 质粒，适合测定 DNA 旋转酶的超螺旋活性。它还可用于分析 DNA 连接数的变化以评估嵌入。使用高纯度拓扑 I 松弛反应制备质粒，然后对松弛产物进行失活和重新纯化。然后，TopoGEN 工作人员验证每批样品的松弛状态，并验证大肠杆菌 DNA 旋转酶和金黄色葡萄球菌 DNA 旋转酶可以使底物超螺旋。

< p>质粒 pHOT-1 含有源自四膜虫核糖体基因重复的高亲和力拓扑 I 切割位点（Westergaard 及其同事描述的十六聚体序列，参见 Bonven 等人，1985）。该构建体可用作拓扑 I 切割底物，因为在不存在喜树碱的情况下，该酶可在十六聚体位点有效切割。这使得 t研究人员严格评估新的潜在拓扑结构 I 抑制剂，因为单一背景裂解是内置对照；如果试剂刺激包含十六聚体位点的片段中的该序列和/或任何其他序列的切割，则容易显露出显着的切割。通常，很难捕获 DNA 上的拓扑 I 切割；由于裂解复合物按化学计量消耗酶，因此必须使用更多的酶。因此，DNA 切割分析需要更高水平的酶。可以使用 Maniatis 克隆书中的方案中所示的位点从多接头中分离片段，进行末端标记并用作切割底物。

松弛的 pHOT-1 DNA 在环境温度下运输，应保存在室温下。 4°C。

宽松的 pHOT-1 数据表

宽松的 pHOT-1 DNA 参考文献
Bonven 等人，Cell 41:541（ 1985）
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