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biopioneerinc/Recombinant Human ACE2-His-Avi Protein, 1mg/1/CVRP-002
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biopioneerinc
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Recombinant Human ACE2-His-Avi Protein (rhACE2-His)

Source: recombinant human ACE2 protein (Gln18-Ser740) was expressed in mammalian cells with a His tag and Avi at the C-terminus.Accession: Q9BYF1Predicted molecular mass: 86.5 kDa. Due to glycosylation, the recombinant human ACE2 protein migrates to 95-110 kDa based on the Bis-Tris PAGE result.Endotoxin: Less than 1 EU per ug by the LAL method.Formulation: The recombinant human ACE2-His-Avi protein was lyophilized from 0.22 um filtered solution in 20 mM PB (pH 7.4). Normally 5% trehalose is added as protectant before lyophilization.Purity: > 95% by PAGE under reduced condition, and SEC-HPLC.Shipping: The product is shipped with ice packs. Upon receipt, store it immediately at the temperature recommended below.Stability & Storage:Use a manual defrost freezer and avoid repeated freeze-thaw cycles.12 months from date of receipt, -20 to -70°C as supplied.1 month, 2 to 8°C under sterile conditions after reconstitution.3 months, -20 to -70°C under sterile conditions after reconstitution.

Background

ACE2 (Angiotensin I Converting Enzyme 2) belongs to the angiotensin-converting enzyme family of dipeptidylcarboxydipeptidases and has considerable homology to human angiotensin 1 converting enzyme. This secreted protein catalyzes the cleavage of angiotensin I into angiotensin 1-9, and angiotensin II into the vasodilator angiotensin 1-7. The SARS-CoV and SARS-CoV-2 (2019-nCoV) spike (S) proteins mediate viral entry into host cells by binding to a host receptor, ACE2, through the receptor-binding domain (RBD) of the S1 subunit, and then fusing the viral and host membranes through the S2 subunit.

