1.实验介绍
( 1 )MTT工作原理为:在电子耦合试剂存在的情况下,可以被线粒体内的脱氢酶还原生成高度水溶性的黄色的甲臜产物(formazan)。颜色的深浅与细胞的增殖成正比,与细胞毒性成反比。使用酶标仪在450mM波长处测定OD值,间接反映活细胞数量。
( 2 )CCK-8工作原理为:该试剂中含有WST-8【化学名:2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑单钠盐】,它在电子载体1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓硫酸二甲酯(1-Methoxy PMS)的作用下被细胞中的脱氢酶还原为具有高度水溶性的黄色甲瓒产物(Formazan dye)。生成的甲瓒物的数量与活细胞的数量成正比。因此可利用这一特性直接进行细胞增殖和毒性分析。
( 3 )MTT/CCK8法应用非常广泛,如药物筛选、细胞增殖测定、细胞毒性测定、肿瘤药敏试验以及生物因子的活性检测等。
2.实验流程3.实验结果活力计算:细胞活力*(%)=[A(加药)-A(空白)]/[A(0加药)-A(空白)] ×100A(加药):具有细胞、MTT/CCK溶液和药物溶液的孔的吸光度A(空白):具有培养基和MTT/CCK溶液而没有细胞的孔的吸光度A(0加药):具有细胞、MTT/CCK溶液而没有药物溶液的孔的吸光度细胞增殖检测(MTT/CCK8)1.检测原理(1) MTT工作原理为:在电子耦合试剂存在的情况下,可以被线粒体内的脱氢酶还原生成高度水溶性的黄色的甲臜产物(formazan)。颜色的深浅与细胞的增殖成正比,与细胞毒性成反比。使用酶标仪在450mM波长处测定OD值,间接反映活细胞数量。(2) CCK-8工作原理为… [了解更多]
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