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Innoprot/Immortalized Human Conjunctival Epithelial Cell Line/P10870-IM
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Innoprot/Immortalized Human Conjunctival Epithelial Cell Line/P10870-IM
品牌 / 
Innoprot
货号 / 
P10870-IM
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Human conjunctiva is a translucent membrane that lines the inner surface of the eyelids and covers the sclera. Its coverage comprises two layers of stratified, non-keratinized conjunctival epithelial cells (ConEpiC). Human Conjunctival Epithelial Cell Line is different than the corneal epithelium by a specific expression profile of keratins. ConEpiC coverage comprises mucin-rich glycocalyx, which has differente functions; such as promotion of tear adherence, prevention of pathogen penetrance, and provision of lubrication. Decrease or loss of mucin/glycocalyx production generates squamous metaplasia, which may lead to dry eye and ocular surface diseases. ConEpiC also respond to histamine by stimulating phosphatidylinositol turnover and secreting cytokines, and as a result may be a good target when developing topical ocular drugs to treat allergic conjunctivitis. Immortalized Human Conjunctival Epithelial Cell Line also allow to stablish in vitro models for HIgh Throughput and High Content Screening.

  • Reference: P10870-IM
  • Size/Quantity: 1x106 cells / vial
  • Product Use: For research use only
  • Shipping Conditions: Dry Ice
    • Data Sheet / Cell Culture Manual
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    尽管个体的几乎所有细胞的基因组序列是相同的,但人体由数百种具有不同功能和行为的不同细胞类型组成。细胞功能作用的变化是由一个复杂的调节网络完成的,该调节网络由调节蛋白以及调节RNA如微小RNA组成。这种网络的失调在疾病发展中起主要作用,特别是在癌症中。由RIKEN领导的国际科学联盟FANTOM现在已经在人类原代细胞中创建了第一个microRNA表达的广泛图谱。利用作为第五版FANTOM的一部分建立的RNA样本的收集,该团队对数百个人类样本的microRNA文库进行了测序,包括许多以前从未 查看更多>
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    2018-12-26
    CAT ASSAY[TLC METHOD] 1. Transfer cells to a 15 ml tube. 2. Add 5 ml TBS- to flasks, shake & pour into tubes. 3. Spin down the cells @ 1k rpm for 5". 4 查看更多>
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    球体细胞培养 1.琼脂铺底的培养瓶:30ml无菌培养瓶,每瓶中加5ml2%琼脂培养基,冷却,形成平坦底层后备用。 2.取生长状态良好已连接成片的细胞,用弯头吸管伸入瓶内,把细胞纵横割划成若干小区后,倒出培养液。 3.加入0.25%的胰蛋白酶液,在倒置显微镜下边消化边观察,当细胞小区边缘微卷起后便立 查看更多>
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    一个瓶子中的细胞,如果可以培养到50代,怎么分原代培养的和传代培养的
    原代细胞和传代细胞培养有什么区别
    怎样才能在实验中提高原代细胞培养的成功率啊???
    1.培养基最好是培养原代细胞专门的培养基或说是配套的培养基; 2.关键还是生长因子等的浓度; 3.如果需要的话,需要明胶包被.
    原代细胞和细胞系哪个认可度更高
    细胞系是不断生长,分化的细胞群,因其经过遗传改造,致使其具有无限增长的潜能.体外生长的细胞系用于医疗或科研.实际上,连续细胞系可以用大量次培养基
    原代心肌细胞培养 123
    玖柒殷儿00282021-08-06
    原代培养心肌细胞作为一种主要的研究模型,被广泛应用于心血管研究之中.我们实验室经过长期尝试,摸索出了一些行之有效的方法,并积累了一些经验,现总结如下:

    1新生大鼠鼠龄的选择新生大鼠心肌细胞在出生后3 d内具有部分的增殖能力,成年大鼠心肌细胞则为终末分化细胞,不再具有分裂增殖能力.因此,大鼠出生时间越短,其心肌细胞分离后成活率越高,越容易贴壁生长.大量观测表明,选择1~3 d龄大鼠分离其心肌细胞进行原代培养较为理想.其中尤以半日龄大鼠心肌细胞培养效果最佳.

    2消化酶的选择及使用
    新生大鼠心肌细胞的分离可采用组织块法和消化法,前者因不易获得密度均一的细胞且难控制成纤维细胞的生长而较少采用.消化法中常使用的酶有3种:胰蛋白酶、胶原酶I或Ⅱ以及透明质酸酶.透明质酸酶多与胰蛋白酶或胶原酶联合应用.胰蛋白酶作用较强,容易造成心肌细胞损坏.胶原酶作用较缓和,能消化细胞间质中的胶原纤维以释放细胞,对细胞损伤小,且在新生大鼠心肌组织,以胶原I为主,故我们选用胶原酶I.文献报道胶原酶的工作浓度一般在0.6~1 g・L1,我们使用的为0.8 g・L1.胶原酶最好现用现配.