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1.何时须更换培养基?视细胞生长密度而定,或遵照细胞株基本资料上之更换时间,按时更换培养基即可。2.如何选用特殊细胞系培养基?培养某一类型细胞没有固定的培养条件。在MEM中培养的细胞,很可能在DMEM或M199中同样很容易生长。总之,首选MEM做粘附细胞培养、 RPMI-1640做悬浮细胞培养是一个好的开始。3.可否使用与原先培养条件不同之培养基?不能。每一细胞株均有其 查看更多>
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您是否也经常有这些困扰?每次冻存细胞都需要现配冻存液,太麻烦程序降温(4℃~-20℃~-80℃~液氮),太繁琐太耗时90%血清+10%DMSO冻存,成本太高细胞比较娇贵,细胞冻存后复苏率太低日本A/B品牌无血清冻存液好用,价格太高…………那是时候换一款无需程序降温的细胞冻存液了~~特别配方有效提高细胞冻存活率和复苏活力不含血清,不含动物来源性蛋白能减少各类病毒、霉菌和支原体等的污染... 查看更多>
Contributor: Suprya JayadevDate: January 10, 19911) Keep prepared solutions on ice.2) Determine total cell count of cells to be frozen. (e.g. 1 X 108 )3) Deter 查看更多>
ORGANOTYPIC KIDNEY CULTURES -embryos are dissected from timed-pregnant mice from 11.5 d.p.c. to 13.5 d.p.c. -metanephroi and associated ureteric buds are micro 查看更多>
Thaw vial quickly in 37癈 water. Caution - vial can explode. Transfer cells to sterile, 15 mL centrifuge tube. Add 50 祃 warm FBS (fetal bovine serum, heat inact 查看更多>
2018-12-26
Take off Media Trypsinate with 1ml x2 Dulbecco A trypsin Add 7ml Media Pipette up and down to distribute cells throughout media (i.e. not clumped together) Add 查看更多>
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1. 新鲜组织标本放入液氮要用冻存管,EP管密封性不好,液氮容易漏进去,而且也耐受不了-198°的低温,容易爆管
2. 普通冻存管就可以,不用特意再去灭酶处理,因为RNA酶污染主要是内源性的,外界的很少,主要来自于人的皮肤、呼吸,戴好口罩手套就可以了,冻存管这些,影响很小忽略不计
3. 组织在液氮里冻硬了就可以拿到-80°保存,随时取用,不用长期在液氮里。当然我们是不会长期保存的,没有试过在-80°里呆一年。不过话说回来,除非是几千例标本的大型课题,一般都很少需要保存标本保存1年以上的吧,几十例一百例的东西,两三个月最多半年就处理掉了,所以我们做小课题的都是取到组织后立马放液氮,再转移到-80°
(仅供参考)
细胞冻存 123
血刺怪怪482021-08-06
细胞冻存注意事项:
1.欲冷冻保存之细胞应在生长良好(log phase) 且存活率高之状态,约为80 – 90 %致密度。
2. 冷冻前检测细胞是否仍保有其特有性质,例如hybridoma 应在冷冻保存前一至二日测试是否有抗体之产生。
3. 注意冷冻保护剂之品质,冻存液:10%DMSO+90%FBS,我做细胞试验从不加双抗,NAHCO3-未加
4. 冷冻保存的细胞浓度:
冻存方法
1.冷冻前一日前更换半量或全量培养基,观察细胞生长情形。
2.收集培养之细胞,取少量细胞悬浮液(约0.1 ml) 计数细胞浓度及冻前存活率。 离心速度不要大于1000rpm/min或800g/min。
3.离心弃上清,加入适量冷冻保存溶液,使细胞浓度为1-5 x 106 cells/ml,混匀,分装于无菌冻存管中,1 ml/vial,悬浮细胞可以浓一些。
4.冷冻保存方法1: 冷冻管置于4 oC 10 分钟→ -20 oC 30 分钟→ -80 oC 16~18 小时(或隔夜) → 液氮槽vapor phase 长期储存。 或4 oC 1h→ -20 oC 1h→ -80 oC 1h(或隔夜) → 液氮槽vapor phase
最常见的我的k562细胞就是这样做的。
阳离子脂质体法 :稳定转染,瞬时转染,所有细胞使用方法简单,可携带大片段DNA,通用于各种类型的裸露DNA或RNA,能转染各种类型的细胞,没有免疫原性。虽在体外基因转染中有很高的效率,但在体内,能被血清清除,并在肺组织内累积,诱发强烈的抗炎反应,导致高水平的毒性,这在很大程度上限制了其应用。
阳离子聚合物 :稳定转染,瞬时转染,所有细胞。除了具有阳离子脂质体的转染效率高,操作简单,适用范围广,重复性好等特点外,还具有在体内,转染效率高,细胞毒性低等特点,是新一代的转染试剂。
细胞冻存是细胞培养、引种、保种和保证实验顺利进行的重要技术手段。在细胞建株和建系中,及时冻存原始细胞是十分重要的。在杂交瘤单克隆抗体的制备过程中,杂交瘤细胞、每次克隆化得到的亚克隆细胞的冻存保种常常是必不可少的实验操作。因为在没有建立一个稳定的细胞系或稳定分泌抗体的细胞系的时候,细胞的培养过程中随时可能因细胞的污染、分泌抗体能力的丧失或遗传变异等等导致实验失败,如果没有原始细胞的冻存,则因为上述的意外而前功尽弃。索莱宝细胞冻存常用冻存液的成分如下:20%血清(FBS)、10%DMSO、70%1640培养液;或90%血清(FBS)、10%DMSO,更可防止细胞内冰晶形成。将DMSO和FBS加入DMEM中,各自含量占总体积的10%,然后滤膜过滤后分装保存备用。

最近打算做PDX,成瘤后想冻一些组织,求推荐试剂盒,最好能说下价格?还有就是必须要在液氮中吗,-80行不行?

