AQUApure Di-Ub Chains (K6-linked) Protein, CF Summary
Ub-AQUA analysis:
K6 : 99.19%
K63: 0.40%
K48: 0.22%
K11: 0.14%
All other linkages ≤ 0.03%
Ubiquitin chains vary in length, linkage, and function. K6-linked Di-Ubiquitin Chains (Ub2) are ideal for investigating Ubiquitin-binding proteins and as substrates for Ubiquitin-specific isopeptidases. Reaction conditions will need to be optimized for each specific application. IMPORTANT: Heating this product in SDS-PAGE buffer or terminating reactions containing this product with heated SDS-PAGE buffer could lead to unexpected, high apparent molecular weight banding or smearing on gels that is not representative of product purity. For optimal results, we recommend incubation in SDS-PAGE buffer + DTT at <40 °c="" for="" 20="" minutes="" prior="" to="" gel="" electrophoresis.="">40>
Product Datasheets
Carrier Free
CF stands for Carrier Free (CF). We typically add Bovine Serum Albumin (BSA) as a carrier protein to our recombinant proteins.Adding a carrier protein enhances protein stability, increases shelf-life, and allows the recombinant protein to be stored at a more dilute concentration.The carrier free version does not contain BSA.
In general, we advise purchasing the recombinant protein with BSA for use in cell or tissue culture, or as an ELISA standard.In contrast, the carrier free protein is recommended for applications, in which the presence of BSA could interfere.
UC-11B
Formulation | 1 mg/ml (58 μM) in sterile, deionized water |
Shipping | The product is shipped with polar packs. Upon receipt, store it immediately at the temperature recommended below. |
Stability & Storage: | Use a manual defrost freezer and avoid repeated freeze-thaw cycles.
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Reconstitution Calculator
Background: Di-Ubiquitin
Linkage specific Poly-Ubiquitin chains may be used as a substrate for in vitro reactions with deubiquitinating enzymes ("DUB"s") that cleave the peptide or isopeptide linkage between adjacent Ubiquitin molecules. Poly-Ubiquitin chains can also be used to investigate mechanisms of binding and recognition between the chains and other proteins that contain Ubiquitin-Associated domains (UBAs), Ubiquitin-interacting motifs (UIMs), ZnF"s and/or other Ubiquitin-sensing elements.
K6-linked Di-Ubiquitin chains are manufactured using recombinant Ubiquitin and purely enzymatic techniques to avoid the potential for contaminating synthetic intermediates. The correctness of linkage and purity of each production lot is assessed using the Absolute Quantitation of Ubiquitin method (Ub-AQUA), an LCMS-based technique that provides extremely accurate information on the composition of Poly-Ubiquitin samples.
- Kirkpatrick D.S., et al. (2006) Nat Cell Biol. 8(7): 700-10
- Ordureau, A., et al. (2014) Mol. Cell 56(3): 360–375
- Ordureau, A., et al. (2015) Pro. Nat. Acad. of Sci. USA 112(21): 6637–6642
- Phu L., et al. (2011) Mol Cell Proteomics 10(5): M110.003756
Citations for AQUApure Di-Ub Chains (K6-linked) Protein, CF
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- The ubiquitin interacting motifs of USP37 act on the proximal Ub of a di-Ub chain to enhance catalytic efficiencyAuthors: N Manczyk, G Veggiani, J Teyra, AW Strilchuk, SS Sidhu, F SicheriSci Rep, 2019;9(1):4119.Applications: Bioassay
