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蛋白质鉴定:考染和银染单点鉴定-资讯-分析测试百科网wiki版
方法:质谱法 原理: 一、利用MALDI-TOF质谱仪 根据肽质量指纹图谱(Peptide Mass Fingerprinting, PMF)与蛋白质数据库中蛋白质的理论PMF比对,就可以鉴定该蛋白质。 优点:速度快,通量高,方法简便。 缺点:灵敏度不足,可检测到的肽段少,对数据库检索是不利的。 肽段分子量精确度往往不够理想,影响鉴定结果。肽段分子质量在2000以上时,在MALDI-TOF-MS中的分辨率会有所下降。蛋白质数据库仍不完善。 二、利用ESI-MS质谱仪 由于MS/MS具有结构分析功能,可以获得检测到的每一肽段的序列。根据一级质谱(MS)测得的精确分子质量和串联质谱(MS/MS)所得的序列信息,通过蛋白质数据库的检索鉴定蛋白质种类。 优点:通过串联质谱大大增加了蛋白质鉴定的准确性。对图谱的精确度和分辨率要求不如PMF高。采用纳升喷雾提高检测的灵敏度。 缺点:通量与速度不如MALDI。数据库检索......阅读全文 常见5种蛋白质中氨基酸的分析实验 在生命科学的基础研究中,分离、提纯蛋白质是重要而繁锁的工作。生物体中各种蛋白质的氨基酸组成(或构筑)不尽相同。鉴定纯蛋白的最基本方法之一是测定其氨基酸的组分及含量。几年来,我们对一些蛋白质样品(达电泳纯)进行氨基酸分析,为鉴定蛋白质的结构与纯度提供了一项指标。有些蛋白质是国内首次提取或报道。现将 七大特点确立 300Å C18的优势应用地位 近年来,随着基因组和蛋白质组计划的实施,对不同蛋白质的快速分析,定性以及定量的需求更大,反相液相色谱以其快速简便,灵敏度高,重复性好,分辨率高等优势受到人们的重视,已成为一种常备的不可缺少的分析手段,并用于多肽药物分离中。反相液相色谱与各种质谱技术的结合也已成为蛋白质结构分析的重要手段和发展方向。C MALDI-TOF MS质谱仪 在临床微生物鉴定中的应用 19世纪末“正电荷粒子束在磁场中发生偏转”被发现后,1912年世界上第一台质谱仪在英国面世,从此一种通过测量离子电荷质量比,而进行样品成分和结构分析的方法在生物学及医学上大放异彩。质谱以其灵敏度高、特异性强、分析速度快、多指标同时检测等特点跻身高端定量检测分析仪器行列。分辨率、灵敏度、质量范围、质量 质谱分析法在微生物临床鉴定中的应用 19世纪末“正电荷粒子束在磁场中发生偏转”被发现后,1912年世界上第一台质谱仪在英国面世,从此一种通过测量离子电荷质量比,而进行样品成分和结构分析的方法在生物学及医学上大放异彩。质谱以其灵敏度高、特异性强、分析速度快、多指标同时检测等特点跻身高端定量检测分析仪器行列。 分辨率、灵敏度、质量 第三届全国生物质谱学术交流会圆满闭幕 朱云平研究员 军事医学科学院放射与辐射医学研究所 题目:蛋白质/翻译后修饰鉴定的数据质量控制 孙瑞祥副研究员 中国科学院计算技术研究所 题目:电子转运裂解(ETD)质谱的特征发现及其在pFind搜索引擎中的利用 国防科技大学机电工程与自动化学院 谢红卫教授 来自国 寻找中西医学交汇点 推动中医药国际合作 个体治疗:中医药学的临床特色与优势 上海中医药大学附属曙光医院沈远东 中国传统医学是发祥于中国古代的研究人体生命、健康、疾病的科学,它具有独特的理论体系,丰富的临床经验和科学的思维方法,是以自然科学知识为主体,同时还受到中国古代哲学思想的深刻影响与人文社会科学知识相交融的医学科学 避免与其他细胞类型的组织培养污染 全球生物标准协会(GBSI)进行的在线调查结果证实了许多细胞科学家已经知道的情况。超过一半的受访者--52% - “从未”对他们实验中使用的细胞系进行认证或其他与物种相关的质量控制测试。根据调查结果,百分之四十四的人从未进行过STR(短串联重复)DNA分析,这是公认的认证标准。虽然受访者更有可能进行 超高效液相色谱(UPLC)在现代分析检验中的应用(二) 2 实现超高效液相色谱的技术条件 为了使液相色谱的分离效率和分离速度等性能上达到新的高度,UPLC在多项色谱技术方面进行了改进与创新。 1)应用杂化颗粒技术合成了新型全多孔球形117μm反相固定相色谱 微生物检测技术在食品检验中的探究 [摘要] 随着我们生活水平的不断提高,对食品的质量和安全的要求越来越高,食品安全问题逐渐成为各国政府,公众关注的焦点问题。