德国进口Lonza 4D-Nucleofector细胞核转染系统（原Amaxa 4D-Nucleofector核转仪），创新性地结合经典电穿孔技术和细胞特异性电转染液，实现了DNA、RNA(如crRNA、tracrRNA、gRNA、sgRNA)、RNP核糖核蛋白复合体、蛋白质（如Cas9核酸酶、切口酶、dCas9蛋白、Cas12a/Cpf1核酸酶）、小分子物质高效转染各类哺乳动物贴壁细胞和悬浮细胞。LONZA 4D核转仪由用于小规模转染的X模块（4D-Nucleofector X Unit）、贴壁细胞不经消化进行原位转染的Y模块（4D-Nucleofector YUnit）、单一细胞大规模流式转染的LV模块（4D-Nucleofector LV Unit）、高通量筛选的96孔模块（96-well Shuttle Device）组成。（点击查看LONZA单孔核转仪2B基础款，Nucleofector 2BDevice）LONZA 4D-Nucleofector技术不依赖于细胞有丝分|裂，不受细胞增殖的影响，可直接将外源基因导入细胞核中，即使是未分|裂的原代细胞（如静止的T淋巴细胞或神经元），也可以快速表达。LONZA 4D-Nucleofector对质粒DNA转染效率高达90％，寡核苷酸（如siRNA）转染效率高达99％，面世20年来，已成功转染＞1200种细胞系、＞130种原代细胞，并在干细胞、免疫细胞、神经细胞等各类较难转染的细胞中获得了优秀的转染效果。由于同种细胞系或原代细胞使用相同的转染条件（转染程序和转染试剂盒），LONZA 4D-Nucleofector可实现多种外源物质共转染，例如CRISPR-Cas9基因编辑时共转染2种sgRNA等。图. GFP标记的质粒转染新生儿皮肤成纤维细胞，2小时后用3.5% PFA 固定，共聚焦显微镜可观察到GFP蛋白在细胞核内表达。4D-Nucleofector细胞核转染方法特点1.针对每种细胞优化的电脉冲参数，可将底物导入细胞质甚至是细胞核；2.特殊配方的电转染液，同时提供高转染效率和细胞保护，提高细胞转染后存活率；3.全球共享数据库，专业指导，从细胞来源、传代、培养条件、培养基、到转染后的培养技巧，已形成成熟的实验方案。4D-Nucleofector核转染系统为基因治疗研究、免疫治疗研究、干细胞研究等提供了方便的工具。相比电穿孔在内的其他非病毒转染技术，更具优势：-采用高分子聚合物电极，避免传统铝电极的离子毒害，维持细胞生理状态，提高存活率。-转染后可快速观察实验结果，例如转染GFP后最快2小时可观察到蛋白。-无需自己优化条件，拥有超过650种细胞类型的现成程序，可直接使用，全球共享数据库，超过1500条转染数据可供参考。-可转染包括DNA、mRNA、miRNA、siRNA、RNP、肽、蛋白质在内的多种底物。-可用于难以转染的原代细胞、干细胞、神经元、细胞系。-可不用消化细胞，进行贴壁细胞的原位转染。-灵活的转染规模缩放，可在低、中、高通量中轻松转移，实现2 10^4至1 10^9个细胞数量的轻松扩展。-已在全球8000多家同行评议的出版物中发表。最近，LONZA 4D-Nucleofector核转染系统已广泛应用于通过RNAi、CRISPR-Cas9、CRISPR-Cas12a进行的基因敲除研究、以及iPS诱导多能干细胞、CAR-T的研究中，在包括功能和结构基因组学、药物发现以及基因和细胞疗法的研究中大放异彩。4D核转仪结构和功能应用：4D-Nucleofector细胞核转染系统采用模块化设计，可根据研究者的需求，自行组合数个模块形成一套完整系统。1、C模块：4D-Nucleofector系统的控制单元，内置转染程序，将不同的功能单元（模块）整合为一个系统，以运行不同的应用程序。2、X模块：用于悬浮细胞、或贴壁细胞消化后的小规模转染，转染细胞数量2 10^4至2 10^7。可同时转染2个100 L电转杯、1个16孔电转板条（每孔20 L），每个电转杯、每个孔可独立设置程序。另外在使用96孔模块时，也需要X模块。3、Y模块：用于贴壁细胞不经消化的原位转染，可同时转染1个24孔电转板条（每孔350 L），每个孔可独立设置程序。4、LV模块：用于同一种悬浮细胞、或同一种贴壁细胞消化后的大规模转染，转染细胞数量1 10^7至2 10^9。可使用1mL手动进样电转盘、或20mL连续进样电转盘。通常使用X模块小试摸条件，再用LV模块线性放大转染规模。5、96孔模块：用于同时转染96个样品的细胞，转染细胞数量2 10^4至1 10^6。每个孔可独立设置程序。必须与X模块结合使用。注：常用模块组合参考常规小规模转染：C+X贴壁细胞原位转染：C+Y悬浮+贴壁细胞转染：C+X+Y大规模转染：C+X+LV摸索复杂转染条件：C+X+96孔LONZA 4D-Nucleofector细胞核转染系统参数1.Engineering of CRISPR-Cas12b for human genome editing.Strecker J, et al. 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CRISPR/Cas9 -globin gene targeting in human haematopoietic stem cells.2016 Springer Nature doi:10.1038 (使用4D-Nucleofector LV大规模流式核转染系统转染RNP)立即拨打13521452266，免费咨询4D-Nucleofector核转染系统技术问题+获取报价+申请试用 LONZA中国一级代理商，北京泽平相关产品Lonza4D-Nucleofector LV大规模流式细胞核转染系统Lonza2B细胞核转染系统Lonza 4D/2b-Nucleofector 细胞核转染试剂盒Lonza X-VIVO无血清培养基、干细胞培养基、原代细胞培养基、常规培养基Lonza 人原代细胞Lonza 支原体检测、清除、预防试剂盒、Lucetta 2发光检测仪Lonza 内毒素检测试剂盒/鲎试剂、内毒素专用酶标仪、专用检测软件Lonza 琼脂糖、FlashGel闪胶系统Lonza Moda 实验室管理系统（微生物QC、制药企业专用版）IDT Alt-R CRISPR-Cas9基因编辑系统IDTAlt-R CRISPR-Cas12a/Cpf1基因编辑系统