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High-Fect是一种高效的阳离子脂质体转染试剂,适用于多种细胞的DNA及siRNA的转染。对于大多数细胞系包括原代细胞都有较高的转染效率,并且对细胞毒性极低。本转染试剂可应用于瞬时转染、稳定转染、共转染、高通量DNA转染、siRNA转染,基因表达和基因功能研究。 查看更多>
高效、低毒性siRNA转染试剂,成功转染的细胞包括:A549, DU145, HEK293, HeLa, MCF7, MCF10a, hMSC, SKBR3, 786-O,ES-D3, ES-E14TG2a, H9C2, NIH/3T3, BxPC3, HeLa S3, HepG2, LNCap, MDA-MB453, A7R5, CHO K1, RAT2, 3T3L1, COS7, 143B, A-431, AU565, BT-474, Caco-2, H1155, H2122, hASMC, HBEC 查看更多>
基因转染需要一定的转染试剂将带有目的基因的载体运送到细胞内。目前,最常用的转染试剂是阳离子脂质体和阳离子聚合物,它们的特点和病毒类似,容易透过细胞膜。其中,阳离子脂质体在体外基因转染中有很高的效率,然而在体内,它迅速被血清清除,在肺组织内累积,诱发强烈的抗炎反应,这将导致高水平的毒性,因此,在很大程度上限制了其应用。由于阳离子脂质体的局限性,阳离子聚合物转染试剂日益受到重视。 查看更多>
北京英格恩生物科技有限公司在发布的Nature文章采用,最好用的DNA转染试剂H4000供应信息,浏览与Nature文章采用,最好用的DNA转染试剂H4000相关的产品或在搜索更多与Nature文章采用,最好用的DNA转染试剂H4000相关的内容。 查看更多>
2021-08-09
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高效、低毒性siRNA转染试剂,成功转染的细胞包括:LNCap, C2C12, 3T3 L1, A549, BxPC3, DU145, HeLa, HeLa S3, HT-1080, HT-29, MDA-MB453, hMSC, PC-3, SKBR3, H9C2, NIH/3T3, COS7, H2122, H2126, HCC193, HCT116, Primary Chondrocytes, Primary Fibroblasts, SK-OV-3, SW620, 3T3-Swiss, NIH/3 查看更多>
基因转染需要一定的转染试剂将带有目的基因的载体运送到细胞内。目前,最常用的转染试剂是阳离子脂质体和阳离子聚合物,它们的特点和病毒类似,容易透过细胞膜。其中,阳离子脂质体在体外基因转染中有很高的效率,然而在体内,它迅速被血清清除,在肺组织内累积,诱发强烈的抗炎反应,这将导致高水平的毒性,因此,在很大程度上限制了其应用。由于阳离子脂质体的局限性,阳离子聚合物转染试剂日益受到重视。 本试剂采用专利配方的阳离子聚合物为主要成分,可以与DNA形成稳定的复合物,保护DNA免受核酸酶的降解,在增加核酸稳定性的同时, 查看更多>
Westernblot 实验步骤 1. 组织块称重 2. 利用液氮、研钵粉碎组织块 3. 加入RIPA缓冲液(每克组织3 ml RIPA),PMSF(每克组织30μl,10 mg/ml PMSF),利用Polytron进一步匀浆(15,000转/分*1分钟)维持4℃ 4. 加入PMSF(每克组织30μl,10 mg/ 查看更多>
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不同的转染试剂有不同要求, 生物通小编个人经验是转染试剂细胞毒性高 的要求长满一些,细胞多一些,就算死伤惨重 也还能留下多些活口,嘿嘿,对于质粒转染来 说这并非评判转染试剂好坏的标准,毕竟只要 转进去就算OK 了,但是对于RNAi 实验来说 就不同了),将siRNA 和转染试剂混合物加 入共同温育一段时间,更换培养基,再培养 24-48 小时检测mRNA 含量等等。 创新的方法是反向转染。这种方法称为 everse tr ansfection 或者neofection,和传统 转染方法相比区别在于,传统方法需要提前一 天接种铺板,培养24 小时后等细胞到一定汇 合度再加转染复合物转染;而反向转染则是不 用预先接种细胞,先加入转染试剂和siRNA 混合物在培养板上共同温育,然后再加入细胞 铺板,培养。这个方法的好处不单是可以节约 一整天的时间,而且转染效率高。
Signagen转染试剂(transfectionreagent)
—DNA转染试剂Polyjet-适用于普遍的哺乳动物细胞

LipoD293-适用于悬浮细胞的转染(包括昆虫细胞SF9)-对于普遍的哺乳动物细胞具有更优异的转染效率

—DNAandsiRNA转染试剂
Lipojet-适用于大多数哺乳动物细胞的转染-低毒性(无需换液)-用量少-DNA/RNA共转染(co-transfection)-效果优于Lipofectamine2000
—siRNA转染试剂
GenMute-适用于大多数哺乳动物细胞转染-低毒性(无需换液)-用量少-DNA/siRNA共转染(co-transfection)PepMute-适用于普遍的哺乳动物细胞的转染

想用RNAiMAX或者lipo2000转染siRNA,但是看了下转染试剂的说明书和锐博的siRNA说明书,觉得分别对siRNA的用量描述差别挺大的呀,不知道到底该参考哪个呢。

以24孔板为例在siRNA说明书中写到,siRNA终浓度是50nM的话,加入浓度为20μM的siRNA1.25ul,每孔体积是500ul,那这样的话,每孔最终siRNA的量是25pmol。

但是在RNAiMAX或者是lipo2000说明书中,一个写的每孔siRNA用量是5pmol,一个是500ng,这与siRNA厂家所提供的量相差也太多了吧。

到底该看哪一个呢。

ps.一旦siRNA的量和体积确定下来之后,转染试剂的量和siRNA1:1的加就可以了吗?

