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제품특징
□ 특징
● Perfom 96 miniprepssimultaneously - vaccum filtration 또는 원심분리법 사용
● No-waoiting workflow - 실온에서 신속하게 단백질 정제 가능
● High purity and yield - Column당 약 100u 정제 가능 (농도: ~ 0.3 - 1 mg/ml)
● Wide range of conditions - Native 또는 denaturing 샘플도 적용 가능
● Lysis buffer compatibility - xTractor Buffer 등 다양한 Lysis buffer 적용가능
● Different cell systems - Mammalian cell,bacterial cell 등 다양한 샘플 적용 가능
□ 제품설명
Capturem His-Tagged Purification 96은빠르고 신속한 재조합 단백질 스크리닝을 위한 혁신적인 기술을 보유한 제품이다. 본 제품은 high-capacity Nickel membrane을 사용하여 다양한 샘플 조건 하에서 his-tagged protein을 빠르게 정제할 수 있다. Single-use, disposable 96-well plate로 제작되어있으며, well당최대 1ml lysate로부터 한꺼번에 96 miniprep 을진행할 수 있다. 96-well plate에 포함되어있는 신규 Nylon membrane은 실온에서 mammalian cell 또는 bacterial cell sample로부터 단백질 정제가 가능하다. 또한여러 종류의 첨가제 (additives)하의 denaturing 조건에서도적용 가능하다 (e.g., βME, EDTA, DTT, glycerol, TCEP 등 18종 테스트 완료).
□ 적용
● Screening
● Biochemical/enzymatic assays
● Pull-down or other proteininteraction assays
● Protein/ligand affinityanalysis
● Crystallography or otherstructural analyses
● Antibody production
● Toxicology studies
● Protein transfer to live cells
□ 보존
- Room temperature
□ 구성품 (자세한 내용은 CoA를 참조하세요)
- 1 Capturem 96 Nickel Plate
□ Capturem™ His-tagged protein purification kit 시리즈 비교
Miniprep Kit | Maxiprep Kit | 96well plate | Large volume | |
Code | 635710 | 635713 | 635714 | 635724 |
형태 | Miniprep Column | Maxiprep column | 96 Nickel plate | Large volume unit |
Input sample | ~ 800 ㎕ | ~ 25 ㎖ | ~ 1,000 ㎕ | 150 ~ 500 ㎖ |
용량 | 20 회 | 6 회 | 96 well | 4 회 |
소요시간 | 5 분 | 15 분 | 15 분 | 15 ~ 30 분 |
정제농도 | 0.3 ~ 1 ㎎/㎖ | 1.6 ~ 4.5 ㎎/㎖ | 0.3 ~ 1 ㎎/㎖ | up to 2.0 ㎎/㎖ |
정제수율 | 0.1 ㎎/column | 25 ㎎/tube | 0.1 ㎎/well | 25 ㎎/unit |
Centrifuge 조건 | 11,000 x g, 1분 | 2,000 x g, 3분* | 2,000 x g, 3분* | X |
Vacuum 여부 | X | X | O | O |
Buffer 포함 여부 | O | O | X | X |
* Maxiprep Kit에는 50㎖ tube용, 96well plate에는 96well plate용 centrifuge가 필요합니다.
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原代细胞(primary cell) 是指从机体的组织(如人组织、小鼠组织、大鼠组织和兔组织等)经蛋白酶或其它的方法获得单个细胞并在体外进行模拟机体培养的细胞,称为原代细胞。一般认为,培养的原代的第1代细胞和传代到第10代以内的细胞统称为原代细胞培养。在人工条件下使其原代细胞生存、生长、繁殖和传代,进行细胞生命过程、细胞癌变、细胞工程等问题的研究。
