HeLa 全细胞裂解物 (W09-000-364) |罗克兰-蚂蚁淘生物

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Rockland Immunochemicals 生产的即用型 HeLa 全细胞裂解物来自细胞使用高度精炼的提取方案的生产线可确保极高的质量、蛋白质完整性和批次间的重现性.所有提取物均使用 4-20% 梯度凝胶通过 SDS-PAGE 进行测试，并使用针对关键细胞信号转导成分的抗体进行免疫印迹分析，以确认高分子量和低分子量蛋白质的存在。

应用说明

W09 -000-364 已通过 SDS-PAGE 和蛋白质印迹测试。即用型 HeLa 全细胞裂解物特别制备为阳性对照，用于通过 SDS-PAGE 和随后的蛋白质印迹分析进行分离。裂解物在变性缓冲液中制备，不含解离剂（即未添加 2-巯基乙醇或二硫苏糖醇）。加热裂解液至 95° C 5 分钟并迅速冷却。如果需要离解条件，请在加热前添加还原剂。根据凝胶的大小规格，建议每条泳道的上样量为 10-20 µl。

纯度/特异性

Hela 细胞在补充有 10% 胎牛血清的 Dulbecco 培养基中生长。细胞用PBS，然后在 m 中的冰上孵育改良的 RIPA 缓冲液，含有 150 mM 氯化钠、50 mM Tris HCl、pH 7.4、1 mM EDTA、1.0% NP-40、0.5% 脱氧胆酸钠、0.1% SDS 和 0.01% (w/v) 叠氮化钠以裂解cells.Protein integrity was ensured using a cocktail of protease inhibitors with a broad specificity for inhibition of aspartic,半胱氨酸，丝氨酸蛋白酶以及氨肽酶（0.1 mM AEBSF HCl，0.08 µM抑肽酶，5 µM Bestatin，1.5 µM E-64，还添加了 2 µM 亮肽素半硫酸盐、1 µM 胃酶抑素 A）、磷酸酶抑制剂 1 mM NaF 和 1 mM Na3VO4。离心去除细胞碎片。使用市售试剂盒通过改良的 Lowry 测定法测定蛋白质浓度。将蛋白质浓度调整至 2 mg/ml，然后加入等体积的 2X SDS-PAGE 样品缓冲液。

展开说明规格说明：HeLa 全细胞裂解物 - W09-000-364同义词：Hela Cells, HeLa Lysate, Human Derived Whole Cell Lysate, Human Derived HeLa Whole 细胞裂解物测试应用：SDS-PAGE、WB 建议应用：其他查看参考资料来源物种：人类细胞系：HeLa - 人表皮样癌裂解物分级分离：全细胞裂解物裂解物刺激：未刺激培养类型：组织培养物理状态：液体感应：无（对照）浓度BCA 检测：1.0 mg/mL缓冲液：1X SDS-PAGE 样品缓冲液（62.5 mM Tris HCl、2% SDS、10% 甘油和 0.005% 溴酚蓝，pH 6.8）防腐剂：无稳定剂：10% (v/v) 甘油运输条件：干冰储存条件：将小瓶储存在 -70° C 或更冷的环境中。为了延长储存时间，等分内容物以尽量减少冷冻/解冻循环。有效期：有效期为自收到之日起三 (3) 个月。参考文献 (1) Dorfman A et阿尔。在氧化锌纳米棒阵列支持物上进行的新型端粒重复延伸测定。 J Nanosci 纳米技术。 (2008)ApplicationsUndefinedPubMed Related ProtocolsFluorescent Western Blotting ProtocolHistone Immunoblotting ProtocolIn Cell Western (ICW) ProtocolIP-WB with TrueBlot® ProtocolMulti-Lysate Western Blotting ProtocolNuclear & Cytoplasmic Extract ProtocolWestern Blotting (WB) ProtocolCertificate of Analysis LookupDisclaimer

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