重组人拓扑异构酶 I 酶，适用于 TopoGEN 的所有拓扑异构酶 I 试剂盒。

高纯度、具有催化活性的人拓扑异构酶 I 在杆状病毒系统中过表达，并纯化至单条带同质性。这些制剂比由人体组织制成的天然 top1 更便宜，并且具有优异的纯度和高比活性。此外，与人类细胞的天然蛋白相比，100 kDa 形式的重组拓扑结构 I 是稳定的，不易发生蛋白水解。

拓扑结构 1 的最终制剂在质粒 DNA 松弛方面具有高度活性.

使用杆状病毒过表达系统制备和纯化的拓扑 I。使用超螺旋 DNA 通过连续 2 倍稀释来测定活性。数据显示该制剂滴定至大约 8 单位/ul。一单位 Human Topo I 可以在 37°C 下 30 分钟内松弛 0.25 μg（250 ng）超螺旋质粒 DNA 50% 以上。

包含 10X 测定缓冲液和稀释缓冲液。这些可以作为 TGS 10X Topo I 检测缓冲液 (TG4095) 单独购买。

1. Human Topo I 经认证不含核酸酶。2．与拓扑 II 的交叉污染检查结果为阴性。在topo II反应条件下，KDNA没有发生十级联反应。 3． Topo I 的最终级分是柱池，并位于以下缓冲液中：20mM NaH2PO4 (pH7.4)、300mM NaCl、50ug/ml BSA、50% 甘油、50mM 咪唑。通过 SDS-PAGE 分析最终级分，结果显示其含有 100 kDa.4 的单一主带。活性测定。松弛试验在最终体积为 25 μl 的 top1 反应缓冲液（10X 反应缓冲液 - 也称为 TGS - 提供）中进行产品为：100 mM Tris-Cl (pH 7.9)、10 mM EDTA、1.5 M NaCl、1% BSA、1 mM 亚精胺、50% 甘油。超螺旋质粒 DNA 的含量为 0.25 μg/反应。用 5 μl（每 20 μl 反应体积）终止缓冲液（5% 肌氨酰、0.0025% 溴酚蓝、25% 甘油）终止反应。反应产物在 1% 天然琼脂糖凝胶上进行分析（电泳过程中凝胶或缓冲液中不含溴化乙锭）。

人拓扑异构酶 I 酶在干冰上运输，应保存在 -20°C 下。在最佳储存条件下，其使用寿命约为 6 个月。重复冷冻/解冻循环会加速损失。

材料安全数据

重组人类拓扑异构酶-I-酶数据表

快速入门指南Topo I 评论和引文Yoshizaki A、Yanaba K、Okawa A、Asano Y、Kadono T、Sato S：用 DNA 拓扑异构酶 I 和弗氏完全佐剂进行免疫通过白细胞介素 6 信号传导诱导皮肤和肺纤维化和自身免疫。氩气关节炎和风湿病 2011, 63: 3575-3585。 doi：10.1002/art.30539。Zhang L，Sullivan P，Suyama J，et。 al：表皮生长因子诱导的乙酰肝素酶核仁定位增强了脑转移性乳腺癌中 DNA 拓扑异构酶 I 的活性。分子癌症研究 2010 年，8：278-290。 doi: 10.1158/1541-7786.MCR-09-0375