细胞株(cell strain) 是通过选择法或克隆形成法从原代培养细胞中获得具有特殊性质或标志物的细胞称为细胞株。一般认为,细胞株是用单细胞分离培养或通过筛选的方法,由单细胞增殖形成的细胞群。细胞株的特殊性质或标志必须在整个培养期间始终存在。
大家好,
最近开始练习做原代细胞培养,但是在取材的时候,用胰酶消化时发现有小团片状的絮状聚集在一起,吹打散了马上又聚集在一起,这是怎么回事呢?有人遇到过吗?求指教下
细胞株(cell strain) 是通过选择法或克隆形成法从原代培养细胞中获得具有特殊性质或标志物的细胞称为细胞株。一般认为,细胞株是用单细胞分离培养或通过筛选的方法,由单细胞增殖形成的细胞群。细胞株的特殊性质或标志必须在整个培养期间始终存在。
细胞系(cell line) 是原代细胞经首次传代成功后即为细胞系。泛指一般可能传代的细胞。其中能够连续传代的细胞叫做连续细胞系或无限细胞系,不能连续培养的称为有限细胞系。大多数二倍体细胞为有限细胞系。由原先存在于原代培养物中的细胞世系所组成。如果不能继续传代,或传代次数有限, 可称为有限细胞系(finite cell line), 如可以连续培养, 则称为连续细胞系(continuous cell line), 培养50代以上并无限培养下去。人类肿瘤细胞,在体外培养半年以上,生长稳定,并连续传代的即可称为连续性株或系。
关于第一问能回答的详细点么?谢谢各位大虾~~
如题,本人在做结肠肿瘤细胞时,每次从医院拿回来的组织都只有一指甲盖大小,我是剔除肉眼可见的一些血丝之类的,然后就进行处理了,不知道这样对不对,有没有清除干净,不知道大家在做肿瘤原代时,是怎么判断那一部分是肿瘤组织,有什么建议么?大家可以分享自己的经验。
原代细胞(primary cell) 是指从机体的组织(如人组织、小鼠组织、大鼠组织和兔组织等)经蛋白酶或其它的方法获得单个细胞并在体外进行模拟机体培养的细胞,称为原代细胞。一般认为,培养的原代的第1代细胞和传代到第10代以内的细胞统称为原代细胞培养。在人工条件下使其原代细胞生存、生长、繁殖和传代,进行细胞生命过程、细胞癌变、细胞工程等问题的研究。
细胞株(cell strain) 是通过选择法或克隆形成法从原代培养细胞中获得具有特殊性质或标志物的细胞称为细胞株。一般认为,细胞株是用单细胞分离培养或通过筛选的方法,由单细胞增殖形成的细胞群。细胞株的特殊性质或标志必须在整个培养期间始终存在。
细胞系(cell line) 是原代细胞经首次传代成功后即为细胞系。泛指一般可能传代的细胞。其中能够连续传代的细胞叫做连续细胞系或无限细胞系,不能连续培养的称为有限细胞系。大多数二倍体细胞为有限细胞系。由原先存在于原代培养物中的细胞世系所组成。如果不能继续传代,或传代次数有限, 可称为有限细胞系(finite cell line), 如可以连续培养, 则称为连续细胞系(continuous cell line), 培养50代以上并无限培养下去。人类肿瘤细胞,在体外培养半年以上,生长稳定,并连续传代的即可称为连续性株或系。
原代细胞产品专家齐氏生物提醒,原代细胞培养注意事项,供参考:
1、实验材料要新鲜,从活体分离材料后要低温保存,并尽快进行细胞分离实验。
2、无菌操作。操作时用的培养液,可加平时细胞培养液5倍含量的青链霉素。
3、用酶法分离细胞时,注意酶液的浓度和控制消化时间。
贴块法分离细胞时,注意动作要轻柔,不要伤到细胞组织,组织块边缘尽量平整有利于细胞游离。
4、培养液的选择。不同的细胞有对培养液中营养的要求不同,根据所分离细胞的特性选择。
作者:PriCells原生原代
1.原代细胞培养最大优点是:细胞直接来源于机体组织,生物性状尚未发生大的变化,在一定程度上能够反映体内的状态。
2.细胞株和原代细胞不是完全一样。
3.并非每一种组织源性细胞都有相应的细胞株,有些细胞必须养原代,
4.细胞株是来源于原代细胞,原代细胞导入了病毒增殖基因并转变为细胞株,细胞株带有癌变细胞的特点。
5.细胞株的遗传物质已经发生改变,并不再具有接触生长抑制现象。
6.细胞株形态及状态不如原代细胞,相对长时间传代;而原代细胞生长是有限性。
7.细胞株在传代过程中可能发生形态的改变及变异,细胞株没有用原代细胞稳定性。
8.原代细胞的受体能够正确反映体内的生理和病理状态。
9.原代细胞的信号传导信号系统能够正确反映体内的生理和病理状态。
10.原代细胞的蛋白质生物学特征能够正确反映体内的生理和病理状态。
11.原代细胞的RNA生物学特征能够正确反映体内的生理和病理状态。
12.原代细胞的DNA生物学和遗传学特征能够正确反映体内的生理和病理状态。
13.原代细胞对外界反应能够正确反映体内的生理和病理状态。
14.原代细胞对体外检测能够正确反映体内的生理和病理状态。
15.原代细胞对毒理和致畸反应能够正确反映体内的生理和病理状态。
16.原代细胞对药物筛选能够正确反映体内的生理和病理状态。
17.原代细胞对个体化药物治疗能够正确反映体内的生理和病理状态。
18.原代细胞培养与体内原组织在形态结构和功能活动上一样,绝对是检测判断、药物治疗最好的实验对象。
19.如在中国进行体外检测和药物研发进行细胞培养,请要用中国人组织源性原代细胞。
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