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培养活细胞的观察方法-资讯wiki版
培养活细胞可用相差显微镜,也可用缩时摄影直接记录活细胞的动态变化,还可将离体活细胞染色。 一、相差显微镜直接观察法: 活细胞对光线是透明的,光线通过活细胞时,波长和振幅几乎没有改变,所以用普通光镜无法看清未经染色的活细胞。为了观察活细胞的结构,则需要通过其他途径提高结构的反差。20世纪30年代,荷兰物理学家Zernike设计的相差显微镜利用光的衍射和干涉特性,把透过标本不同区域的光波的光程转变成振幅差,使细胞内各种结构之间呈清晰可见的明暗对比,从而成功地解决了生物学上的难题。 相差显微镜由相差聚光器和相差接物镜两个主要部分组成。它与普通光镜相比多了两个部件,一个是在聚光器上增加一个环形光阑,使透光聚光器的光性形成空心光锥、聚焦到标本上。另一个是在物镜的后焦面增加一个相板,相板有一个环形区,其大小适好通过环形光阑的直射光,相板各区渡以不同物质,使得通过环形区的光比通过相板其他部位的光超前或滞后1/4波长。相差显微镜的基......阅读全文


干细胞培养方法:两种膜的结合

Clinic大学的研究人员证实,他们设计的一种新的成体干细胞培养方法能够使成体干细胞高效长成角膜干细胞。眼科专家Ana Fernández Hortelano证实,这种培养技术已经成功用于治疗70只兔子的角膜疾病。该研究的目的是希望能够修复受损的上皮细胞并因此恢复角膜的透明。这项研究证实了利


生物制药过程不同阶段糖类辅料的应用

药用辅料一般是指在生物制剂配方中包含的非活性成分,虽然是非活性成分,但药用辅料往往具备赋形,成型,增溶,助溶等作用,甚至会影响药效,药品质量和安全性等方面。所以,药用辅料在整个制药过程一直受到各制药企业的重视。药用辅料同时需要达到较高的标准才可在生产中使用,如高纯度,低内毒素,符合多国药典标准,以及


邮寄细胞收到后需要注意的事项

收到细胞株包裹时,请检查细胞株冷冻管是否有解冻情形,若有请立即通知。细胞株请尽速开始培养,或立即冷冻保存(置于-70 ℃,隔夜后,移到液氮)。2. 冷冻细胞解冻程序:2.1. 依据细胞株数据单指定之基础培养基种类、血清种类和其它指定之成份和比例, 制备培养基。绝大多数之细胞均无法立即适应不同之基


自学动手共聚焦显微镜荧光样品的制备全过程

一、样品的预处理 样品的预处理包括给药、切片或细胞标本的制备。其中给药过程要根据实验目的来进行,在这里主要介绍切片和细胞标本的制备。 1、组织切片样品的处理 其制作过程主要包括组织样品固定、切片制作。组织切片的优点是能够完好地保存细胞间的相互关系和结构,因此是生物医学实验中应用


生物学实验室常规设备介绍

生物学实验室常规设备介绍:1、超净工作台/生物安全柜细胞培养需要无菌要求高的环境,在进行操作细胞的实验时,需要在100级的空气下进行,那我们就需要购买能提供百级洁净度的超净工作台或生物安全柜了。2、二氧化碳培养箱细胞培养所用的缓冲体系是碳酸氢钠+HEPES体系,所以需要二氧化碳提供缓冲能力维持pH。


细胞计数的原理

一、原理培养的细胞在一般条件下要求有一定的密度才能生长良好,所以要进行细胞计数。计数结果以每毫升细胞数表示。细胞计数的原理和方法与血细胞计数相同。在细胞群体中总有一些因各种原因而死亡的细胞,总细胞中活细胞所占的百分比叫做细胞活力,由组织中分离细


常规培养细胞计数、保存、运输等法

细胞悬液制备后,要计算所含的细胞数量。一般以细胞数/毫升表示。用品:细胞悬液 培养液 计数板程序用酒精冲洗计数板后 擦净,将盖片覆在计算板上,微微移向一侧,以便滴加细胞悬液.取一吸管伸入培养瓶,轻轻吸打细胞悬液混匀。从盖片边缘滴加细胞悬液,使其充满计数板和盖片间的空隙中注意:勿使液体漫过


一种新型细胞划痕实验方法的简要介绍

一.传统细胞迁移实验技术—划痕实验1.基本原理细胞划痕(修复)法是简捷测定细胞迁移运动与修复能力的方法,类似体外伤口愈合模型,在体外培养皿或平板培养的单层贴壁细胞上,用微量枪头或其它硬物在细胞生长的中央区域划线,去除中央部分的细胞,然后继续培养细胞至实验设定的时间(例如72h),取出细胞培


