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活体成像两种检测技术介绍
活体成像 | 特点 | 优点 | 缺点 |
生物发光检测 bioluminescence | ★荧光素酶（Luciferase）对基因、细胞和活体动物进行标记； ★荧光素酶催化底物（例如荧光素钾盐）反应后，会产生化学发光。这种光是由化学反应而来，不需要激发光； ★标记方法是通过克隆技术，将荧光素酶的基因插入到预期观察的细胞染色体内，通过对克隆细胞进行筛选，培养出能稳定表达荧光素酶的细胞株。再将细胞株转移至特定的小鼠体内形成模型。 | ★特异性强，无自发荧光； ★高灵敏度，在体内可检测到几百个细胞，检测的深度在3-100px； ★定量精确 | ★信号较弱，检测时间较长；★仪器精密度要求较高； ★细胞或基因需要转基因标记； ★不可用于人体，不适用于抗体、多肽等标记 |
荧光检测 fluorescence | ★采用荧光报告基因(GFP、RFP等)或荧光染料进行标记； ★需要外接激发光源，利用报告基因、荧光蛋白质或染料产生的荧光，就可以形成体内的生物光源。 | ★荧光染料、蛋白标记能力强； ★信号强，成像速度快，操作简便，实验成本较低； ★未来可用于人； ★适用范围广，可以是动物、细胞、微生物，也可以是抗体、药物、纳米材料等。 | ★存在自发荧光，影响灵敏度； ★光容易被动物组织吸收； ★检测深度受限； ★背景光干扰，定量准确度低 |
★生物发光检测技术相关试剂和推荐品牌
荧光素酶及对应底物 | 底物产品品牌（Goldbio） | 底物产品品牌（Biotium） | 底物产品品牌（Bio-world） | 底物产品品牌（sigma） | |||
萤火虫荧光素酶fireflyluciferase/底物D-Luciferin （D-荧光素） | D-Luciferin,PotassiumSalt（D-荧光素钾盐） | D-Luciferin,PotassiumSalt（D-荧光素钾盐） | D-Luciferin,PotassiumSalt（D-荧光素钾盐） | D-Luciferin,PotassiumSalt（D-荧光素钾盐） | |||
LUCK-100mg | $54 | #10101/10mg | $60 | 40400076-1/50mg | $52.9 | 50227-1mg | $158 |
LUCK-500mg | $194 | #10101-1/50mg | $176 | 40400076-2/100mg | $90.05 | ||
LUCK-1g | $254($199) | #10101-2/1G | $633 | 40400076-4/1g | $278.42 | 50227-1g | $1980 |
D-Luciferin,SodiumSalt（D-荧光素钠盐） | D-Luciferin,SodiumSalt(D-荧光素钠盐) | 无钠盐 | D-Luciferin,SodiumSalt（D-荧光素钠盐） | ||||
LUCNA-100mg | $54 | #10102/10mg | $70 | L6882-10mg | $252 | ||
LUCNA-500mg | $194 | #10102-1/50mg | $186 | L6882-50mg | $1020 | ||
LUCNA-1g | $254($199) | #10102-2/1G | $633 | L6882-100mg | $1880 | ||
D-LuciferinFirefly,freeacid（荧光虫荧光素游离酸） | D-Luciferin,FreeAcid(D-荧光素游离酸) | D-LuciferinFreeAcid(D-荧光素游离酸) | D-Luciferin | ||||
L-123-500mg | $209 | #10100-1/50mg | $176 | 21530055-1/50mg | $465.33 | L9504/50mg | $1100 |
L-123-1g | $276 | #10100-2/1g | $633 | 21530055-1/100mg | $956.89 | L9504/100mg | $1940 |
海肾荧光素酶Renillaluciferase/Coelenterazine（腔肠素） | Coelenterazine(天然腔肠荧光素) | Coelenterazine(天然腔肠荧光素) | 无 | Coelenterazine,native(天然腔肠荧光素) | |||
CZ2.5mg | $60 | #10110/50ug | $60 | C2230-50ug | $152 | ||
CZ5mg | $93 | #10110-2/250ug | $130 | ||||
CZ25mg | $329 | #10110-1/1mg | $222 | ||||
Coelenterazine400a | Coelenterazine400a | 无 | |||||
C-320-1mg | $73 | #10125/50ug | $62 | ||||
C-320-10mg | $281 | #10125-2/250ug | $135 | ||||
C-320-25mg | $585 | #10125-1/1mg | $233 |
★活体技术荧光检测
荧光蛋白标记 | 适用于标记细胞、病毒、基因等，通常使用的是GFP、EGFP、RFP（DsRed）等； | |
荧光染料标记 | 适用于标记抗体、多肽、小分子药物等；常用的有Cy3、Cy5、Cy5.5及Cy7 | |
量子点标记（新的标记方法） | 适用于标记肿瘤，主要应用在活细胞实时动态荧光观察与成像； 量子点（quantumdot)是一种能发射荧光的半导体纳米微晶体，外观恰似一极小的点状物。量子点荧光比有机荧光染料的发射光强的20倍，稳定性强100倍以上，具有荧光发光光谱较窄、量子产率高、不易漂白、激发光谱宽、颜色可调，并且光化学稳定性高，不易分解等诸多优点。 |
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