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X-tremeGENE siRNA转染试剂是一个优化的短干扰RNA(siRNA)的siRNA和质粒DNA的混合物形成的复合物的脂质体转染试剂。转染复合物可以直接和有效地引入到动物细胞中的siRNA诱导的基因沉默。特价 :

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产品简介:

应用

X-tremeGENE siRNA转染试剂是一个优化的短干扰RNA(siRNA)的siRNA和质粒DNA的混合物形成的复合物的脂质体转染试剂。转染复合物可以直接和有效地引入到动物细胞中的siRNA诱导的基因沉默。

注:X-tremeGENE siRNA转染试剂的许多常用的细胞类型,包括HeLa细胞,NIH 3T3,HEK-293,CHO-K1,和COS-7,和几个硬盘转染的细胞系,例如HT29,可有效将siRNA导入人肺腺癌细胞株。(见 典型的实验 )。

已成功与的X-tremeGENE的siRNA转染试剂转染的细胞,为了跟上时代的列表,请访问我们的转染特殊兴趣:www.roche-applied-science.com/transfection。在同一个上,你还可以了解更多有关此试剂。

优点 转染siRNA的效率很低。 典型实验 的证明。 适用于许多不同的细胞类型。要查看新的新名单,已成功转染的细胞与的X-tremeGENE的siRNA转染试剂,访问www.roche-applied-science.com/transfection。 促进有效的基因敲除,短干扰RNA,与的X-tremeGene的siRNA转染试剂转染,撞倒在许多不同类型的细胞中的90%以上的基因的表达。 大限度地提高实验的灵活性,您可以使用一个单一的siRNA共转染为基础的基因敲除实验试剂。 产生有意义的结果。的的X-tremeGene的siRNA转染试剂的细胞的细胞毒性低,确保您所观察到的细胞效应是由于而非转染的siRNA转染程序。 易于使用。转染过程只涉及两个简单的步骤:(1)混合和培养的稀释转染试剂与稀释的siRNA复合物的形成;(2)复杂的细胞。 节省了时间。X-tremeGENE siRNA转染试剂以及在存在或不存在的血清。因此,不需要与此试剂转染转染之前或之后的介质发生变化(例如,无血清培养基)。

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产品明细:

产品描述

成分:的X-tremeGENE的siRNA转染试剂的脂肪和其他成分 ??,动物产品,是一个专有的混合在一个无菌过滤的解决方案。

背景资料

短干扰RNA(siRNA)可以直接导入细胞,通过转染。甲脂质体转染试剂,如X-tremeGENE siRNA转染试剂,可以提供一种方便,可靠,高效的车辆提供到动物细胞中的siRNA。因此,罗氏应用科学的X-tremeGENE的siRNA转染试剂可以帮助你学习的细胞和基因敲除功能性后果。(参见 典型实验 一节)。

注:所有产品的RAS提供的基因敲除实验的概述,请访问我们的基因敲除特殊兴趣:www.roche-applied-science.com/geneknockdown。

内容无菌过滤的溶液,在聚丙烯管suppled的。典型的实验

有效X-tremeGENE siRNA转染试剂转染到各种不同的细胞类型的siRNA。例如,见图1。

图1:比较转染试剂的有效性为HPRT(次黄嘌呤磷酸核糖转移酶)击倒在四个不同的细胞类型的实验。细胞转染与HPRT-特异siRNA,使用不同的siRNA转染试剂(包括X-tremeGENE siRNA转染试剂)。转染执行,也可以根据供应商推荐的协议或标准协议使用100纳米的siRNA。在LightCycler®H-HPRT管家基因组(货号03 261 891 001),并在LightCycler®系统,用于测量敲除效率。

当用于共转染为基础的基因敲除,的X-tremeGENE的siRNA转染试剂允许显着的蛋白的表达和有效的击倒的水平(图2和3)。

图2:有效的和特定的基因敲除,在HEK-293细胞中的EGFP表达。细胞的共转染一个EGFP质粒(1 g)和GFP-特异siRNA或EGFP质粒的相同数量的荧光素酶(吕克)特异性siRNA(非沉默siRNA的控制)。共转染为基础的基因敲除实验进行了分析。EGFP的印迹与特异性抗体检测,结果显示特异性表达EGFP。击倒观察到只与特定的GFP的siRNA。

图3的讨论,即使后的细胞在连续接触24小时的转染试剂,用试剂没有造成了显着的死亡率在转染的细胞群体(图3)。(下面继续讨论)

图3:沉默的表达质粒共转染的siRNA。FLAG标记的蛋白质和6.25微升的siRNA溶液(20 M的溶液中的特定的siRNA或用0.6微克表达载体共转染的人293T胚胎肾细胞相同浓度的对照siRNA针对LAMC)。从其他三个供应商使用或者X-tremeGENE的siRNA转染试剂或试剂转染的程序进行。没有任何进一步的介质变化的细胞孵育24小时后,脂质体转染法。然后,在显微镜下检查细胞和评估他们的活力。celll蛋白质的免疫印迹分析,按照标准方法。该箭头标记的FLAG标签蛋白的预期位置。等量的细胞蛋白(20微克/泳道),施加到原来的凝胶。

作为判断的具体镇压蛋白表达,然而,只有两个用试剂,从供应商1 A和X - tremeGENE siRNA转染试剂,能够同时提供DNA和siRNA进入细胞。被视为一个明显的特异性siRNA抑制靶基因的表达后,脂质体转染试剂的供应商或X-tremeGENE的siRNA转染试剂。当这两种试剂的性能进行了比较,的X-tremeGENE的siRNA转染试剂,似乎给骄人的业绩。更多的蛋白的表达与的X-tremeGENE的siRNA转染试剂转染后,从而表明该化合物可以得到高转染效率。

结果与其他转染试剂:试剂没有很好执行。当从供应商B的试剂使用,检测蛋白的表达,但RNAi效果是完全不存在的,表明RNA没有该化合物有效地转染。提供的DNA / RNA混合物,脂质体转染组件供应商C是完全无效的。

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