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SICGEN抗体是一家葡萄牙生物技术公司，专门研发和生产用于生命科学研究的抗体。公司利用尖端技术，以最优的质量和最具竞争力的价格，致力于成为世界多克隆抗体及抗体相关产品和服务的提供商。它既是一个产品公司也是一个服务公司，它的主要业务是发现和销售用于研究和科学目的的新抗体。多年来，SICGEN一直为国内外主要大学、科研机构、制药企业和生物技术公司生产定制的多克隆抗体。

GFP非常适合蛋白质标记，这是其无与伦比的成功的最大原因之一。尽管它非常适合实时成像，例如，作为TP53MITE-seq屏幕的报告器[3另外，其他的应用导致GFP荧光的淬灭，这使得必须使用抗GFP抗体。组织样品的冷冻保存，组织学制备和使用固定剂通常会导致GFP荧光完全或部分丢失，这使得使用抗GFP抗体对于获得可靠的结果必不可少。通过WesternBlotting检测GFP标记的蛋白，并通过免疫沉淀法研究蛋白之间的相互作用，也有必要使用GFP抗体。抗GFP抗体可作为多克隆或单克隆抗体使用，适用于在Western印迹，免疫沉淀，免疫组织化学，免疫细胞化学定位和免疫吸附测定（ELISA）上检测GFP，GFP变体和GFP融合蛋白。

随着抗GFP抗体的应用数量增加，提供这种试剂的供应商数量也增加了。Labome已对正式出版物进行了调查，以汇编已在正式文章中成功使用的抗GFP抗体列表（表1）。根据此调查，以下部分提供了主要供应商的列表以及对这些抗体的简短回顾。表2列出了通常用于不同方法的抗体。

一些供应商还提供抗GFP单域抗体或纳米抗体。这些抗体由单个可变抗体结构域组成，并基于衍生自骆驼科动物的单结构域抗体。这些抗体比常规抗体小得多，并且正在发现重要的用途。CaussinusE等人率先开发了deGradFP（图2），这是一种遗传编码的方法，可在任何真核系统中快速消耗目标GFP标记的蛋白质[100]]。该系统依赖于融合至F-box结构域的针对GFP的单结构域抗体片段（vhhGFP4）。该融合蛋白结合GFP并将其引导至蛋白酶体进行降解。当GFP标记的蛋白是功能蛋白的唯一来源时，可以分析基因功能而无需担心任何残留蛋白的干扰。Ries等人使用GFP标记的蛋白质和小的高亲和力单域抗GFP抗体，获得了用于分析微管，神经元和酵母细胞的纳米级空间分辨率[101]。BhogarajuS等人用Chromotek的抗GFP琼脂糖珠（GFP纳米抗体/VHH）免疫纯化了带有eGFP标签的SdeA，用于液相色谱-质谱分析[102]。LundbyA等人使用了来自ChromoTek的类似GFP-Trap磁珠免疫沉淀A549细胞裂解物中的GFP偶联蛋白[83]。

抗GFP抗体识别维多利亚水母GFP的其他变体。

Western印迹后缺乏信号可能表明存在一些不同的问题。没有传输或传输非常差意味着没有信号。可能无法通过Ponceau-S染色检查到膜的良好转移。气泡的存在也会导致传输不良。GFP标记蛋白的表达水平可能太低。加载更大体积的样品，并包括阳性对照。稀释度非常高的抗体可能是问题所在，请尝试使用几种不同浓度的抗体来探测蛋白质印迹。另外，极有可能的是GFP标签不合框架且未表达，导致缺少任何信号。

在某些实验条件下，GFP荧光会部分或完全丢失。因此，某些表达GFP标记蛋白的细胞结构可能难以可视化或成像。GFP-Booster是一种源自Camelid的VHH域结合蛋白，与强荧光染料偶联。这稳定并增强了荧光信号。

抗体交叉反应性是一个常见问题，通常会产生比预期更多的条带。更严格的实验条件可以解决此问题。GFP-Trap可用于免疫沉淀实验。GFP-Trap是具有更高特异性，稳定性和亲和力的单域抗体（源自骆驼科动物）。但是，必须考虑的是，如果生成了截短的融合蛋白，则如果存在标签，抗体也会检测到截短的融合蛋白，并产生多个条带。

绿色荧光蛋白（GFP）是来自维多利亚水母（Aequoreavictoria）的一种小蛋白。它是由下村修（OsamuShimomura）发现的，并且在蓝色到紫外线范围内的光激发时显示出绿色荧光。在许多其他海洋生物中也发现了相关的荧光蛋白，例如珊瑚，海葵和海紫罗兰。当MartinChalfie证明GFP基因可以克隆并表达为发光标签时，GFP成为非常流行的工具。从那时起，它已在细菌，酵母，粘液霉菌，蠕虫，果蝇，斑马鱼，哺乳动物细胞系和植物中表达。GFP在其N和C端可耐受多种蛋白质融合，并且不需要任何辅助因子来发出荧光，这使其成为使用最广泛的蛋白质标签之一。这项开创性的工作为研究细胞与发育生物学中的重要问题开辟了新途径。通过许多科学家的努力，尤其是RogerTsien小组的努力，GFP的调色板已扩展到绿色以外。这允许使用多种变体同时追踪许多生物过程。2008年，OsamuShimomura，MartinChalfie和RogerTsien因其对GFP发光世界的贡献而获得了诺贝尔化学奖。

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