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Altogen/bEnd-3 Transfection Reagent (Brain Endothelioma)/0.5 ml/6145
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Altogen/bEnd-3 Transfection Reagent (Brain Endothelioma)/0.5 ml/6145
品牌 / 
Altogen Biosystems
货号 / 
6145
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Transfection Reagent for bEnd.3 Cell Line (Brain Endothelioma Cells, CRL-2299)

  • A nanoparticle-based liposome formulation
  • Transfection protocols provided for transfection of proteins, DNA, mRNA, siRNA, shRNA and microRNA
  • Transfection Enhancer reagent provided with the kit
  • Produce higher level of recombinant protein expression with minimal disruption of normal cell function
  • Generate physiologically relevant data you can trust
  • Effective for plasmid DNA/siRNA co-transfection
  • Easy-to-use transfection protocol with reproducible results
  • Low cytotoxicity
  • Download in vitro bEnd3 transfection protocol: [PDF]
  • Download bEnd-3 CRISPR/Cas9 transfection protocol: [PDF]
  • Download PowerPoint presentation for bEnd3 cells transfection kit: [PPT]
  • Developed and manufactured by Altogen Biosystems

Transfection Efficiency:

Reagent exhibits at least 70% transfection efficiency of siRNA delivery. Transfection efficiency was determined by qRT-PCR.

Transfection Protocol and MSDS:

Download Altogen Biosystems Transfection Protocol: [PDF]

Download MSDS: [PDF]

bEnd.3 Cell Line:

Stroke is a life-threatening disease that affects arteries in the brain and can be caused by the blockage of the arteries by a blood clot, resulting in seizures. bEnd.3 is a brain endothelial cell line taken from a mouse’s (Mus musculus) brain/cerebral cortex. As endothelial cells, they make up the interior surface of blood vessels and lymphatic vessels, which circulate blood. These cells form the structure that not only helps carry nutrients to the brain but also removes waste. The bEnd.3 cell line is used in a variety of molecular and cell biology research. Study of this cell could be useful for medical research related to the flow of blood, providing a test subject for ways to treat clots and congestion, which can cause seizures and other serious health effects. Altogen Biosystems offers an advanced liposome formulation bEnd-3 transfection reagent kit that provides high transfection efficiency with bEnd-3 cells and is a helpful tool for biomedical research applications related to the flow of blood and blood flow obstruction.

Data:

bEnd3 Transfection Reagent

Figure 1. GAPD mRNA levels were quantified using real-time RT-PCR in the bEnd3 cells transfected with siRNAs targeting GAPD or non-silencing siRNA. Forty-eight hours post-transfection, the cells were harvested and analyzed by real-time RT-PCR for GAPD mRNA expression levels. Data were normalized against the 18S rRNA signal. Control samples were either mock-transfected or untreated. Values are normalized to untreated sample. Data are means ± SD (n=5).

bend3-cells-transfection-protocol

Figure 2. Protein expression of GAPDH in bEnd-3 cells. DNA plasmid expressing GAPDH or siRNA targeting GAPDH were transfected into bEnd-3 cells following Altogen Biosystems transfection protocol. At 72 hours post-transfection the cells were analyzed by Western Blot for protein expression levels (normalized by total protein, 10 µg of total protein loaded per each well). Untreated cells used as a negative control.

Selected in vivo transfection product citations (ALTOGEN® IN VIVO Transfection Kits used in the following publications):

  • Nature Biotechnology. 2011 29(4):341-5. Delivery of siRNA to the mouse brain by … Alvarez-Erviti et al [PDF]
  • Jounal of Biological Chemistry. 2012 287(4):2907. Chaperoning of mutant p53 protein … Gogna et al [PDF]
  • PLoS Pathogens. 2012 8(8) Uridine composition of the poly-U/UC tract of HCV RNA … Schnell et al [PDF]
  • J Proteome Res. 2012(11) Retinal proteome analysis in a mouse model of oxygen-induced … Kim et al [PDF]
  • J Transl Med. 2010 15;8:133. Prevention of hyperglycemia-induced myocardial apoptosis … Zhang et al [PDF]

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bEnd-3 Transfection Reagent

Altogen Biosystems:

Altogen Biosystems is a life sciences company that manufactures over 100 cell type specific and preoptimized transfection kits, electroporation buffers, and targeted in vivo delivery kits and reagents. Advanced formulation of reagents and optimized transfection protocols provide highly efficient intracellular delivery of biomolecules (proteins, DNA, mRNA, shRNA and siRNA, and small molecule compounds). Read more about transfection technology at Altogen’s Transfection Resource.

Altogen Research Services:

Altogen Labs provides GLP-compliant contract research studies for pre-clinical research, IND applications, and drug development. Biology CRO services include: Xenograft models (30+), development of stable cell lines, ELISA assay development, cell-based and tissue targeted RNAi studies, safety pharm/tox assays, and other studies (visit AltogenLabs.com).