    3消化程度的把握
    新生大鼠心肌细胞对酶消化极为敏感.消化过度可使肌原纤维出现萎缩,细胞死亡率增加或丧失贴壁能力及搏动能力;消化不足,细胞聚集成团,无法分清细胞边界,难以形态学观测.消化过程中使用磁力搅拌器时应注意1)转速一般控制在60~80 r・min1左右.(2)每次消化的时间须结合消化酶浓度确定.(3)将粘附在搅拌子上的心肌组织吹散,使酶液充分接触组织.(4)适宜温度为35~37℃.(5)当组织由红转白呈半透明状态时,应停止消化.

    4接种的细胞密度
    心肌细胞接种密度不仅影响细胞间的相互接触,进而影响细胞对肥大刺激的反应,而且影响长期培养细胞的成活率.接种细胞的绝对数量应经精确计算.一般而言,应根据实验的观测目的决定单位面积上的细胞数量.例如,如作形态学观测,六孔板中每孔的接种细胞数量应控制在1×105~2×105个;若需收获心肌细胞作mRNA或蛋白表达水平的观测,则每孔的接种密度可增加到5×105~6×105个.
    原代培养细胞会分裂.原代培养的细胞一般传至10代左右就不容易传下去了,细胞的生长就会出现停滞,大部分细胞衰老死亡.传代培养一般传到40-50代,这种传细胞叫细胞株.细胞株的遗传物质没有改变.其分裂能力与原代培养的一样.当细胞株传至50代以后又出现“危机”,不能再传下去,但有的细胞遗传物质发生改变,并带有癌变的特点称细胞系.这部分细胞的分裂能力比原代培养的强得多.它有无限增殖的特点.
    从接种的第一天细胞就是脏脏的~培养液里也是老有黑点~用了双抗,还有两性和泰乐~~~细胞一直在长…但是今天突然发现这种黑色东西,跟细胞不在一个层面~肉眼看皿也没有黑色脏东西~液体也澄清
    细胞很微小,接种进去,都是随机的,我们看不见。有可能两个细胞黏在一起,也有可能分离的很开。

    就好像撒一撮芝麻在培养基那么大的地方上,我们不能知道它会怎么落。

    我目前培养大鼠原代食管上皮细胞,虽然已经分离出来(细胞量很少),但是后期细胞不增殖,3-4天细胞就死掉了。
    我用的培养是基础培养基添加一些细胞因子
    请问是培养基的问题,还是操作的问题?
    如果是培养基的问题,应该添加哪些细胞因子,或者购买哪个牌子的培养基?
    在线等,急!!!

    原代细胞细胞株的区别

    作者:PriCells原生原代

    1.原代细胞培养最大优点是:细胞直接来源于机体组织,生物性状尚未发生大的变化,在一定程度上能够反映体内的状态。

    2.细胞株和原代细胞不是完全一样。

    3.并非每一种组织源性细胞都有相应的细胞株,有些细胞必须养原代,

    4.细胞株是来源于原代细胞,原代细胞导入了病毒增殖基因并转变为细胞株,细胞株带有癌变细胞的特点。

    5.细胞株的遗传物质已经发生改变,并不再具有接触生长抑制现象。

    6.细胞株形态及状态不如原代细胞,相对长时间传代;而原代细胞生长是有限性。

    7.细胞株在传代过程中可能发生形态的改变及变异,细胞株没有用原代细胞稳定性。

    8.原代细胞的受体能够正确反映体内的生理和病理状态。

    9.原代细胞的信号传导信号系统能够正确反映体内的生理和病理状态。

    10.原代细胞的蛋白质生物学特征能够正确反映体内的生理和病理状态。

    11.原代细胞的RNA生物学特征能够正确反映体内的生理和病理状态。

    12.原代细胞的DNA生物学和遗传学特征能够正确反映体内的生理和病理状态。

    13.原代细胞对外界反应能够正确反映体内的生理和病理状态。

    14.原代细胞对体外检测能够正确反映体内的生理和病理状态。

    15.原代细胞对毒理和致畸反应能够正确反映体内的生理和病理状态。

    16.原代细胞对药物筛选能够正确反映体内的生理和病理状态。

    17.原代细胞对个体化药物治疗能够正确反映体内的生理和病理状态。

    18.原代细胞培养与体内原组织在形态结构和功能活动上一样,绝对是检测判断、药物治疗最好的实验对象。

    19.如在中国进行体外检测和药物研发进行细胞培养,请要用中国人组织源性原代细胞。


    循环肿瘤细胞(CTC)检测.pdf123
    beijing19822021-08-10
    一、原代细胞与细胞系有什么区别?

