MTT cell proliferation assay kit, 500 reactions. Kit Content: Solution A 5ml, Solution B 50ml. MTT Proliferation Assay Kit provides an easy to use tool for studying the induction and inhibition of cell proliferation in any in vitro model. This kit will also allow investigators to screen drug candidates involved in cell cycle regulation. In this assay, MTT is taken up by cells through the plasma membrane potential and then reduced to formazan by intracellular NAD(P)H-oxidoreductases.
MTT Cell Proliferation Assay Kit
Catalog Number:
CP-001, 1000 reactions
CP-002, 500 reactions
Introduction
The reduction of tetrazolium salts is now recognized as a safe, accurate alternative to radiometric testing.MTT [3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide] assay, first described by Mosmann in 1983, is based on the ability of a mitochondrial dehydrogenase enzyme from viable cells to cleave the tetrazolium rings of the pale yellow MTT and form a dark blue formazan crystals which is largely impermeable to cell membranes, thus resulting in its accumulation within healthy cells. Solubilization of the cells by the addition of a detergent results in the liberation of the crystals which are solubilized.The number of surviving cells is directly proportional to the level of the formazan product created. The color can then be quantified using a simple colorimetric assay. The results can be read on a multi-well scanning spectrophotometer (ELISA reader).
Storage:
Upon receiving, Solution AMTT solution should be kept at-200C and protected from light.Store properly, the kit components should remain stable for 6 months.
Kit Contents:
1.Solution AMTT solution: 5ml ( 500 reactions), 10ml (1000 reactions)
2. Solution BCrystal dissolving solutions: 50ml ( 500 reactions), 100ml (1000 reactions)
Protocol
1. Plate cells in 96-well tissue culture plate at density of 2x105 per well in 100ul of culture medium.
2. 5 hours before the end of the incubation add 10ul of MTT solution from step one to each well containing cells.
3. Incubate the plate at 37ºC for 5 hours.
4. Remove media with needle and syringe.
5. Add 100ul of Solution B to each well and pipette up and down to dissolve crystals.
6. Transfer to plate reader and measure absorbance at 570nm.