请各位大神解答。


1.siRNA说明书中的用量,红线圈出

2.RNAIMAX说明书中siRNA的用量。

3.lipo2000说明书中siRNA用量


各位战友,我准备做MiRNA转染前列腺癌细胞,现在知道的转染试剂Lip2000,一种是英骏生物公司的,另外一种是赛默飞ThermoFisher),我不知道该选择哪一种转染效果好一点,有了解这方面的朋友请知道一下我,谢谢!

表面活性剂原理及应用 图文123
蚌硼遇淌╮2017-10-03
悬浮细胞NB4用哪种转染试剂比较好
DXY721认为:
悬浮细胞和贴壁细胞在转染过程中差别不大,主要差别在于转染后的筛选,当然如果你做的是瞬时转染就不存在筛选的问题了。
其实转染的过程很简单,问题是能不能转的进去的,转染率能有多少,转进去是否可以稳定表达目的蛋白等等。
我们也是用脂质体做悬浮细胞的转染,说明书上都有具体的操作过程,将脂质体和目的基因按比例混合,然后加到细胞悬液里就OK了,说的简单,实际上还是有一些细节要注意的,比如脂质体和目的基因混合的比例,转染的细胞数,细胞的代数,细胞的状态,有的还要求在转染的前一天传代一次,不过不要怕,这些在脂质体说明书上都有明确的说明,按照说明书做就可以了。
jinghuanlv认为:
悬浮细胞和贴壁细胞转染还是有很大不同的。
脂质体转染的原理基于电荷吸引原理,先形成脂质体-DNA复合物,散布在细胞周围,然后通过细胞的内吞作用,将目的基因导入细胞内,而脂质体复合物与贴壁细胞的接触机会比悬浮细胞高出很多倍,所以,脂质体转染时悬浮细胞的转染效率要明显低于贴壁细胞。
我们实验室转染悬浮细胞是用的电穿孔法,目前为止,悬浮细胞转染的最好方法还是电转,我们实验室用的电转仪是Bio-Rad的,使用条件是电压250V,电容975uF,效果不错,不妨一用。
试剂方面,大致下面三个组分。DNA转染试剂制备复合物需要的基础培养基或者150mM氯化钠溶液。

各位前辈好,小弟刚用罗氏的X-tremeGENEHPDNATransfectionReagent转染试剂转染了siRNA,发现出现了很多会动的小亮点,貌似是布朗运动,请问这是什么?

另外我看网上都说6小时换培养基,请问这个罗氏的也是一样的吗?如果需要换,可以加双抗吗?

谢谢各位帮助我的人了!!!

目前大多数的细胞转染实验会用到脂质体类的转染试剂,但是脂质体本身会参与细胞生理活动,引起基因表达的上调或下调。而这些作用就是脂质体造成细胞毒性的根本原因。这会对相关研究数据产生严重的干扰,甚至影响研究的结论。

由于脂质类转染试剂对细胞的毒性是由其脂质特性决定的,目前众多的研究者和生物公司将新一代转染试剂的开发聚焦在非脂质体的聚合物上,并已有一些优秀的试剂产品上市,如Engreen公司的Entranster系列转染试剂,为纳米材料,细胞毒性低,转染效率高,已逐渐取代脂质体试剂,成为各大实验室的新宠。

如何选择siRNA转染试剂 123
天宇熞攀62017-10-03
Dharmacon
推荐做一个小样转染验证试验(设定一下梯度),没有问题就正常使用。
对重复性要求不高的试验,一般没有问题的,只不过可能需要增加一些转染试剂用量了。

为了避免这个问题,推荐收到货之后,进行适当分装,用多少,拿出来多少最好。
RNA转染与甲状腺炎研究123
qingwudarao2021-07-20

EntransterTM-R4000是英格恩生物(EngreenBiosystem)最新研发合成的针对siRNA、microRNA、mimic、inhibitor、mRNA和shRNA等RNA的转染试剂。EntransterTM-R4000不仅可以转染小RNA,而且针对mRNA等长链RNA优化。由于纳米技术的应用,EntransterTM-R4000能做到高达90%的转染效率和60-90%的沉默效率,对难转染细胞和原代细胞也非常适用。

先附上一篇英格恩生物RNA转染试剂转染mir-346至Jurkat细胞研究甲状腺的文献,以供参考。



RNA转染试剂转染Mir-346至Jurkat细胞研究甲状腺.pdf(5947.72k)