*请输入10-500个字符
已帮助
0人
0人
本回答由提问者推荐
用户
悬浮细胞的转染方法:(以下内容转自生物帮资讯)DXY721认为:悬浮细胞和贴壁细胞在转染过程中差别不大,主要差别在于转染后的筛选,当然如果你做的是瞬时转染就不存在筛选的问题了。其实转染的过程很简单,问题是能不能转的进去的,转染率能有多少,转进去是否可以稳定表达目的蛋白等等。我们也是用脂质体做悬浮细胞的转染,说明书上都有具体的操作过程,将脂质体和目的基因按比例混合,然后加到细胞悬液里就OK了,说的简单,实际上还是有一些细节要注意的,比如脂质体和目的基因混合的比例,转染的细胞数,细胞的代数,细胞的状态,有的还要求在转染的前一天传代一次,不过不要怕,这些在脂质体说明书上都有明确的说明,按照说明书做就可以了。jinghuanlv认为:悬浮细胞和贴壁细胞转染还是有很大不同的。脂质体转染的原理基于电荷吸引原理,先形成脂质体-DNA复合物,散布在细胞周围,然后通过细胞的内吞作用,将目的基因导入细胞内,而脂质体复合物与贴壁细胞的接触机会比悬浮细胞高出很多倍,所以,脂质体转染时悬浮细胞的转染效率要明显低于贴壁细胞。我们实验室转染悬浮细胞是用的电穿孔法,目前为止,悬浮细胞转染的最好方法还是电转,我们实验室用的电转仪是Bio-Rad的,使用条件是电压250V,电容975uF,效果不错,不妨一用。
▍
相关分类
▍
相关文章
成纤维细胞的培养和形态 实验方法
PolyplusTransfection 推出用于生物生产的新一代 PEI 转染试剂
reagentproteins品牌产品|图片|价格第1页深圳欣生源生物 ...
【合成蛋白质,辅酶A合成,蛋白质生物合成生产配方加工工艺专题】...
Establishment of Stable Transfectant of CHO Lec Cells 实验方...
衢州卫凯化工有限公司
—高质量DNA获取方法之月桂酸钠法 徐大彬
LselectinPNAd Interactions under Flow Conditions._实验方法...
东营二手别克君威 2015款 1.6T 自动 领先技术型 (国Ⅴ) 第一车网
表面活性剂在日常生活中的应用
HbA1c和糖化血红蛋白基本定义 | CoreAb|北京沫之东生物技术有限...
试述再生细胞类型、分布及特点。 _答案_百度高考
▍
相关问答