戊二醛固定液的配制123
吴擎刘美真2017-09-29
我最近要做大鼠TNF-a的ELISA,可是试剂盒还没到,将大鼠脑组织进行-70度冻存,可以吗?可以放多久啊?谢谢各位大侠帮忙解答啊!!
大家好,我想请问下大家,-20℃或其他冻存的试剂如何解冻更好呢?希望得到大家的帮助,谢谢。
冻存组织的mirna会不会降解123
腐姐控控06102017-09-29
博陵科为 的 miRcute miRNA荧光定量检测试剂盒(SYBR Green),可检测pg级总RNA中miRNA的单碱基差异 miRcute miRNA荧光定量检测试剂盒( SYBR Green)中包含miRNA荧光定量检测的所有试剂,包括2×miRcute miRNA premix和Reverse primer。
2×miRcute。
很高兴能为你解答提问. 最好用新鲜血液提取,不具备条件时先抗凝再冷冻保存. 抗凝剂最好用肝素,因为EDTA可能会对后续的PCR有影响,会螯合PCR反应中的Mg2+,亦可根据实验要求选择适当的抗凝剂. 冷冻血液的保存:先液氮速冻,再置于- 80℃保存. 用TRIZOL试剂盒防止RNA降解.
细胞冻存
1. 配制含10%DMSO或甘油、10~20%小牛血清的冻存培养液;
2. 取对数生长期的细胞,去除旧培养液,用PBS清洗。
3. 去除PBS,加入适量胰蛋白酶(覆盖培养皿表面)把单层生长的细胞消化下来;
4. 离心1000rpm,5min;
5. 去除胰蛋白酶,加入适量配制好的冻存培养液,用吸管轻轻吹打使细胞均匀,计数,调节冻存液中细胞的最终密度为5×106/ml~1×107/ml;
6. 将细胞分装入冻存管中,每管1~1.5 ml;
7. 在冻存管上标明细胞的名称,冻存时间及操作者;
8. 冻存:标准的冻存程序为降温速率-1~-2℃/ min;当温度达-25℃以下时,可增至-5℃~-10℃/min;到-100℃时,则可迅速浸入液氮中。也可将装有细胞的冻存管放入-20℃冰箱2h ,然后放入-70℃冰箱中过夜,取出冻存管,移入液氮容器内。

我用bioteke的中量全血基因组DNA提取试剂盒(溶液型)提取冻存全血DNA:蛋白质沉淀液处理后上清呈褐色或淡红色,不是无色;在加入异丙醇后是褐色或淡红色絮状沉淀,不是白色絮状DNA沉淀。
我是参照试剂盒说明一步一步来的,请问这是什么原因?
是不是溶血啦,还是蛋白质没有沉淀完全,如何解决这一问题?
感谢啦!
在冻存前一天最好换一次培养液。
细胞冻存是细胞保存的主要方法之一。利用冻存技术将细胞置于-196℃液氮中低温保存,可以使细胞暂时脱离生长状态而将其细胞特性保存起来,这样在需要的时候再复苏细胞用于实验。而且适度地保存一定量的细胞,可以防止因正在培养的细胞被污染或其他意外事件而使细胞丢种,起到了细胞保种的作用。除此之外,还可以利用细胞冻存的形式来购买、寄赠、交换和运送某些细胞。 细胞冻存时向培养基中加入保护剂--终浓度5%.15%的甘油或二甲基亚砜(DMSO),可使溶液冰点降低,加之在缓慢冻结条件下,细胞内水分透出,减少了冰晶形成,从而避免细胞损伤。 采用"慢冻快融"的方法能较好地保证细胞存活。标准冷冻速度开始为-1 到 -2℃/min,当温度低于-25℃时可加速,到-80℃之后可直接投入液氮内(-196℃)。
样品进入无菌室的管理123
_DJ___IXfrj°2021-07-29
进入前肯定是要进行消毒的,穿戴好衣服鞋帽,下面给你介绍下一些实验室要注意的安全事项吧。 1、加入试剂之前,把它混匀一下,以免放置时间长了浓度不均。冻存的试剂更是要等全部融化后才能使用。
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