【求助】50×1000层析柱装柱问题
2009-10-12
问题描述：
版主及诸位前辈好！
最近在装一根2L的层析柱（50×1000mm）出现了一个问题：
柱子装好后放置过夜总是出现了干柱现象。
我装柱的步骤是：
1、填料清洗（sephacrylS300），最后溶于ddH2O中。
2、空柱清洗加上装柱器，堵住下面的出水口，同时往柱子内灌入100mlddH2O中。
3、灌入填料匀浆。
4、打开下面出水口，用AKTAFPLC缓慢加压至目标反压。
5、堵住下出水口，旋入层析柱上接头并堵住出水口，4度放置。
这样子到了第二天总是出现了干柱的现象，我反复检查了出水口堵头并重装了几次，同样的问题依然出现。
我使用的层析柱是上海锦华层析设备厂的，不知前辈们可有遇到这样的问题，还望赐教！
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ststony
用户
我一般是小流速过夜 你的柱子装的匀吗感觉你的操作好简单 我装一根要两天 当然咱是土八路
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skykiller
用户装分子筛柱确实很恼人。看了你程序，估计存在下列可能：1、进出口的堵头密封不严。这个最常见。虽然你已经反复检查了，还是有可能的。出现干柱时，看看进口管是否空了，如果没有液体充满，可能性就更大。极端的检验方法就是，在装柱完毕后，不要用堵头封进出口，而是把进出口浸入到液体中，早上再来看是否干柱。如果还是干柱，那么才可以完全排除堵头的可能性。2、填料和溶液的脱气不知道你的填料清洗用的是什么方法。如果是用滤洗的话，可能胶的内部有空气残留。溶液不经过脱气处理，过夜后也会有气体逸出。一般首选真空抽滤脱气，溶液亦可用超声脱气。3、分子筛装柱程序分子筛装柱一般都有比较严格的装柱程序，最好按照填料的说明书来。S300好像至少有两段不同的流速装柱。你的缓慢加压可能不合程序要求，看看说明书吧。柱子全部装好后，最好用使用流速冲洗柱一段时间，推荐一个柱体积以上。4、柱子问题在这儿绝对不是崇洋媚外，国产柱确实在有些方面大大不如进口柱。例如O型圈、柱玻璃管直径上下的均匀度、柱操作的容易度等。一般对分子筛这种对体系要求较高的纯化柱，最好采用进口柱来装，例如XK50/100（GE）。离子交换柱、亲和层析柱用国产柱问题不大，只要你不用梯度洗脱方式。你的干柱有可能是O型圈与玻璃管贴合得不够好。装柱时可以在柱头密封圈的上方留一段液体看看。
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xqdqs19750318
用户干柱现象一般是漏了，检查柱子的出口向下的所有接口是否密封
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ivan0828
用户通常是温度变化所致，不同的温度气体在其中的溶解度是不同的，在这方面找找原因。填料先在室温平衡至少一天一夜，然后装柱后先在室温放置一夜观察，如果没有变化再把装好的柱子置于4度，你再观察一下就清楚了。
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rudy668
用户最近我要进行Purifier的校正，但是说明书被弄丢了死活校正不对求标准方法！！谢谢
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dr130
用户看柱子干的程度，大范围小气泡是填料没清理干净，柱子上头干一截全干就是漏液
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