tech_banner
兔子细胞间粘附分子1(ICAM-1/CD54)酶联免疫分析(ELISA)
本公司为ELISA试剂盒供应商,价格公正,售前,售中,售后全程为您服务。提供免费代测服务,咨询!兔子细胞间粘附分子1(ICAM-1/CD54)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用 目的:本试剂盒用于测兔子血清,血浆及相关液体样本中细胞间粘附分子1(ICAM-1/CD54)的含量。实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中兔子细胞间粘附分子1(ICAM-1/CD54)水平。用纯化的兔子细胞间粘附分子1(ICAM-1/CD54)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入细胞间粘附分子1(ICAM-1/CD54),再与HRP标记的细胞间粘附分子1(ICAM-1/CD54)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的细胞间粘附分子1(ICAM-1/CD54)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中兔子细胞间粘附分子1(ICAM-1/CD54)浓度。试剂盒组成: 试剂盒组成 48孔配置 96孔配置 保存 说明书 1份 1份 封板膜 2片(48) 2片(96) 密封袋 1个 1个 酶标包被板 1 48 1 96 2-8℃保存 标准品:2700ng/L 0.5ml 1瓶 0.5ml 1瓶 2-8℃保存 标准品稀释液 1.5ml 1瓶 1.5ml 1瓶 2-8℃保存 酶标试剂 3 ml 1瓶 6 ml 1瓶 2-8℃保存 样品稀释液 3 ml 1瓶 6 ml 1瓶 2-8℃保存 显色剂A液 3 ml 1瓶 6 ml 1瓶 2-8℃保存 显色剂B液 3 ml 1瓶 6 ml 1瓶 2-8℃保存 终止液 3ml 1瓶 6ml 1瓶 2-8℃保存 浓缩洗涤液 (20ml 20倍) 1瓶 (20ml 30倍) 1瓶 2-8℃保存 注意事项:1. 试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。2. 浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。3. 各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。4. 请每次测定的同时做标准曲线,做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔*孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请zui后乘以总稀释倍数( n 5)。5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6. 底物请避光保存。7. 严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8. 所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9. 本试剂不同批号组分不得混用。10. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准。操作步骤1. 标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在*、第二孔中分别加标准品100 l,然后在*、第二孔中加标准品稀释液50 l,混匀;然后从*孔、第二孔中各取100 l分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50 l,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50 l弃掉,再各取50 l分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50 l分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50 l,混匀后从第七、第八孔中分别取50 l加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50 l,混匀后从第九第十孔中各取50 l弃掉。(稀释后各孔加样量都为50 l,浓度分别为1800ng/L,1200ng/L ,600ng/L,300ng/L, 150ng/L)。2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40 l,然后再加待测样品10 l(样品zui终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。4. 配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍稀释后备用。5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。6. 加酶:每孔加入酶标试剂50 l,空白孔除外。7. 温育:操作同3。8. 洗涤:操作同5。9. 显色:每孔先加入显色剂A50 l,再加入显色剂B50 l,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟. 10. 终止:每孔加终止液50 l,终止反应(此时蓝色立转黄色)。11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。样本处理及要求:1. 血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。3. 尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。5. 组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。6. 标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融.7. 不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。计算:以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。试剂盒性能:1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.95以上。2.批内与批见应分别小于9%和11%检测范围:100ng/L -2000ng/L 保存条件及有效期:1.试剂盒保存:;2-8℃。2.有效期:6个月本公司为国内试剂盒供应商之一,质量保证。公司主页: elisa试剂盒的简单介绍 导读:本文主要讲述关于elisa试剂盒的原理、用途、特点等信息,帮助对elisa试剂盒不了 关于ELISA试剂盒的固相载体原理 良好的ELISA板应该是吸附机能好,空缺值低。为比较不同固相在某一ELISA测定中的优劣, 健康元H7N9试剂盒的商业前景 hbzhan内容导读:随着H7N9禽流感疫情不断扩散,各省市纷纷加强预防及检测禽流感感染的 影响ELISA试验效果常见问题的原因分析和解决办法 ELISA试验以灵敏度较高、特异性较好的特点在临床上得到了广泛的应用,但操作中的各个 小鼠单核细胞趋化蛋白3(MCP-3/CCL7)ELISA试剂盒产品说明 小鼠单核细胞趋化蛋白3(MCP-3/CCL7)elisa试剂盒使用说明书Elisakit规格:48孔配置/9 大鼠丙酮酸激酶M2型同工酶(M2-PK)ELISA试剂盒产品介绍 大鼠丙酮酸激酶M2型同工酶(M2-PK)elisa试剂盒使用说明书Elisakit规格:48孔配置/96