Description
ExcelTaq™ Taq DNA Polymerase is a recombinant thermo-stable Taq DNA polymerase expressed and purified from an E. coli strain carrying the cloned gene. With a high DNA synthesis rate and high thermo-stability, ExcelTaq™ Taq DNA Polymerase is suitable for common and specialized PCR applications.
Features
5"→3" DNA polymerase activity
5"→3" exonuclease activity
No detectable 3"→5" exonuclease (proofreading) activity
Generates PCR products with 3’-dA overhangs
Thermo-stable – half-life lasts for more than 40 min at 95°C
Applications
Routine PCR
Amplification of DNA fragments up to 8 kb
Generation of PCR products for TA cloning
DNA labeling
Storage
-20°C for 24 months
Elongation capability
ExcelTaq™ Taq DNA Polymerase can amplify PCR products from λDNA up to 15 kb (M: DM3100).
Sensitivity
ExcelTaq™ Taq DNA Polymerase can amplify PCR products from as little as 1 pg of template DNA (M: DM3100).
Contents
|
Storage Buffer
20 mM Tris-HCl (pH 8.0), 100 mM KCl, 0.1 mM EDTA, 1 mM DTT, stabilizer, 50% (v/v) glycerol
10X Taq buffer
200 mM Tris-HCl (pH 8.8 at 25°C), 100 mM KCl, 100 mM (NH4)2SO4, 20 mM MgCl2, 1% Triton X-100
Unit Definition
One unit is defined as the amount of enzyme that will incorporate 10 nmol of dNTP into acid-insoluble material in 30 minutes at 74°C.
Storage
-20°C for 24 months
Manual
Manual_TP1000_ExcelTaq™ Taq DNA Polymerase
SDS
SDS_TP1000
Recommended PCR Condition
Template | 1 – 150 ng |
Forward primer | 0.1 – 0.5 µM |
Reverse primer | 0.1 – 0.5 µM |
10X Taq Buffer | 5 µl |
dNTPs | 0.2 mM (each) |
Taq DNA Polymerase | 0.25 µl (1.25U) |
H2O | to 50 µl |
Total volume | 50 µl |
Recommended PCR Program
Steps | Temp. | Time | Cycles |
Template denature | 94°C | 2 min | 1 |
Denature | 94°C | 30 sec | 25-40 |
Annealing | 50-68°C* | 30 sec | |
Extension | 72°C | 30 sec/kb | |
Final extension | 72°C | 1 min | 1 |
*Optimal PCR condition varies according to primers’ thermodynamic properties.
Mutations in the PKM2 exon-10 region are associated with reduced allostery and increased nuclear translocation
[RP1000] ExcelRT™ Reverse Transcriptase
High yield
Thermostable, up to 50°C, during first strand synthesis
High processivity, generating cDNA up to 8 kb
Reduced RNase H ribonuclease activity
[TP5000] ExcelTaq™ Hot Start II DNA Polymerase
Aptamer-based hot start PCR
Reversible enzyme inactivation
Omits extra enzyme activation step
Convenient for room temperature PCR set-up
High yield and specificity of target amplicons
Wide range of amplicon length (up to 10 kb)
High sensitivity (as low as 1 fg of plasmid)
[TQ1200] ExcelTaq™ 2X Fast Q-PCR Master Mix (SYBR, no ROX)
High Stability
Fast Hot Start
High Sensitivity
Low Background / High Specificity
Suitable for Fast Program
Smart Blue Contrast Dye
[TP1200] ExcelTaq™ 5X PCR Master Dye Mix
5’→3’ DNA polymerase activity
No detectable 3"→5" exonuclease (proofreading) activity
Generates PCR products with 3"-dA overhangs
High yield PCR
High reproducibility
Reduced pipetting errors
Includes tracking dye for direct loading after PCR
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最近在学习电生理,有些问题不太明白,还望大家不吝指教!
在电压钳-65mv下记录到的spike是不是跟在电流钳下记录到的动作电位一致,另外有人认为在没有动作电位电流即spike的情况下,依然能够记录到自发性动作电位,那么这个自发性动作电位是怎么产生的
请教各位老师:1.阈电位之前少量开放的钠通道和到达阈电位大量开放的钠通道是否都是电压门控钠通道?如果是,那之前的钠通道是怎么开放的,如果不是,那它是那种钠通道呢?2.神经细胞的电压门控钠通道激活门在+20mv开放,可为什么神经细胞的阈电位是-55mv呢?想不通,望指点,感谢!!
例如,我们认为大地的电位为0,这就是参考点,现在有A、B两点,A点对地的电位是+5V,B点对地的电位是-3V。我们可以说,A与地之间的电压是5V,B与地之间的电压是3V,但A与B之间的“电位差”是8V,因此AB两点之间的电压是8V。
电位:是电路里某点对参考点之间的电压,而参考点的电位一般规定为0伏。
电位是相对的,电路中某点电位的大小,与参考点的选择有关;选择不同的参考点,电位的值是不一样的。
这个概念跟高度有点类似;
比如说这栋楼房楼高9米,就是指它离地面的高度,地面就是参考点,地面的高度为0 。
而第2层楼有3米高,就是指第3层高度减去第1层的高度。
假如A点的电位是10V,B点的电位是8V,C点的电位是6V.那么A到B之间的电压差是2V,A到C之间的电压是4V.