    根据传统定义,自组织第一次收获和接种的细胞被称为原代细胞[Freshney,R.I.(1987).CultureofAnimalCells.AManualofBasicTechnique.(NewYork,AlanR.Liss,Inc.)].这类细胞直接从组织分离,生命周期有限,经数次传代后会逐渐停止生长。原代细胞在有限的生命周期内需掌握好细胞的最大生长空间,以保持细胞群中基因型和表型的一致性。
    细胞系是不断生长、分化的细胞群,因其经过遗传改造,致使其具有无限增长的潜能。体外生长的细胞系用于医疗或科研。
    但实际上,经过长时间、连续的传代培养后,细胞系随着代数的增加,细胞的基因型和表型都有可能发生改变。
    需要指出的是,在不同的科研小组中这些术语的定义会有所不同。许多研究员不用细胞系这个词表示细胞群,除非细胞经过了遗传改造。
    二、倍增和代数有什么区别?

    倍增是培养物中细胞总数的翻倍,通常是指细胞指数或对数生长期。代数是指细胞群从培养瓶中移出,传代培养过程的次数,传代培养的目的,是使细胞处于低密度以刺激其进一步生长。
    三、接收到的冻存细胞该如何处理?

    收到包装箱后,立即将冻存细胞从干冰移入液氮中冻存。此过程尽量快,以避免升温。不要将细胞储存在-80℃,这样会对细胞造成不可挽回的伤害。

    四、有多少经验才能开始正常人类细胞培养

    推荐有经验者在无菌环境下用洁净操作台工作,如果有细胞系培养经验的话,对原代细胞的培养也是很有益处的。如果你是细胞培养的初学者或打算建立细胞培养实验室,我们会为你提供帮助。请联系我们的细胞培养专家(裕恒丰科技有限公司)。
    五、冻存的细胞该如何开始培养?

    (1)将一管细胞从液氮罐中取出,注意保护手和眼睛。

    (2)将冻存管快速的放入37℃水浴中,轻轻握住并旋转,直到管内物体完全融化。

    (3)将冻存管立即从水浴中拿出,擦干,转入无菌环境。

    (4)用70%的酒精冲洗冻存管,然后擦去多余酒精。

    (5)打开盖子,注意手指不要碰到里面的螺纹(注意,由于冻存管有负压,开盖时可能会有少量溢出,这是正常现象)。

    (6)用多聚赖氨酸(或参照说明书)包被培养瓶。多数细胞推荐的接种密度为每平方厘米5000个细胞。

    (7)盖好培养瓶的盖子,轻轻摇晃培养瓶以使细胞分布均匀。若需要气体交换可打开盖子。

    (8)将培养瓶放入培养箱中(37℃,5%CO2,95%空气)

    (9)放入培养箱后第6-16小时更换一次培养基,以去除残留的二甲基亚枫和未贴壁的细胞。

    六、当我第一次复苏正常人类细胞时,是否需要先离心细胞以去除二甲基亚枫吗?

    第一次复苏正常人类冻存细胞时,我们不推荐离心去除二甲基亚枫。与残留的二甲基亚枫相比,离心过程对细胞的伤害更大,尤其是不适当的高速离心时。我们的经验是:如果二甲基亚枫的浓度很低,细胞不会受毒害。如果你将1ml细胞放入含15ml培养基的T-75培养瓶中,二甲基亚枫的浓度将小于0.67%,没有发现负面影响。实际上,如果细胞的接种密度为每平方厘米5000-10000个,二甲基亚枫的浓度很低。

    七、细胞培养过程中,多久更换一次培养基?

    这取决于细胞生长的速度。一般而言2-3天更换一次培养基,许多细胞培养实验室通常在周一,周三,周五更换培养基。
    注意:冻存细胞复苏后,在6-16小时内更换培养基,以去除残留的二甲基亚枫和死亡的细胞。
    八、我能扩增培养和再次冻存Sciencell的正常人类细胞吗?

    这取决于细胞的类型。一些细胞类型像神经细胞,神经胶质细胞和一些生长缓慢的上皮细胞,不推荐扩增培养和再次冻存。其它的细胞类型像成纤维细胞、星形细胞、肾系膜细胞、星形胶质细胞等等,可以扩增培养和再次冻存。然而,需要注意的是再次冻存的过程可能导致细胞生长性能的改变。如果你想要再次冻存细胞,请亲自咨询我们的技术支持并使用ScienCell无血清细胞冻存液(SF-CFM)和特定的无血清培养基,以获得最佳冻存效果。
    九、我能长时间的冷冻保存ScienCell的原代细胞培养基吗?

    我们不推荐冷冻保存培养基,高营养的培养基经过冷冻和复温后,可能导致培养基成分的不可逆降解,从而影响细胞的生长。
    十、培养瓶中应该加入多少体积的培养基?

    我们推荐的用量为:T-25培养瓶5ml,T-75培养瓶15ml,T-150培养瓶30ml。文章来源北京裕恒丰科技有限公司官方微信

    实验室培养的原代猪肺微血管内皮细胞出现了图中黑色线状类似虫子一样的东西的污染,培养基无明显浑浊变化,细胞形态也正常,更换培养基后这种情况仍然存在,求大神告知这些小东西到底是什么,是否会对细胞造成影响