Product Name | Protease - Activated Receptor - 3 (1 - 6), PAR - 3 (1 - 6), humanTFRGAP - NH2 |
Size | 1 mg |
Catalog # | AS-62657 |
US$ | $68 |
Purity | % Peak Area By HPLC ≥ 95% |
This is amino acids 1 to 6 fragment of the protease-activated receptor 3 (PAR-3). This synthetic peptide induces ERK activation in human carcinoma cells endogeneously expressing PAR1 and PAR3. This effect is completely abolished by single alanine substitution at positions 3, 4 and 6 in the peptide. PAR-3 allosterically regulates PAR1 signaling by receptor dimerization governing increased endothelial permeability. Targeting of PAR3 may mitigate the effects of PAR1 in activating endothelial responses such as vascular inflammation. However this peptide does not affect VEGF release or expression. | |
Detailed Information | Material Safety Data Sheets (MSDS) |
Storage | -20°C |
References | Kaufmann, R. et al. Regul. Pept. 125, 61( 2005), McLaughlin, J. et al. PNAS 104, 5662 (2007), Arisato, T. et al. Cell. Mol. Life Sci. 60, 1420 (2003). |
Molecular Weight | 646.8 |
TFRGAP-NH2 | |
Sequence(Three-Letter Code) | H - Thr - Phe - Arg - Gly - Ala - Pro - NH2 |
Product Citations | Rauch, BH. et al.Circ. Res. 94, 340 (2004). |
ebiomall.com
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1.首先分光光度计使用前要预热15分钟(一般是,设备型号不同可能有所区别)
2.然后注意调零。
3.选取正确的比色皿(包括规格比如1cm,2cm等;还有材质比如玻璃的还是石英的)
4.比色皿外壁擦拭干净且不得有划痕迹最好使用镜头纸进行擦拭
5.检品最好做平行样
可见光的波长范围是400nm~760nm,红620nm--760nm 橙592nm--620nm 黄578nm-- 592nm 绿500nm-- 578nm 青464nm--500nm 蓝446nm --464nm 紫400nm--446nm。
不能用玻璃比色皿是因为紫外线的玻璃的透射能力很低(玻璃吸收紫外光能力强),所以一般采用透射能力强的石英比色皿。
希望对你有所帮助!
不懂情追问!
望采纳!
ND-2000是目前国内外实验室中使用最为广泛的一款微量分光光度计,其优越的性能、准确的结果赢得了广大用户的好评。
该产品可用于以下几个方面:
* 紫外检测:常规紫外光波长下检测样品吸光值;
* 核酸检测:可检测dsDNA、ssDNA、RNA等不同类型核酸的浓度及其在260nm、280nm处的吸光值;
* 探针检测:检测荧光标记探针的吸光值,可用于去除未能标记探针的样品;
* 细胞培养物检测:检测细胞培养物在600nm处的吸光值;
* 蛋白检测:检测普通纯化后蛋白的浓度和280nm处的吸光值;