通俗点讲:我们把两节干电池串联,接个小灯泡,小灯泡两端的电压差就是3V,而一节干电池的两端的电压差是1.5V.如果我们将两节干电池并联,再接个小灯泡,小灯泡两端的电压差就是1.5V(并接电池的作用是加大容量,这个估计你还不懂)
电压差就是用高电位减去低电位的差值.设干电池的正极为1.5V,负极为0V,两点的电压差就是1.5V.设干电池的正极为0V,负极就为-1.5V.当两节干电池串联的时候,一节的负极与另外一节的正极连在一起,他们就是等电位,都是0V,所以第一节的正极1.5V减去第二节的负极-1.5V就得出从第一节的正极,到第二节的负极的电压差为3V.
更通俗的说:电位就相当于你现在所在的楼层,比如你现在在5楼,另外有个电位是在二楼,你和他就相差3层楼(这就是电压差),如果另外一个电位在地下1层,那你和他就相差6层(这个也是电压差)
【杂志】lifescience7020021185-1203
【作者】Mei-HanHuang,Sheng-NanWu,Chi-PienChen,Ai-YuShen
【单位】DepartmentofPharmaceuticalScience,FooYinInstituteofTechnology,Ta-Liao,KaohsiungCounty,Taiwan,R.O.C.DepartmentofMedicalEducationandResearch,KaohsiungVeteransGeneralHospital,KaohsiungCity,TaiwanDepartmentofPharmacy,TajenInstituteofTechnology,Pingtung,Taiwan,R.O.C.
【文摘】Quinoneshavebeenshowntopossessantineoplasticactivity;however,theireffectsonioniccurrentsremainunclear.Theeffectsof2-mercaptophenyl-1,4-naphthoquinone(2-MPNQ),menADIone(MD)and1,4-naphthoquinone(1,4NQ)oncellproliferationandioniccurrentsinpituitaryGH3lactotrophswereinvestigatedinthisstudy.2-MPNQwasmorepotentthanmenadioneor1,4-naphthoquinoneininhibitingthegrowthofGH3cells.2-MPNQdecreasedcellproliferationinaconcentration-dependentmannerwithanIC50valueof3mM.Inwhole-cellrecordingexperiments,2-MPNQreversIBLycausedaninhibitionofCa21-activatedK+current(IK(Ca))inaconcentrationdependentmanner.TheIC50valuefor2-MPNQ-inducedinhibitionofIK(Ca)was7mM.Intheinsideoutconfigurationofsinglechannelrecording,2-MPNQ(30mM)appliedintracellularlysuppressedtheactivityoflarge-conductanceCa21-activatedK+(BKCa)channelsbutdidnotmodifysinglechannelconductance.Menadione(30mM)hadnoeffectonthechannelactivity,whereas1,4-naphthoquinone(30mM)suppresseditbyabout26%.Both2-MPNQandthimerosalsuppressedthedithiothreitol-stimulatedchannelactivity.2-MPNQalsoblockedvoltage-dependentK+currents,butitproducedaslightreductionofL-typeCa21inwardcurrent.However,unlikeE-4031,2-MPNQ(30mM)didnotsuppressinwardlyrectifyingK+currentpresentinGH3cells.Underthecurrentclampconfiguration,thepresenceof2-MPNQ(30mM)depolarizedthecells,andincreasedthefrequencyanddurationofspontaneousactionpotentials.The2-MPNQ-mediatedinhibitionofK+currentswouldaffecthormonesecretionandcellexcitABIlity.Theblockadeoftheseionicchannelsby2-MPNQmaypartlyexplainitsinhibitoryeffectontheproliferationofGH3cells.