蛋白的生物活性测定方法

结晶紫法活性测定1、取对数生长期的人胰腺癌SW1990细胞,用0.25%胰酶(以无钙镁离子PBS溶液配制,pH7.4)消化后,加入RPMI-1640培养基(10%新生牛血清,100U/ml青霉素,100U/ml链霉素,pH7.2)吹打细胞,使形成细胞悬液。进行细胞计数,使细胞数为2~2.5x105个


MTT(四唑盐)比色法

四唑盐(MTT)比色法可应用于:(1)检测细胞存活和生长;(2)大规模的抗肿瘤药物筛选;(3)细胞毒性试验以及肿瘤放射敏感性测定;(4)生物活性因子的活性检测。实验方法原理活细胞中脱氢酶能将四唑盐还原成不溶于水的蓝紫色产物(formazan),并沉淀在细胞中,而死细胞没有这种


单克隆抗体制备技术

单克隆抗体制备技术 单克隆抗体制备标准化操作方案(McAb-sop) 第一章: 小鼠免疫 第二章: 细胞融合 第三章: 细胞建株 第四章: 细胞株鉴定 第五章: 腹水制备 第六章: 抗体纯化和鉴定(略) 第一章. 小鼠免疫(BALB


单克隆抗体制备技术

单克隆抗体制备技术 单克隆抗体制备标准化操作方案(McAb-sop) 第一章: 小鼠免疫 第二章: 细胞融合 第三章: 细胞建株 第四章: 细胞株鉴定 第五章: 腹水制备 第六章: 抗体纯化和鉴定(略) 第一章. 小鼠免疫(BALB


小鼠胚胎干细胞的培养

实验概要了解小鼠胚胎干细胞的培养方法。主要试剂1. 贮存液 DMEM(高糖) 胎牛血清 L-谷氨酰胺(200mM) MEM NEAA(10mM) HEPES(1M) β-巯基乙醇(55Mm) 转铁蛋白50mg/ml 胰岛素5mg/ml 亚硒酸钠300μM 黄体酮(20μM) 腐


在微流控平台下高通量研究3D神经网络的形态特征(一)

介绍:建立生理学上模拟体内环境的体外模型对了解神经系统疾病机制和药物研发具有至关重要的作用。干细胞诱导的神经细胞培养在3D环境下,对于化合物筛选和疾病模型建立有较大的潜力。3D培养被认为是最接近人体组织的体外培养方法,无论是结构、细胞生长特点及细胞与细胞和细胞与基质之间的相互作用,都很好的模拟了体内


单克隆抗体制备技术

单克隆抗体制备标准化操作方案(McAb-sop)第一章.小鼠免疫(BALB/c)小鼠免疫是单抗制备的关键一环,质控小鼠免疫是制备优质单抗的唯一保证。一.小鼠免疫分两程方案:根据免疫学原理小鼠免疫方案设计如下:1.短程免疫方案:第一次: 1d 100ug


一种新型细胞划痕实验方法的介绍

一.传统细胞迁移实验技术—划痕实验1.基本原理细胞划痕(修复)法是简捷测定细胞迁移运动与修复能力的方法,类似体外伤口愈合模型,在体外培养皿或平板培养的单层贴壁细胞上,用微量枪头或其它硬物在细胞生长的中央区域划线,去除中央部分的细胞,然后继续培养细胞至实验设定的时间(例如72h),取出细胞培


伯乐细胞计数器和赛默飞细胞计数仪区别

美国伯乐细胞计数仪主要代表型号是 TC10,和TC20.但是TC10已经停产,现在主要是TC20在做活动 基本信息 商品名自动细胞计数仪 品牌名bio-rad|Biorad(OG) 原厂型号TC20 Automated Cell Counter 原厂货号145010


肺细胞再生研究最新进展

就像所有器官那样,人肺部刚开始时是作为未分化的干细胞团块存在的。但是在几个月后,这些细胞形成有序的结构。它们聚集在一起,一些细胞形成肺部气道,其他的细胞形成肺泡。肺泡是我们的人体交换氧气和二氧化碳的地方。在理想的情形下,最终的结果是形成两个健康的会呼吸的肺部。 近年来,自从科学家们首次发现