* 蛋白标记检测:可检测被BCA、Bradford或Lowry标定的蛋白样品,自动画出标准曲线并计算出待测蛋白质浓度。
二、 产品简介
NanoDrop 2000超微量分光光度计是NanoDrop的最新产品,应用液体的表面张力特性,样品体积只需要 0.5~2ul,在检测台上,经上下臂的接触拉出固定的光径达到快速、微量、高浓度、免石英管、免毛细管等耗材检测吸收值的优点。此产品设计受专利保护,并在全世界广受欢迎,其准确度与便利性让科学家得以更有效率进行各项研究。
NanoDrop 2000使用高能量氙灯(pulsed xenon flash lamp)可提供190~840nm的全光谱检测,且不需要暖机,开机后立即使用。搭配高感度CCD array检测器,检测吸收值可高达300Abs(dsDNA浓度2~15000ng/ul),大部分纯化后的核酸几乎都不需要稀释即可检测。
待测样品的均质性是NanoDrop 2000的最高要求,一般核酸、蛋白质样品能在检测前以vortex mixer震匀为最佳,若无vortex mixer也应以pipette吸放数次混匀。若担心genomic DNA可能因前述动作而断裂,则改以55?C加热约一分钟,使样品在侦测前呈现均匀状态,以确保 2ul 具有代表性。
检测时选择不同检测模式,可以得到最快速的结果:
● Nucleic Acid ?C 吸收光谱、230nm, 260nm, 280nm吸收值(换算成10mm光径吸收值)、260/280 ratio、260/230 ratio及核酸浓度。
● UV-Vis ?C 190~840nm间所有波长的吸收值及光谱(以1mm光径吸收值呈现)。
● A280蛋白质定量法 ?C 280nm吸收值(换算成10mm光径吸收值)、260/280 ratio及蛋白质浓度。仅适用于纯化后的蛋白质,须具有已知的质量消光系数(mass extinction coefficient)方可计算。
● BCA、Bradford及Lowry ?C 依不同呈色剂提供不同波长吸收值结果,自动画出标准曲线并计算R square,待测蛋白质浓度。
* 蛋白质检测模式目前提供BCA、Bradford及Lowry三种常见定量呈色剂,因呈色剂随时间会逐渐加深,使用前请详阅试剂说明书并制备不同浓度的标准品,在最佳时间内完成检测,以得到良好的标准曲线。每个标准曲线最多可有七个标准品,每个标准品最多可做五重复。
* 测蛋白质时样品体积需使用 2ul,每个样品检测后需以Kimwipes 低尘擦拭纸(编号: 34155 )擦拭15~20回,以避免呈色剂与蛋白质的残留。
浓度范围:
样品种类
最低浓度
最高浓度
(超过时请稀释样品)
再现性 (五重复以上)
核酸
2 ng/ul
15000 ng/ul (dsDNA)
12000 ng/ul (RNA)
浓度范围在 2-100 ng/ul 时,SD为 ± 2 ng/ul
浓度范围大于 100 ng/ul 时,CV为 ± 2%
纯BSA
0.10 mg/ml
100 mg/ml
浓度范围在 0.05-10 mg/ml 时,SD为 ± 0.10 mg/ml
浓度大于 10 mg/ml 时,CV为 ± 2%
蛋白质,以BCA方式定量
0.2 mg/ml
8.0 mg/ml
CV:± 2% (在可侦测的浓度范围内皆然)
蛋白质,以modified Lowry方式定量
0.2 mg/ml
4.0 mg/ml
CV:± 2% (在可侦测的浓度范围内皆然)
蛋白质,以Bradford方式定量
100 ug/ml
8000 ug/ml
浓度范围在 100-500 ug/ml 时,SD为 ± 25 ug/ml
浓度大于 500 ug/ml 时,CV为 ± 5%
蛋白质,以Mini Bradford方式定量
15 ug/ml
100 ug/ml
浓度范围在 15-50 ug/ml 时,SD为 ± 4 ug/ml
浓度大于 50 ug/ml 时,CV为 ± 5%
三、技术参数:
1、波长范围: 190-840nm;
2、波长精度: 1nm;
3、分辨率: <1.8 nm (FWHM at Hg 253.7 nm);
4、其它: 1mm光程长度(可自动调整到0.05mm);
5、检测下限:2ng/μl(dsDNA);
6、检测上限:15000ng/μl(dsDNA);
7、吸光率精确度:0.002 absorbance (1mm光程);
