返回突出显示的引用将微滴数字 PCR (ddPCR) 与活性染料 PMA 相结合以测量益生菌的成功率发酵食品推动了益生菌在医学和保健品中的应用。通过消化系统摄入的细菌的存活和活力是有效益生菌的关键特征。乳酸杆菌属是胃肠道的常驻微生物，广泛用于食品发酵和益生菌制剂。传统上，生存力是通过耗时、低通量的基于培养的方法来估计的，当存在于同一样本中时，这些方法很难区分密切相关的细菌物种。量化活的但不可培养的细菌也具有挑战性。实时 qPCR c 等分子方法提供特定和准确的细菌定量。液滴数字 PCR (ddPCR) 已成为传统 qPCR 的进步，可用于绝对、无标准 DNA 定量和稀有核酸序列检测。然而，这些方法在活细菌和非活细菌之间没有区别。 Journal of Microbial Methods 最近发表的一篇论文将 ddPCR 的灵敏度、特异性和速度与可量化的活力相结合，使用活力染料单叠氮化丙锭 (PMA) 测量仔猪粪便中 3 种乳酸杆菌菌株的活力。所有 3 种乳酸杆菌菌株都能够在仔猪胃肠道中存活。作者能够在存在其他微生物的高背景下准确而具体地量化少量活细菌细胞。描述了 PMA 处理和样品制备以获得准确测定生存能力的最佳条件。 PMA 效率甚至在密切相关的物种之间也不同 illust评价 PMA 协议需要针对每个目标菌株进行专门调整。因此，PMA-ddPCR 方法提供了一种新工具来量化临床前和临床样本粪便样本中的细菌存活率。使用 PMA/PMAxx 染料进行 v-PCR 的原理。膜不可渗透染料选择性地进入死细胞并修饰其 DNA。修饰后的 DNA 不会被放大，从而可以对活细胞 DNA 进行定量。要阅读原始文章，请单击此处。液滴数字 PCR 提高了粪便样本中活乳酸菌的绝对定量。 Gobert G、Cotillard A、Fourmestraux C、Pruvost L、Miguet J、Boyer M. J 微生物学方法。 (2018) 148:64-73。 doi:10.1016/j.mimet.2018.03.004. 详细了解 Biotium 的活力 PCR (v-PCR) 技术、v-PCR 染料 PMA 和 PMAxx，以及相关的 v-PCR 试剂盒和试剂。返回突出显示的引文单激光激发、多色光谱成像，用于活细胞中的单分子跟踪 (SMT)使用我们明亮、光稳定的 CF® 染料和其他标签，可用于多种应用。分享文章与同事分享这篇文章。复制链接发送电子邮件单分子跟踪 (SMT) 是探测细胞中分子动力学的有效工具。如果可以同时分析多个分子种类，SMT 将变得特别强大，从而可以在完整的生物系统中研究更复杂的多组分相互作用。然而，多色 SMT 仍然具有挑战性：多个荧光团之间的光谱串扰限制了可扩展性，并且需要多个激光进行激发使光学设置复杂化。最近的一篇论文描述了多色规格与商业倒置显微镜兼容的跟踪成像系统，用于活细胞中的单分子 SMT。使用单个 637 nm 激光，作者能够同时激发和成像一组光谱近端荧光团标记的探针，CF®633-WGA、CellMask DR 和 CF®680-Transferrin，它们的发射波长仅为 15–30纳米分开。空间和光谱分辨率与使用 STORM 获得的分辨率相当，光谱串扰最小。 WGA 和转铁蛋白似乎几乎完全不动，表明定位于\"脂筏”等纳米域或与细胞支架相互作用。左图：用 CF®680R 转铁蛋白（红色）、CF®488A 葡聚糖（绿色）染色的 U87-MG 细胞), 和赫斯特 (蓝色)。右：E。用 CF®633-WGA（红色）和 DAPI（蓝色）染色的大肠杆菌和葡萄球菌。要阅读原文，请单击此处。Huang T 等人。通过光谱成像与单激光激发同步多色单分子跟踪。生物物理学杂志 2018；114(2)：301-310。 doi：10.1016/j.bpj.2017.11.013。详细了解 Biotium 的 CF® 染料标记生物偶联物和用于超分辨率显微镜的 CF® 染料。AccuClear Ultra High Sensitivity dsDNA Quantitation Solution utilizes a novel, next-generation DNA binding dye for highly sensitive and accurate quantitation of purified dsDNA samples across a broad range of DNA concentrations. The assay is linear between 0.03 ng and 250 ng of dsDNA per assay in microplate format. Unlike absorbance-based measurements, AccuClear dye is highly selective for double-stranded DNA over single stranded DNA or RNA.The AccuClear dsDNA quantitation assay is designed for use with fluorescence 96-well plate readers equipped with excitation and emission filters for detecting green fluorescence. The unique spectral properties of AccuClear dye make it especially well-suited for use with instruments with blue LED excitation sources. Biotium’s AccuLite? 470 Mini Fluorometer (cat. no. E90001) includes a program for use with the AccuClear assay. AccuClear also is compatible with handheld fluorometers such as Invitrogen’s Qubit? and Promega’s QuantiFluor?-P, however the standard curve calibration programs for these instruments may not cover the full dynamic range of the AccuClear kit standard curve.The AccuClear Ultra High Sensitivity dsDNA Quantiation Kit with 1 DNA Standard contains AccuClear dye, 20X assay buffer, and a 25 ng/uL calf thymus dsDNA standard stock solution that can be used to prepare a set of standards. Biotium also offers the AccuClear Ultra High Sensitivity dsDNA Quantiation Kit with 7 DNA Standards (1000 assays, catalog no. 31028), which includes AccuClear dye, 1X assay buffer, and a set of prediluted calf thymus dsDNA standards. AccuClear Ultra High Sensitivity dsDNA Quantitation Solution (1000 assays, catalog no. 31027), which includes dye and 1X buffer without standards, is available for customers who wish to prepare their own DNA standards.ComponentsAccuClear Dye (100X)AccuClear BufferCalf Thymus dsDNA Standard, 25 ng/uLFeaturesLinear range: 0.03-250 ng dsDNAGreen fluorescence (Ex/Em 460/507 nm)Unrivaled sensitivity and dynamic rangeNovel green fluorescent dye is a perfect match for blue LED excitation sourcesGreen fluorescence detection compatible with fluorescence microplate reader, handheld fluorometer, or NanoDrop? fluorospectrophotometer.Please also see related products for information on the AccuBlue High Sensitivity dsDNA Quantitation Solution and Kit (0.2-100 ng) and AccuBlue Broad Range dsDNA Quantiation Solution and Kit (2-2000 ng), In addition to different linear ranges, these assays have different tolerances to various contaminants compared to AccuClear (see product protocols for details).AccuClear kits are intended for quantitation of purified dsDNA samples. For cell quantitation assays, please see our cell viability and cytotoxicity assays.AccuClear technology is covered by pending U.S. and international patents. 点击次数：更新时间：2015-10-14 13:38:09【打印此页】【关闭】 上一条：31028 AccuClear Ultra High Sensitivity dsDNA Quantitation Kit with 7 DNA Standards下一条：31060-T AccuBlue NextGen dsDNA Quantitation Kit

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