监控细胞状态,你有很多选择

如果你在真核系统上开展生物学研究,那么你有很大的机会要培养细胞。作为实验的原材料,细胞的状态很重要。不过,如今的实验室中有无数的细胞系,每一种都有其独特的生长特性,研究人员如何才能确定细胞培养物是健康的? 各大厂商已开发出一系列工具来监控细胞培养物。一些是专门的检测,来监控药物筛选等应用中的细


CCK8检测细胞增殖/毒性的原理、方法及注意事项

一、CCK8检测细胞增殖/毒性的原理CellCountingKit-8(简称CCK-8)试剂可用于简便而准确的细胞增殖和毒性分析。其基本原理为:该试剂中含有WST-8【化学名:2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑单钠盐】


靶细胞杀伤实验总论 1

细胞介导的免疫反应(cell mediated immune, CMI)在机体抗感染及抗肿瘤免疫、移植排斥反应和自身免疫病中发挥重要的作用。CMI的主要效应细胞之一为细胞毒T淋细胞(cytotoxic T lymphocyte,CTL)。目前在医学基础与临床研究中重视CTL活性测定,将其作为


MTT(噻唑蓝)原理、用途、实验步骤

什么是MTT,什么是MTT法MTT,商品名称噻唑蓝全称为3-(4,5)-dimethylthiahiazo(z-y1)-3,5-di-phenytetrazoliumromide汉语化学名为3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐,一种黄颜色的染料,由于应用于细胞存活率的检


细胞消化的小技巧(一)

每个做细胞实验的人,不管去哪\"浪”,心里都会有个牵挂:我的细胞过两天要传代!大部分组织细胞离体培养时,会以贴壁的形式生长(除了取自血、脾或骨髓的细胞);完全培养基中的血清,含有许多带阳性电荷的促细胞附着因子(层黏连蛋白Laminine、纤维链接蛋白 Fibronectin 等胞外基质),


原代培养结肠平滑肌细胞(HCSMC)

实验步骤:(一)、取SD 大鼠一只,实验时断椎处死。(二)、在无菌条件下快速自肛门上2 cm 取结肠10 cm 左右,生理盐水中反复灌肠冲洗。(三)、移入含300 U/ml青霉素、300 U/ml 链霉素的HepesRinger缓冲液中浸泡,肠段内外各15 min。(四)、将经抗生素浸泡过的肠段移入


请记住中国科学家周健:宫颈癌疫苗共同发明人

导读: 宫颈癌是由病毒感染而引发的癌症,是一种常见的女性癌症,发病率仅次于乳腺癌。每年,世界约有50万女性被诊断为宫颈癌,其中25万多人死亡。 1980年,德国科学家哈拉尔德·楚尔·豪森(Zur Hausen)证实,宫颈癌是由人乳头状瘤病毒(HPV)感染所致。 1991年,澳大利亚昆士兰大


全能细胞质控仪在细胞研究中的应用

流式细胞仪已被广泛应用于从基础生命科学研究到临床医学研究,涵盖了细胞生物学、免疫学、血液学、肿瘤学、药理学、微生物学、遗传学等领域在各学科中发挥重要作用。传统鞘液流系统仪器体积较大,复杂的软件系统需要专人操作和维护,大大限制了流式细胞仪在普通实验的使用。默克生命科学秉承一贯的创新理念,突破流式研发的


流式细胞仪免疫磁珠亲和板结合分离法分选c kit+肝癌细胞

肿瘤干细胞研究需要获取高纯度、高活力、高增殖能力的肿瘤亚群细胞,并尽量避免混杂细胞、低活力、低增殖能力细胞对细胞亚群特性的干扰。笔者在前期研究的基础上,比较了流式细胞仪分选(flow cytometry sorting,FCMS)、免疫磁珠分选(magnetic cell sorting,MACS)


微阵列—比较基因组杂交技术检测染色体异常

【摘要】近年微阵列一比较基因组杂交(microarraycomparativegenomichybirdization,microarray.CGH)技术被应用到临床细胞遗传学领域。该技术是选择DNA特殊片段作为靶,固化在载体上,形成密集、有序的分子微阵列。然后,从测试标本中提取DNA,将测试DNA


大昌华嘉-法国fogale开展活细胞浓度分析仪样机试用活动

发酵过程中,细胞浓度是一个非常重要的生理参数,不但可以计算比生长速率,底物消耗速率、生物量产率和维持系数等参数,还可以及时判断是否有染菌等异常情况发生。目前测量细胞浓度的方法主要有化学法(DNA/RNA分析)和物理法(干重、光密度、呼吸商等)两大类。一般来说,与物理法相比,化学法能较准确的测量有