8、吸光率准确性:2%(at 0.76 at 257 nm);
9、吸光率范围:0.02-300 (相当于10mm光程);
10、核酸检测周期:< 5s;
11、体积:14cm×20cm。
四、使用方法举例:
dsDNA:在主画面点选Nucleic Acid,计算机与仪器自动完成联机。依照DNA所溶于之液体准备该溶液(务必确认DNA溶于二次水、TE buffer或哪一组kit的elution buffer)取出1.5 ul 点在侦测台上,放下上臂后再按Blank。在右上方拉选Sample Type 选 DNA-50,在Sample ID位置输入样品名称,将样品混匀,取出1.5 ul 点在侦测台上,放下上臂后再按Measure。
五、结果整理:
NanoDrop2000 软件在侦测一开始会询问档案欲存至何处,若未指定,则档案会存在上一个使用者的档案内。
六、注意事项:
1. 侦测后立即使用拭镜纸(Kimwipe类)擦拭台面。先取一张将上下台面的液体吸走,再将此laboratory wipe吸过样品的面反折到内部,折迭四次后以单方向多次擦拭台面(DNA 擦 5次,Protein 擦 20次)。
2. 同一滴液体只能做一次侦测,欲重复定量同一样品,请擦掉前一滴,重新取出一滴进行侦测。
3. 基本上核酸样品可使用1~2ul做测量,随各液体体积特性之不同会有不同体积需求,原则上不超过 2ul。并请使用2ul pipette避免体积不足导致液柱无法完整形成。唯蛋白质样品因呈色剂与蛋白质本身特性,务必使用2ul进行侦测。
4. 当软件跳出错误讯息时,请详细阅读并依指示进行障碍排除。最常发生的情形是在侦测过程液柱并未正确形成,软件会出现以下讯息。可先用肉眼观察液柱是否未完整连接上下台面,或样品内有泡泡,将上臂拉起后,擦掉该滴样品,再重新进行侦测,必要时可将样品体积加大至2ul。
5. 不可使用含有Hydrofluoric Acid (HF)之腐蚀样品,其它无腐蚀性之液体皆可使用。
品牌:
看了一些文献,但都没有具体说如何测HP浓度
1.想知道如何用分光光度计测幽门螺杆菌的浓度,是选择600nm波长吗?
2.看到一个比浊法测细胞浓度的原理帖子讲解,想问我是否先需要绘制标准线,可是如果要绘制,我又如何获得各种已知的不同浓度的幽门螺杆菌菌液呢?(我就是不知道我的细菌浓度所以才想测,那我该从哪儿获得已知浓度的细菌呢?)
本人实验新人一枚,现在做的是PCR后内切来验证基因多态性,最近遇到了一个难以解决的问题。
本人现在现在用的是天跟的PCRMIX,然后用的是omega的纯化试剂,现在遇到的问题是:我纯化后的PCR产物(只有244bp),在酶标仪、分光光度计检测下浓度相差不大,都是50ul的PCR体系中可以提取出体积35ul,浓度约50-60ng/UL的,纯度1.8-2.0之间纯化液,但是电泳看不到除了Marker之外的条带(图一),即使我加DNA总量达到了几百ng,仍然是什么都看不见,但是似乎隐约有点条带,联系OMEGA的技术后考虑其实并没有回收那么多的DNA,建议我加用异丙醇,但是我加了几百ng都看不见,我觉得加用异丙醇意义不是特别大,而且我是要做内切酶的,对DNA是有要求的(1ug),如果他们的试剂真的存在干扰浓度测定的话,接下来内切我也不好做,所以来求助一下各位大神,是否实验还有所改进,还是更换一些能更好提取小分子DNA的试剂。
PS:我做了引物浓度(华大基因)、模板DNA浓度、Tm的梯度,发现我的模板DNA需要加到几百ng,引物浓度需要加到1.6uM,才能得到比较清晰的条带,但是引物二聚体(40bp)在琼脂糖上一直很明显(图二,目的条带看起来不明显的原因是手机没拍好),PCR的纯化产物也应该是目的条带,因为我在不同引物浓度下的PCR,引物二聚体的条带亮度差别较大,但是纯化产物在酶标仪、分光光度计检测下浓度相差不大,所以应该是产物浓度。现在也是一筹莫展,**各位大神指点。
我之前好像也在丁香园看到过说是部分试剂存在这种情况,不知道各位大神有何指点。
图一(右侧为marker,最亮为200bp,我加了五个孔的样品)
图二(上面的为引物二聚体)
今天,导师问到我一个问题,
HPLC检测器与UV分光光度计的主要区别。
我说HPLC检测器的分光部件在样品流动池的后面,UV分光光度计的分光部件在样品的前面。
导师问我,那么分光部件的前置和后置各有什么优点和缺点呢?
