维生素B2 (核黄素) 荧光测定法实验一荧光测定法2
| 实验方法原理 | 核黄素在pH4～9的条件下，用450nm波长的光激发，可发出波长为520nm的荧光。在核黄素的含量为0.1～10μg范围内，荧光的强度，与核黄素浓度成正比，硫代硫酸钠可消除核黄素的荧光性。 | ||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|
| 实验材料 | 核黄素 试剂、试剂盒 | 荧光红钠硫代硫酸钠盐酸 仪器、耗材 | 荧光分光光度计容量瓶 实验步骤 | 溶液配制： 1.标准核黄素溶液：1.0μg/ml。 2.样品液：含核黄素0.01～10μg/ml。 3.荧光红钠溶液：5μg/ml。 4.荧光消光剂：0.2g硫代硫酸钠,加水溶解至10ml。 操作步骤： 1.仪器定位：在每次测定前，均需用荧光红钠溶液作为标准对荧光分光光度计定位。调好激发波长450nm，荧光波长520nm。调好荧光强度为100。 2.标准核黄素荧光测定：吸取样品液10ml，加入标准核黄素溶液1ml，用0.1mol/L盐酸调至pH5.0，测定荧光强度为A。 3.样品荧光强度测定：各吸取10ml样品液于试管中，分别加入1ml蒸馏水和1ml消光剂溶液。用0.1mol/L盐酸调至pH5.0，于荧光光度计中测定各自的荧光强度。加水者为B，加消光剂者为C。 4.计算  |
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发布于 ： 2018-08-06
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