【翻译】醌类化合物已经发现具有抗肿瘤的作用,然而它对于离子通道的影响还不是很清楚。此研究的内容是MPNQ和1,4NO的对于垂体瘤GH3细胞的增殖和离子通道方面的影响。2-MPNQ对于GH3细胞的生长抑制作用较甲萘醌和1,4NO更强。2-MPNQ以3uM的浓度能降低细胞增殖的浓度依赖IC50.在全细胞记录的实验中,MPNQ可逆性的引起I(Kca)浓度依赖的抑制。IC50的MPNQ抑制I(Kca)的浓度是7uM。在单一通道的记录中,2-MPNQ(30mM)可以抑制细胞内BKCa的传导,但并不影响单通道的传导。甲萘醌(30mM)对于此通道没有影响,1,4NO在此浓度下的抑制率大约为26%。2-MPNQ和硫柳汞可以抑制二硫苏糖醇刺激性通道的活动。2-MPNQ也可以阻滞电压依赖的钾通道,但对于L型钙通道的内流有轻微的抑制作用。2-MPNQ与E4031不同的是它并不抑制GH3细胞的内流的钾电流。在当前的研究下表明,2-MPNQ可以使GH3细胞增殖,并且能够增加自发动作电位的频率和持续时间。2-MPNQ介导的钾电流的抑制可能会影响到激素的分泌和细胞兴奋性。2-MPNQ对于这些离子通道的阻滞作用可以部分解释它是如何对GH3细胞增殖的抑制作用。
【点评】比较标准的电生理的SCI文章
1、它们在本质上,是一致的,都是能量的概念。
这种能量在英文中是 specific energy,我们有时翻译成“比能”,
但多数情况下,我们都可以回避了这个概念。在物理、化学中,
有大量的 specific 的概念,例如 specific heat capacity = 比热容。
这种比能的概念,是强度量 intensity,是每库仑电量中的能量,
是涉及到做功的过程的量。
电势乘以电量之后的能量,是一般人所能理解的能量,称为电势能。
电势能 = electric energy,electrostatic energy;
电势能就是电场能,它是广延量 extensity。
2、因为它们涉及到过程,电压、电动势的定义,都是涉及到过程,
是从外力做功,每移动一库仑的电荷,外力做做的功,这个功以
电能的方式贮存在系统中,我们称之为电势:
对于电池,我们称之为电动势,emf = electromotive force;
对于电路、用电器,我们称之为电势差,也就是电压。
3、无论是电势、电势差、电动势,我们定义时,都是借助于一个
过程,都是做功的共同本质,所有它们的共同单位是 焦耳/库仑。
4、它们在计算时,其实都是差值的概念:
A、电压、电压降、电压升、电势差、电势降、电势升、电位降、
电位升、电位差,都是一个概念,都是一个事情的不同名称,
在这方面,汉语中的说法,没有统一,五花八门,眼花缭乱,
它们的本质都是两点间的电势差。
B、即使是说某点的电势,其实也是下意识地不是认为无穷远处
的电势为0,就是认为某个特殊点的电势为0。于电势为0的
点的电势差,就是电势。
C、电源的电动势,就是两个极板之间的电势差。
电势 = electric potential;
电势差 = electric potential difference。
不同之点:
1、电动势的说法只能用于电源,电势、电势差的概念可以用于任何情况。
2、电势是相对的概念,电势差、电动势是绝对的概念;
3、电势不能决定是否有电流,或产生电流、或危及生命的效应,电势差具有。
4、虽然电势差有正负,但是它们都是标量 scalar,电势的大小,可以用库仑
定律通过积分计算而得,是静态的叠加,涉及的superposition,我们翻
译成叠加原理,这个翻译并不完全贴切,但汉语已经尽力,再也无能为力;
电势差的计算,虽然也涉及积分,也涉及叠加,但不是superposition的
概念,它是做功的概念,是动态的叠加。这两种形式的积分,整体构成了
微积分中的积分,在方法论上的完整意义,但即便是大学教授,绝大多数
也无法上升到这类数学物理思想、数学物理方法(就是偏微分方程的物理
方法)、方法论methodology 的层次。
不多写了,仔细写下去,是一本厚厚的方法论的书,也是一本数学物理方法的书。
写多了,会成为众矢之的,会死无葬身之地。被封号是必然的,因为写下去必然
涉及我们的文化习惯、教学习惯、、、、、在只许唱赞歌的年代,任何文化反思
的人注定是自取灭亡的。
电平是表示信号大小。电压是表示电势高低。电位是电能的强度大小。
电平和电位有什么区别和联系?
(1)电平的概念是输出信号的大小值。它是以分贝为单位,从输出中测出的电压值与电平成对数关系。
什么是“电平”?“电平”就是指电路中两点或几点在相同阻抗下电量的相对比值。这里的电量自然指“电功率”、“电压”、“电流”并将倍数化为对数,用“分贝”表示,记作“dB”。分别记作:10lg(P2/P1)、20lg(U2/U1)、20lg(I2/I1)上式中P、U、I分别是电功率、电压、电流。
电位: 电位是电能的强度因素,它的单位是伏特(简称伏,用V表示,是voltage的缩写)。也是二个电压之间的差距。
(2)电压:在电流中有着高电势能和低电势能之间的差别。这种差别叫电势差,也叫电压,电压用符号"U"表示。电压的高低,一般是用单位伏特表示
(3)电位:电位是电能的强度因素,它的单位也是伏特(简称伏,用V表示,是voltage的缩写)。设空间中有两个位置1和2,其电位分别为φ1和φ2,则位置1对于位置2的电位差△φ=φ2-φ1;相应,其电位降E=φ1-φ2。后者在电化学中用得较多,称作电势,在工业或日常生活中也常称作电压(voltage)。
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