为了更好的提高微生物食品的检验和研究工作,提高食品的安全性,保证食用者的食品安全,对微生物的检验技术的发展就变得尤为重要。通过对微生物检验技术方法的分析总结,展望了食品微生物 一流专家汇聚,分析检测与体外诊断相得益彰 ——刘虎威教授畅谈BCEIA2019分析检测与体外诊断国际高峰论坛刘虎威教授畅谈BCEIA2019分析检测与体外诊断国际高峰论坛-采访实录 分析测试百科网讯 体外诊断(In Vitro Diagnosis,IVD)是当前医疗行业排名第一的业务领域,据中商产业研究院统计,2020年全球IVD市场规模 《主要农作物良种科技创新规划(2016~2020)》解读 科技部会同农业部、教育部、中国科学院发布了《主要农作物良种科技创新规划(2016~2020年)》(以下简称《良种规划》)。为了更好地贯彻和执行,科技部农村司对《良种规划》有关内容进行了解读。 一、关于《良种规划》编制的背景 为深入贯彻《国务院办公厅关于深化种业体制改革提高创新能力的意见 MALDI-TOF MS在临床微生物检验中的应用进展 1、前言 从目前的情况来看,大多数的微生物实验室采用的是一些传统的细菌鉴定手段,如革兰氏染色、氧化酶等生化反应,或者是采用梅里埃公司的API和Vitek鉴定系统。这些检测手段都很浪费时间,通常需要六到八个小时,对于一些难培养的细菌鉴定来说,将会耗费更多的时间。有时候我们也会采用一些分子生物学上 多肽的固相合成、切割及纯化_固相肽合成技术 实验材料huBPP试剂、试剂盒氩气二甲基甲酰胺(DMF)哌啶二异丙基乙胺甲醇TFA(三氟乙酸)茚三酮甘氨酸聚乙二醇乙腈仪器、耗材Pioneer肽合成仪树脂Waters 650半制备色谱仪色谱柱Beckman gold system试管固相肽合成技术是现代蛋白质化学的一项关键技术,也是对现代分子生物学 Waters在ASMS 2012上推出用于研究和常规筛查的新型分析工具 在规模最大的ASMS质谱年会上,推出新型台式飞行质谱仪,用于组学研究、农药筛选和代谢物鉴定的平台产品 温哥华,不列颠哥伦比亚省--2012年5月21日—在致力于质谱科学研究的最大科学会议ASMS上,Waters公司今天在质谱和相关主题分会上展出新型质谱仪、用于农药残留筛 蛋白质组学技术分析方法及其仪器使用比较 1 蛋白质组学概述“蛋白质组”一词的英文是Proteome,它是proteins 和genome 两个词的组合,意思是proteins expressed by a genome,即为基因组表达的蛋白质[1]。蛋白质组的概念是1994 年由Wilkins首先提出,并首次在1995 年7月 测序牛人发布蛋白单分子测序技术 人类生命的蓝图是三十亿碱基对组成的人类基因组。而DNA编码的蛋白质是几乎所有生命过程的主要执行者。 现在,美国亚利桑纳州立大学Biodesign研究所的Stuart Lindsay及其同事,在纳米孔DNA测序技术的基础上,开发了能够精确鉴定氨基酸的蛋白单分子测序技术。这一技术不仅可以用 蛋白质组学技术分析方法及概括 1 蛋白质组学概述“蛋白质组”一词的英文是Proteome,它是proteins 和genome 两个词的组合,意思是proteins expressed by a genome,即为基因组表达的蛋白质[1]。蛋白质组的概念是1994 年由Wilkins首先提出,并首次在1995 年7月的“Elec 癌症的早期诊断方法有哪些? 癌症的早期诊断方法有哪些?:一项庞大的计划促进了癌症在诊断和治疗方面的发展。美国马里兰州的研究者们认为他们已经开创了一项简单的检验手段。当癌症还处于早期阶段和可接受治疗的最佳时期,用它进行全身的检查便可以早期发现癌。当你的医生作正规检验的时候,DNA片段可能被检查出有患癌症的迹象。琼斯.霍布金斯医院 电泳技术 电泳法,是指带电荷的供试品(蛋白质、核苷酸等)在惰性支持介质(如纸、醋酸纤维素、琼脂糖凝胶、聚丙烯酰胺凝胶等)中,于电场的作用下,向其对应的电极方向按各自的速度进行泳动,使组分分离成狭窄的区带,用适宜的检测方法记录其电泳区带图谱或计算其百分含量的方法。 