- ZUFSP Deubiquitylates K63-Linked Polyubiquitin Chains to Promote Genome StabilityAuthors: P Haahr, N Borgermann, X Guo, D Typas, D Achuthanku, S Hoffmann, R Shearer, TK Sixma, N MailandMol. Cell, 2018;0(0):.Species: HumanSample Types: Cell LysatesApplications: Bioassay
- PINK1 autophosphorylation is required for ubiquitin recognitionAuthors: S Rasool, N Soya, L Truong, N Croteau, GL Lukacs, JF TrempeEMBO Rep., 2018;0(0):.Species: Insect - Tribolium castaneumSample Types: Recombinant ProteinApplications: Bioassay
- OTUD4 Is a Phospho-Activated K63 Deubiquitinase that Regulates MyD88-Dependent SignalingAuthors: Y Zhao, MC Mudge, JM Soll, RB Rodrigues, AK Byrum, EA Schwarzkop, TR Bradstreet, SP Gygi, BT Edelson, N MosammaparMol. Cell, 2018;69(3):505-516.e5.Species: HumanSample Types: Recombinant ProteinApplications: Bioassay
- Cholesterol and fatty acids regulate cysteine ubiquitylation of ACAT2 through competitive oxidationAuthors: YJ Wang, Y Bian, J Luo, M Lu, Y Xiong, SY Guo, HY Yin, X Lin, Q Li, CCY Chang, TY Chang, BL Li, BL SongNat. Cell Biol., 2017;19(7):808-819.Species: N/ASample Types: Applications: Control
- Characterization of the deubiquitination activity and substrate specificity of the chicken ubiquitin-specific protease 1/USP associated factor 1 complexAuthors: H Zheng, M Wang, C Zhao, S Wu, P Yu, Y Lü, T Wang, Y AiPLoS ONE, 2017;12(11):e0186535.Species: HumanSample Types: Recombinant ProteinApplications: Bioassay
- In�Vivo Ubiquitin Linkage-type Analysis Reveals that the Cdc48-Rad23/Dsk2 Axis Contributes to K48-Linked Chain Specificity of the ProteasomeAuthors: H Tsuchiya, F Ohtake, N Arai, A Kaiho, S Yasuda, K Tanaka, Y SaekiMol. Cell, 2017;66(4):488-502.e7.Applications: Bioassay
- Myosin VI Contains a Compact Structural Motif that Binds to Ubiquitin ChainsAuthors: F He, HP Wollscheid, U Nowicka, M Biancospin, E Valentini, A Ehlinger, F Acconcia, E Magistrati, S Polo, KJ WaltersCell Rep, 2016;14(11):2683-94.Species: HumanSample Types: Recombinant ProteinApplications: Bioassay
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这样的回答可能没分,好和不好都是比较出来的,一群国产的放在一起比总有个性能比较均衡,比较突出性价比好的,
还是没有和说那个厂家的好桂林的呢好像是优利特这个厂家在做,特康的前身呢就是百特,现在的百特呢基本上是在做试剂,这些东西呢。
也搜索的到的,不过答案还是比较接近的,但想知道的是国产那个厂家生产的比较好,而只回答了一半就和介绍了下国产的血球分析仪有那个几个大的厂家,没有和区分那个最好那个第二那个次点,或许一堆鸡蛋里实在挑不出骨头。
具所知呢迈瑞的好点特康实力没有迈瑞好,迈瑞吸引了一批外资在搞研发,桂林的呢好像有个优利特现在出血分析仪,他做的尿分析仪市场的占有还可以,血的反应不是很强烈。
实在是想找个内行的给比较下。
需要测量转染之后细胞某mRNA表达变化。
实验组给予转染,空白组做对照。
做PCR的时候肯定是要求两组的细胞计数是一样的,请问是转染之前还是转染之后对两组进行计数呢?如果样品两边计数不一样,怎么让做实验的时候两边细胞数目变成一样呢?
淋巴细胞包括 T淋巴细胞(CD3+)、B淋巴细胞(CD3-CD19+)、NK细胞(CD3-CD16+CD56+),其中,T细胞是淋巴细胞的主要组成。
T 淋巴细胞:就是胸腺依赖淋巴细胞(thymus dependent lymphocyte),简称T细胞。
CD3+ 淋巴细胞代表全T淋巴细胞,它包括辅助/诱导T淋巴细胞(CD3+CD4+)、抑制/细胞毒T淋巴细胞(CD3+CD8+)、CD4+T细胞纯真亚群(CD4+CD45RA+/CD4+CD45RA+62L+)和记忆亚群(CD4+CD45RA-/CD4+CD45RO+)、功能亚群(CD28+)、激活亚群(CD38+、HLA-DR+)、凋亡亚群(CD95+)等。
CD4 和 CD4+ 的区别
实际上,病友们常说的CD4就是辅助/诱导T淋巴细胞(CD3+CD4+)。CD4+T淋巴细胞的正确细胞是CD3和CD4全部双阳性的细胞,同样,病友们常说的CD8就是抑制/细胞毒T淋巴细胞(CD3+CD8+)。CD8+T淋巴细胞是CD3和CD8都为阳性的细胞。在识别CD4和CD8中不应包括其他细胞型别的非T淋巴细胞,比如CD3-CD4+细胞,因为此处CD3为阴性。这就是我们经常会看到文字表述CD3、CD4、CD8后面带有+号的原因,或者如同上面一样——出现更让我们这些外行眼晕的CD3+CD4+、CD3+CD8+。
CD3+CD4+ 代表 T辅助/诱导细胞亚群(病友们简称为CD4)
CD3+CD8+ 代表 T抑制/细胞毒性细胞亚群(病友们简称为CD8)
CD3+CD4+/ CD3+CD8+ 代表 T辅助细胞/T抑制细胞的比值 (病友们简称为CD4/CD8比值)
CD4 加 CD8 等于 CD3 吗?
