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NEB T4 RNA 连接酶2 截短型 2000U
来自 : mayitao

产品描述

特性

5预腺苷化的DNARNA连接到任何RNA3末端

将单链腺苷化引物连接至小RNA上,用于cDNA克隆文库构建

将单链腺苷化引物连接至RNA上,用于链特异cDNA文库构建

概述T4 RNA 连接酶2,截短型(T4RNL2 截短型)可特异性地将DNA  RNA  的预腺苷酰化5´末端连接到RNA3´ 末端。该酶连接时不需要ATP,但需要预腺苷酰化底物。T4RNL2 截短型的表达来自E.coli 质粒,该质粒编码T4RNA 连接酶2 基因的前 249 氨基酸。与全长的T4RNA 连接酶2不同,T4RNL2 截短型不能将底物的5´ 末端腺苷酰化,因此无法将RNA DNA 5´ 磷酸末端连接到RNA3´端(1-3)。该酶,即RNL21-249),可用于microRNA 克隆中接头连接的优化,因为此酶只能利用腺苷酰化的引物,因此,可以降低连接背景 4-6)。

来源携带T4RNA连接酶2截短型基因的重组E.coli 菌株。

反应条件1XT4RNA连接酶反应缓冲液[50mMTris-HCl(pH7.5@25)10mMMgCl21mMDTT]25温育。

随酶提供试剂10XT4RNA连接酶反应缓冲液

50%PEG8000

质保声明无单链和双链DNA核酸外切酶、核酸内切酶、RNase以及磷酸酶的污染。

单位定义200单位指10μl反应体系中,25条件下,1小时将80%31-merRNA连接到预腺苷化17-merDNA末端[通用miRNA克隆接头(NEB#S1315)]所需的酶量。

 

5´-FAM-   rArGrUrCrGrUrArGrCrCrUrUrUrArUrCrCrGrArGrArUrUrCrArGrCrArArUrA-3´

5´-rAppCTGTAGGCACCATCAAT–NH2-3´

浓度200,000units/ml

热失活65加热20分钟。

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