电泳技术的 科技部发布科技基础资源调查专项项目指南 科技部关于发布科技基础资源调查专项2018年度项目指南的通知国科发基〔2017〕380号国务院各有关部门科技主管司局,各有关单位: 根据中央财政科技计划(专项、基金等)管理改革的总体要求,科技部、财政部按照需求导向和分类整合的原则,在原“科技基础性工作专项”基础上,重新整合设立“科技基础资源调查” 聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定大麦小麦种子纯度实验 实验方法原理从种子中提取的醇溶蛋白在凝胶的分子筛效应和电泳分离的电荷效应作用下得到良好的分离,通过显色显示蛋白质谱带类型。不同品种由于遗传组成不同,种子内所含的蛋白质种类有差异,这种差异可利用电泳图谱加以鉴别,从而对品种真实性和纯度进行鉴定。实验步骤 一、仪器和试剂:1、仪器:电泳仪(满 实用学习丨质谱入门 近年来质谱仪性能的显著改进主要基于开发出的两种离子化技术:一种是介质辅助的激光解吸/离子化技术。另一种是电喷雾离子化技术。由于这两种电离技术的出现,使原本只能检测小分支的质谱技术,可以运用于检测生物大分子。在过去质谱技术主要运用于对一级结构和序列的表征,而现在质谱技术越来越多地运用于高级 方案4用于蛋白质组分析微毛细管色谱及ESI—体化装置制备 实验材料待研究的蛋白质样品试剂、试剂盒乙酸乙腈乙醇甲酸仪器、耗材自动进样机C18柱填料毛细管切割器衍生的硅树脂转向阀HPLC 系统质谱仪显微镜pH 试纸聚酰亚胺涂层的毛细管压力室丙烷喷灯超声波破碎仪压力调节器实验步骤一、微型毛细管层析柱的构建将一根聚酰亚胺毛细管的一端拉细至 5um 左右,其尖端可以 聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定大麦小麦种子纯度实验 实验方法原理:从种子中提取的醇溶蛋白在凝胶的分子筛效应和电泳分离的电荷效应作用下得到良好的分离,通过显色显示蛋白质谱带类型。不同品种由于遗传组成不同,种子内所含的蛋白质种类有差异,这种差异可利用电泳图谱加以鉴别,从而对品种真实性和纯度进行鉴定。 &nbs 聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定大麦小麦种子纯度实验 实验方法原理从种子中提取的醇溶蛋白在凝胶的分子筛效应和电泳分离的电荷效应作用下得到良好的分离,通过显色显示蛋白质谱带类型。不同品种由于遗传组成不同,种子内所含的蛋白质种类有差异,这种差异可利用电泳图谱加以鉴别,从而对品种真实性和纯度进行鉴定。实验步骤一、仪器和试剂:1、仪器:电泳仪(满足稳压500V 一种用于检测和定量分析细胞代谢物的HILIC LC-MS方法 复杂生物样品通常包含大量可反映有机体代谢状态的内源性代谢物。特别是骨骼肌可根据其是快收缩肌(白色肌肉,糖酵解型)还是慢收缩肌(红色肌肉,氧化型)而表现出特征性的代谢组“指纹图谱”。例如,红色肌肉应显示一种富含线粒体代谢物(如三羧酸循环)的代谢组指纹图谱;而白色肌肉应显示富含糖酵解代谢 天津市第22届色谱技术交流会在津召开 共享色谱新技术 分析测试百科网讯2016 年 8 月 30 日两年一届的天津市色谱学术会议在天津市南开大学召开。本届会议由天津市色谱研究会主办,并得到了岛津公司的大力支持。本次会议以前沿色谱、质谱新方法、新技术及其应用的最新进展为主题,100余色谱、质谱专家、学者充分交流了近年来色谱质谱及其相关领域的最新研究成 利用MALDI质谱进行高级微生物鉴定以精简治疗 引起人类疾病的病原微生物种类繁多。不同微生物菌株会导致不同程度的疾病,从普通感冒到可能危及生命的感染,如结核病(TB)。类似地,不同菌株对抗菌药物的敏感性不同,有些菌株对多种药物完全耐药,有些菌株具有中等敏感性,有些菌株则对治疗完全敏感。 抗生素耐药性对全球健康构成了严重威胁,并给全球医疗体系 膜蛋白的分离、鉴定及其功能分析—GFC/IEC/SDS-PAGE ...(一) 膜蛋白的分离、鉴定及其功能分析—GFC/IEC/SDS-PAGE 和 MALDI-TOF-MS 实验试剂、试剂盒分离缓冲液增溶缓冲液洗脱缓冲液Laemmli 样品缓冲液胶段冲洗缓冲液酶解缓冲液肽抽提缓冲液实验步骤 3.1 膜的分离因为在研磨材料时,要分离的膜组分以小囊泡形式与可溶的胞质蛋 太赫兹(THz)光谱在生物大分子研究中的应用(一) 汪一帆1) 尉万聪2) 周凤娟1)** 薛照辉1)**(1)天津大学农业与生物工程学院,天津,300072;2)清华大学生物科学与技术系,北京,100084) 太赫兹(THz)辐射是一种新型的远红外相干辐射源,近年