CD3+理论上应约等于CD4+细胞和CD8+细胞的总和,但往往出现CD4+加CD8+细胞之和大于CD3+,这是因为CD4+细胞包括CD3+/CD4+细胞(真正Th细胞)和CD3-CD4+细胞(非Ts细胞),而后者包括CD3-CD8+CD16+56+细胞(一部分NK细胞)和CD3-CD8+CD16+56-(未知细胞),这部分CD8阳性细胞并不表达CD3。真正的TH细胞是CD3+CD4+细胞,真正Ts细胞是CD3+CD8+细胞。尤其当患者NK细胞明显增加时,会使CD4细胞和CD8细胞的总和远大于CD3+细胞。所以,用CD4、CD8的值来得出CD3的值是不准确的,反之亦然。
我们简单记住——CD3约等于但必然小于CD4加CD8之和。
CD4/CD8比值
由于HIV的攻击对象正是人体的CD4细胞,因此CD4记数能够直接反映人体免疫功能,是提供HIV感染患者免疫系统损害状况最明确的指标。CD4细胞的绝对计数通常会随生理情况的不同而有较大的波动,而CD4和CD8的比值则相对比较稳定。HIV/AIDS患者机会性感染发生频率与CD4细胞计数及CD4/CD8比值有着非常密切的关系,CD4 T细胞计数小于200、CD4/CD8比值小于0.20,机会性感染明显增加,且随着病情进展同时发生多种机会性感染的几率也明显增加。
健康人的数值范围
估计鉴于中国地域、种族等差异原因,加之缺少足够的大样本报告,目前E-HIV看到的参考范围各有不同,而且以相对计数(百分比)为主。现在检测外周血中T淋巴细胞及各亚群数量和比例多以流式细胞术进行,流式细胞检测分单平台法和双平台法。单平台法更精确,但标准荧光微球价格昂贵,且流式细胞仪目前操作未实现全程自动化,手工环节误差难以掌握。双平台法用血细胞计数仪测定白细胞计数,再用流式细胞仪检测相对计数(百分比),从而计算出待测细胞的绝对计数,这可能就是我们看到的参考范围多是百分比的缘故。卫生部2011年12月14日发布了《流式细胞术检测外周血淋巴细胞亚群指南》,2012年6月1日正式实施,指南中并未划定健康人的参考数值。诸位可以参看E-HIV此前转载的相关文献:HIV感染者与健康人CD4、CD8及其比值对照和不同年龄组CD4、CD8正常值调查 。或者参看以下不全面的数据:
相对计数参考数据一:
CD3+细胞阳性率61%~85%;CD4+细胞阳性率28%~58%;CD8+细胞阳性率19%~48%;CD4/CD8比值为0.9~2.0。
相对计数参考数据二:
CD3:60-80% ; CD4:35-55% ; CD8:20-30% ;CD4/CD8比值:1.4-2.0。
CD4/CD8比值还有一数据为1.66±0.33
绝对计数:
CD4的正常值范围在不同的国家会有所差别,即便是同一国家的不同地区其指标也可能存在差异,一般比较认可的范围是每微升血中500~1500个。我们实验室通过对我国20—40岁青壮年人群样本的检测发现,CD4的平均值为750个左右,但也不乏每微升血中只含有CD4细胞350或者400个的健康成人。随着年龄增长(如60岁以上),CD4细胞会逐渐减少。单纯的精神因素完全可以导致CD4偏低,如抑郁症可以使CD4低至每微升血300个,甚至200多个。正常情况下CD4/CD8比值介于1.5~2.5之间,95%的正常人CD4/CD8的比值都在1以上,但是也有一些正常人可以发生倒置(即比值低于1)。
aware天 猫可在家自测不用抽血简单方便
—— 以上来自中国疾病预防控制中心性病艾滋病预防控制中心网站上李太生的问答,网址:点击
李太生是卫生部艾滋病临床专家组副组长和卫生部艾滋病专家咨询委员会临床组副组长,所在的北京协和医院是《流式细胞术检测外周血淋巴细胞亚群指南》的主要起草单位。
《流式细胞术检测外周血淋巴细胞亚群指南》中对指标异常的叙述:
CD4+T细胞减少:常见于恶性肿瘤、 遗传性免疫缺陷症、 艾滋病、 应用免疫抑制剂等。
CD8+T细胞:增多见于系统性红斑狼疮、 慢性活动性肝炎、 传染性单核细胞增多症、 恶性肿瘤及其他病毒感染等。降低见于类风湿性关节炎、 糖尿病等。
CD4+T/CD8+T比值:降低见于传染性单核细胞增多症、 急性巨细胞病毒感染、 再生障碍性贫血、 骨髓移植恢复期、 肾病等,艾滋病患者的 CD4/CD8比值多在0.5以下。增高见于移植后发生排异反应、 类风湿性关节炎 、 糖尿病等。
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6840临床检验分析仪器
没有这个功能的机器,必须使用counting beads,也就是在一定体积的血制品样本中加入一定量已知体积的计数微球。这样微球的浓度已知,通过计数1000个微球,得到计数的细胞数量,从而计算出原来样品的细胞浓度。
1;变阻脉冲法,光电比色法
2;荧光干涉法
那种的好一点
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