我百思不得其解。
特地前来请教
1.接通电源,打开仪器开关,掀开样品室暗箱盖,预热10分钟。
2.将灵敏度开关调至“1”档(若零点调节器调不到“0”时,需选用较高档。)
3.根据所需波长转动波长选择钮。
4.将空白液及测定液分别倒入比色杯3/4处,用擦镜纸擦清外壁,放入样品室内,使空白管对准光路。
5.在暗箱盖开启状态下调节零点调节器,使读数盘指针指向T=0处。
6.盖上暗箱盖,调节“100”调节器,使空白管的T=100,指针稳定后逐步拉出样品滑竿,分别读出测定管的光密度值,并记录。
7.比色完毕,关上电源,取出比色皿洗净,样品室用软布或软纸擦净。
注意事项:
1、该仪器应放在干燥的房间内,使用时放置在坚固平稳的工作台上,室内照明不宜太强。热天时不能用电扇直接向仪器吹风,防止灯泡灯丝发亮不稳定。
2、使用本仪器前,使用者应该首先了解本仪器的结构和工作原理,以及各个操纵旋钮之功能。在未按通电源之前,应该对仪器的安全性能进行检查,电源接线应牢固,通电也要良好,各个调节旋钮的起始位置应该正确,然后再按通电源开关。
3、在仪器尚未接通电源时,电表指针必须于“0”刻线上,若不是这种情况,则可以用电表上的校正螺丝进行调节。
2.将波长旋至测定的波长。
3.将空白液、校准液或待测液放入比色池,将空白液置于光路中。
4.将开关置于T位,打开比色池盖子,用光量粗调和光量细调调节T为0.0,关上 比色池盖子,调节T为100.0。
5.将开关置于A,用消光调零调节A为0.0 6.重复步骤4和5。
7.将校准液或待测液推入光路,测量溶液的吸光度(A)。
1、光源不同:可见分光光度计的光源一般只用钨灯,而紫外可见分光光度计是用钨灯 氘灯两个光源,同时还多了这两个光源灯的切换部件.这是因为钨灯的光谱范围主要在可见到近红外这段,氘灯主要在紫外端.也正是因为光源的不一样,紫外可见分光光度计也多了一个专门提供氘灯工作的氘灯电源了.
2、光学器件的不同:由于玻璃能吸收紫外波,而对可见到近红外端有比较好的透过性,所以可见分光光度计的一些光学部件可以使用玻璃,而紫外可见分光光度计就不能使用玻璃部件,一般使用石英光学部件.同时由于这个原因,在比色皿的选择上也就有不同了,可见分光光度计可以使用玻璃制的比色皿,而紫外可见分光光度计一般使用石英制的比色皿了.
3、接收器的不同:由于紫外可见分光光度计多了紫外波,所以在接收器的选择上也就不一样了.多了对紫外波的灵敏响应功能,这类接收器的价格就比可见分光光度计的接收器贵了很多了.
可见分光光度计(又名可见光度计、分光光度计)是可见光分光光度法是上海美析仪器采用最新的单片机技术,开发出能够进行定量测量(标准曲线测量,可对物质进行浓度直读);OD值直接测量(吸光度、透过率和能量等直读);动力学测试(测出物质浓度随时间变化OD值的变化);光谱扫描(可以对某一种物质进行全波段扫描,分析物质的特征波长,判断实验过程的误差);多波长测试(可以对物质同时进行多个波长的测试,分析物质的相关特性);还有可以进行DNA/蛋白质测试、总磷总氮测试、重金属测试、农药残留测试、食品安全检测、热力发电金属离子测试等等,广泛应用于食品、药品、电力、生物研究、教学科研、化学化工、质量监督、水质环保和商检等各大领域。V-1500PC型可见分光光度计,波长范围:320nm-1100nm,能满足不同物质的测试。
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