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腺病毒提取与纯化

一、

物品准备:

1

、离心管:

BackmanCat

#331372

36000rpm

离心用

13.2ml

BackmanCat

#342412

65000rpm

离心用

5.1ml

消毒,多备用一套;

2

、离心管帽:离心管

BackmanCat

#331372

盖,消毒;

离心管

Backman

Cat

#342412

外盖;

离心管

BackmanCat

#342412

中盖,

BackmanCat

#342883

3

、热封盖:离心管

BackmanCat

#342412

热封盖,消毒;

4

、其他物品:

MiniQ

2L

,消毒;

大烧杯(

1L

2

个,消毒;

中号镊子,小号镊子:

1

把中号和

3

把小号,消毒;

无菌注射器:

1ml

5ml

10ml

,若干;

移液枪:

1

把;

移液管:

2ml

10ml

,若干;

废液缸:

1

个;

无菌手套:若干;

酒精、棉球;

Marker

笔;

二、

配液:

1

CsCl

1.25g/ml

9.04gCsCl+25mlPBS

1.35g/ml

12.8gCsCl+25mlPBS

1.40g/ml

15.5gCsCl+25mlPBS

配好后过滤。

2

Viruslysisbuffer(pH7.4

50ml)

0.1%

SDS0.05g

10mM

Tris

base0.0606g

1mM

EDTA0.0186g

3

Dialysisbuffer

pH7.6

1.5L

10mM

Tris

base1.82g

135mM

NaCl11.83g

1mM

MgCl20.143g

50%

Glycerol750ml