【求助】请各位帮我看一下我的琼脂糖电泳图
2021-08-06
*请输入10-500个字符
已帮助
0人
0人
tinayuhgb
用户
2．条带模糊或拖尾2-1．DNA上样量过多：减少凝胶中DNA上样量。2-2．DNA降解：避免核酸酶污染。2-3．DNA样品中含盐过高：电泳前通过乙醇沉淀去除过多的盐。2-4．DNA变性：电泳前不要加热，用20mM NaCl缓冲液稀释DNA。2-5．电泳缓冲液陈旧：电泳缓冲液多次用后，离子强度降低，pH值上升，缓冲能力减弱。建议经常更换。2-6．电泳条件不合适：电泳时电压不应超过20V/cm，温度＜30℃；巨大DNA链，温度＜15℃。2-7．蛋白污染：电泳前通过酚抽提去除蛋白。另外，是什么染料？
已帮助
0人
0人
duxiaoye
用户相机对焦没调好，巨汗啊
已帮助
0人
0人
misakidai
用户duxiaoye相机对焦没调好，巨汗啊是这样吗？我们是电脑连着的，没有看到可以调焦距这个选项
已帮助
0人
0人
misakidai
用户duxiaoye相机对焦没调好，巨汗啊Marker都没有这么弥散，是调焦的问题吗？
已帮助
0人
0人
sjj555
用户有没有可能是你的电泳缓冲液用的太久了？
已帮助
0人
0人
小心地滑94
用户maker都糊的话怀疑是胶的问题，建议TAE重新配后再试。
已帮助
0人
0人
misakidai
用户小心地滑94maker都糊的话怀疑是胶的问题，建议TAE重新配后再试。我用的是tbe新配不久的呀是糖的问题嘛？
已帮助
0人
0人
misakidai
用户sjj555有没有可能是你的电泳缓冲液用的太久了？配过不久的而且是新买的缓冲液
已帮助
0人
0人
小心地滑94
用户misakidai我用的是tbe新配不久的呀是糖的问题嘛？你稀释成1x的时候用的是纯水么？这个图很像是胶的问题。
已帮助
0人
0人
tinayuhgb
用户2．条带模糊或拖尾2-1．DNA上样量过多：减少凝胶中DNA上样量。2-2．DNA降解：避免核酸酶污染。2-3．DNA样品中含盐过高：电泳前通过乙醇沉淀去除过多的盐。2-4．DNA变性：电泳前不要加热，用20mMNaCl缓冲液稀释DNA。2-5．电泳缓冲液陈旧：电泳缓冲液多次用后，离子强度降低，pH值上升，缓冲能力减弱。建议经常更换。2-6．电泳条件不合适：电泳时电压不应超过20V/cm，温度＜30℃；巨大DNA链，温度＜15℃。2-7．蛋白污染：电泳前通过酚抽提去除蛋白。另外，是什么染料？
已帮助
0人
0人
misakidai
用户小心地滑94你稀释成1x的时候用的是纯水么？这个图很像是胶的问题。双蒸水是要用别的稀释嘛？
已帮助
0人
0人
misakidai
用户展开引用tinayuhgb2．条带模糊或拖尾2-1．DNA上样量过多：减少凝胶中DNA上样量。2-2．DNA降解：避免核酸酶污染。2-3．DNA样品中含盐过高：电泳前通过乙醇沉淀去除过多的盐。2-4．DNA变性：电泳前不要加热，用20mMNaCl缓冲液稀释DNA。2-5．电泳缓冲液陈旧：电泳缓冲液多次用后，离子强度降低，pH值上升，缓冲能力减弱。建议经常更换。2-6．电泳条件不合适：电泳时电压不应超过20V/cm，温度＜30℃；巨大DNA链，温度＜15℃。2-7．蛋白污染：电泳前通过酚抽提去除蛋白。另外，是什么染料？......染料是EB我是要减少酶量嘛？
已帮助
0人
0人
tinayuhgb
用户可以减少上样量试试
已帮助
0人
0人
misakidai
用户tinayuhgb可以减少上样量试试减少到三微升了但是结果也不是很好
已帮助
0人
0人
HXL赤砂之蝎
用户楼主你的目标条带是好多bp？你那个弥散的有可能只是引物形成的dimer
已帮助
0人
0人
咚一咚
用户换无阴影的loADIng，
已帮助
0人
0人
小飞飞飞机
用户我应该和你做的一样，都是用的琼脂糖配的胶，然后做的pcr，你这样的结果估计是过程有问题。下图是我做的
已帮助
0人
0人
misakidai
用户展开引用四季农田我应该和你做的一样，都是用的琼脂糖配的胶，然后做的pcr，你这样的结果估计是过程有问题。下图是我做的......所以你找到问题所在了嘛
已帮助
0人
0人
misakidai
用户HXL赤砂之蝎楼主你的目标条带是好多bp？你那个弥散的有可能只是引物形成的dimer应该就一个条带的之前做出来都没有这种情况用的东西都是一样的不知道到底是哪里的问题一次比一次弥散
已帮助
0人
0人
Agritinker
用户展开引用misakidai最近跑的琼脂糖电泳条带一直是模糊的，一直搞不清楚原因，请各位帮忙看一下，指出一下我的问题到底在哪里。谢谢大家了！！！这个是今天重新跑的还没拍照......怎么感觉是dna的问题，可能加多了..减少一点看看我以前遇到过变糊情况（没这么严重哈），师兄说可以减少dna，多了会糊一点点的..
▍
相关分类
▍
相关文章
▍
相关问答