Reference Mosmann T. Rapid colorimetric assay for cellular growth and survival: application to proliferation and cytotoxicity assays. J Immunol Methods. 1983 Dec 16;65(1-2):55-63.
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(1)移液杆可360旋转,不用工具可卸下121℃高温灭菌。
(2)符合人体工程学的外型设计。
(3)符合ISO9000和GLP规定,用户可独立校准。数字可调式移液器校准不需要工具。同时有较高的精度和误差系数。
(4)吸头接嘴有独特的V形圈,可以适合不同品牌的吸头。
移液器应用范围:
临床诊断实验室,生物技术实验室,药学和化学实验室,环境实验室,食品实验室
●更换安全圆锥 ●活塞密封磨损或润滑剂不足 ●清洗并给垫圈重上润滑剂
●更换垫圈 ●仪器损坏 ●送去维修 移液性能规格超出给定范围 ●使用了不合适的吸头 ●用原厂的吸头测试 ●非标准测试条件或校准改变 ●根据ISO 8655标准进行测试,必要时再校正 ●移液器没有定期保养 ●进行常规维护并在测试 ●安全圆锥过滤器污染 ●更换安全圆锥过滤器 ●移液器渗漏 ●见一下说明 操作按钮卡住或无法固定 ●液体已经通过吸头圆锥并在移液器内部变干 ●清洗活塞/密封处和吸头圆锥并上油 ●安全圆锥过滤器污染 ●更换安全圆锥过滤器 ●润滑剂不足 ●相应上润滑剂 移液器阻塞,洗液容量太小 ●液体已经通过吸头圆锥并在移液器内部变干 ●清洗并给垫圈和活塞重上润滑剂,清洗安全圆锥 吸头弹出器卡住或无法固定 ●吸头圆锥和/或止推环污染 ●用软布赫柔和的清洁剂或70%乙醇擦干净向左转|向右转
第一步,拨掉ika移液器吸头弹射器放在盛放盘内;
第二步,将ika移液器容量值调至最大,拧开白套筒与手柄之间的连接螺帽;
第三步,白套筒端口向下,轻轻提起手柄放入盛放盘内,按住活塞尾部,将白套筒端口向上,置于盛放盘上部,小心取出活塞组件,以免弄掉零件;
第四步,从活塞杆上或白套筒内取出密封圈,放入盛放盘内。
最后,安装ika移液器,安装移液器的步骤与拆卸正好相反。需要注意的是,密封圈的黑色部份朝向白套筒,白色部份朝向手柄。
一、国产移液器我们以大龙移液器为例,它具有以下特点:
1. 重量轻,使用轻巧便捷,可减少手部疲劳。
2. 量程准确。
3. 量程具有锁定装置,符合人体手型和手感
4. 重量轻,使用轻巧便捷,可减少手部疲劳。
5. 具有可拆卸式高温高压消毒。
6. 产品规格齐全,共有16种。
二、进口移液器我们以德国艾本德移液器为例,它具有以下特点:
1. 符合ISO9000和GLP规定,用户可独立校准。
2. 十种规格,包括从0.1ul-5ml的体积变化,满足常规的需要,同时精度和误差较高。
3. 移液杆可360旋转,不用工具可卸下121℃高温灭菌。
4. 吸头接嘴有独特的V形圈,可以适合不同品牌的吸头。
5. 十种规格,包括从0.1ul-5ml的体积变化,满足常规的需要,同时精度和误差较高。
通过以上介绍,相信用户对这两种移液器的区别也有一定的了解了。
移液器使用过程中的注意事项如下:
一.设定移液体积:1.从大体积调节到小体积时,为正常调节方法,逆时针旋转刻度即可;2.从小体积调节至大体积时,可先顺时针调至超过设定体积的刻度,再回调至设定体积,这样可以保证最佳的精确度。
二.装配移液器吸头:1.单道移液器,将移液端垂直插入吸头,左右微微转动,上紧即可2.用移液器反复撞击吸头来上紧的方法是不可取的,这样操作会导致移液器部件因强烈撞击而松散,严重的情况会导致调节刻度的旋钮卡住。3.多道移液器,将移液器的第一道对准第一个吸头,倾斜插入,前后稍许摇动上紧,吸头插入后略超过O型环即可。
三.养护:1、如液体不小心进入活塞室应及时清除污染物;2、移液器使用完毕后,把移液器量程调至最大值,且将移液器垂直放置在移液器架上;3、根据使用频率所有的移液器应定期用肥皂水清洗或用60%的异丙醇消毒,再用双蒸水清洗并晾干;4、避免放在温度较高处以防变形致漏液或不准;5、发现问题及时找专业人员处理;6、当移液器吸嘴有液体时切勿将移液器水平或倒置放置,以防液体流入活塞室腐蚀移液器活塞;7、正确使用移液器吸液、排液,以达高精准度;8、平时检查是否漏液的方法:吸液后在液体中停1-3秒观察吸头内液面是否下降;如果液面下降首先检查吸头是否有问题,如有问题更换吸头,更换吸头后液面仍下降说明活塞组件有问题,应找专业维修人员修理。9、需要高温消毒的移液器应首先查阅所使用的移液器是否适合高温消毒后再行处理。
移液器又称移液枪,是一种用于定量转移液体的器具,被广泛用于生物、化学等领域。
特点:
移液杆可360旋转,不用工具可卸下121℃高温灭菌。
符合人体工程学的外型设计。
符合ISO9000和GLP规定,用户可独立校准。数字可调式移液器校准不需要工具
固定式移液器校准只需要需要小型工具。
有较高的精度和误差系数。
吸头接嘴有独特的V形圈,可以适合不同品牌的吸头。
每把多道移液器赠送每支移液器赠送德国原装:可高温高压消毒的吸头盒(内置96个吸头)1 个;移液器支架1个;PP带盖试剂池1 个;吸头盒装填架1个;5.Viton密封环,硅油及安装工具1套。
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