Volume Options:

  • 0.5 ml (Catalog #6145)
  • 1.5 ml (Catalog #6146)
  • 1.5 ml CRISPR (Catalog #2113)
  • 8.0 ml (Catalog #6147)

AltogenBiosystems是一家开发和制造用于生命科学研究,药物发现和开发的转染试剂盒的生物技术公司。转染试剂盒针对特定癌细胞系和原代细胞培养进行了优化,可将生物分子有效递送到靶组织中。通过先进的试剂配方和优化的转染方案实现体外(癌细胞系)和体内(动物组织靶向试剂、癌细胞系)递送货物分子,包括质粒DNA,各种类型的RNA(mRNA,siRNA,shRNA,microRNA),蛋白质和小分子研究。 


Altogen生命科学公司致力于研发,生产和销售特定细胞系的转染试剂,用于细胞间生物分子的传递,并通过对转染试剂类型的设计将siRNA和质粒DNA有效地转入不同的细胞系和原代细胞内。Altogen公司开发的聚合物,脂质体,纳米粒子为基础的转染技术分别针对分子生物学,组合化学,和细胞生物学而分别应用。Altogen定制服务提供符合GLP要求定制研究服务,包括代稳定的细胞系,细胞银行和冷冻保存,焦磷酸测序,克隆,RNA干扰(RNAi)和基因沉默服务,发展分析,siRNA文库筛选,并转染服务。稳定的肿瘤细胞株和原代细胞的产生,可以是非常昂贵和费时。该公司的细胞培养科学家的细胞株的选择,无论是利息或shRNA表达载体的稳定表达的基因改造。标准的RNAi技术服务,包括设计与合成的siRNA的利益,验证siRNA的沉默效率,siRNA转染条件的优化,使高效的基因沉默细胞系或原代培养细胞的靶基因。转染培养细胞的瞬时或稳定的引入外源性分子和遗传物质(即RNA或DNA),通常是在生物实验室用来研究基因功能,基因表达的调节,生化映射,突变分析,和蛋白质的生产。科学家利用各种载体分子,这种分子,使质粒DNA(PDNA),信使RNA(mRNA),短干扰RNA(siRNA),小分子RNA(miRNA)的,并进入肿瘤细胞株和原代细胞的蛋白质的基因交付。不幸的是,无单提货的方法或转染试剂,可以适用于所有类型的细胞,细胞的细胞毒性和转染效率显着不同,取决于试剂,协议,并正在利用细胞类型。Altogen生物系统公司提供超过60种类型的细胞的预优化转染试剂盒。纳米粒子,脂质和聚合物基ALTOGEN®在体内转染试剂,使交付功能的RNA和DNA分子在体内。PEG脂质体在体内输送系统减少由于PEG修饰的先天免疫反应,并提供高效的siRNA转染的DNA,并在体内的蛋白质。由科学“杂志(2010年12月17日):PEG脂质体在体内转染试剂盒siRNA的特色Altogen生物系统功能的特定细胞系转染试剂盒


120+细胞转染试剂和活体组织靶向试剂盒制造商AltogenBiosystems是一家生物技术公司,开发和制造用于生命科学研究、药物发现和开发的转染试剂盒。Altogen®体内转染试剂可有效地将生物分子导入靶组织。细胞转染试剂盒针对特定的癌细胞系和原代细胞进行了优化。通过先进的试剂配方和优化的转染方案实现货物分子(DNA、RNA、蛋白质)的高效传递。AltogenBiosystems利用高分子化学、分子和细胞生物学的专业知识,开发了新的体内外给药技术。转染是将外源分子导入培养细胞中,常用于研究基因功能、基因表达调控、生化定位和蛋白质生产。不幸的是,由于细胞毒性和转染效率的差异很大,并且取决于所使用的试剂、方案和细胞类型,因此没有一种单一的传递方法或转染试剂可应用于所有类型的细胞。AltogenBiosystems为120多个癌细胞系和原代细胞类型提供优化的转染试剂盒和电穿孔产品。体内转染试剂可实现组织靶向给药。Altogen的转染试剂盒包括用于体外(癌细胞系)和体内(用于动物研究的组织靶向试剂)转染的转染增强剂试剂和转染复合物冷凝器。Altogen实验室提供符合GLP的实验室合同研究服务。我们的生物CRO服务包括异种移植物的疗效、IND应用的pharm/tox研究和安全性测试、分析开发(ELISA、IC-50、qPCR)、90多个异种移植物动物模型、RNAi和基因沉默服务。Altogen的细胞培养科学家通过在28天内培育出稳定的细胞系,将选择的细胞系转化为稳定表达感兴趣的基因。

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为siNRA和质粒共转染所优化的高效、超低毒性转染试剂DharmaFECT Duo是一种全新的可高效共转染siRNA和质粒的转染试剂。而上述DharmaFECT 1,2,3和4则仅是针对siRNA单独转染的优化产品。虽然共转染siRNA和质粒进行报告基因系统研究越来越普遍,但对应的能够高效共转染siRNA和质粒的转染试剂则很匮乏;大部分的研究者依然运用传统的质粒转染试剂进行siRNA转染或者siRNA和质粒的共同转染,但是这些试剂没有经过转染条件的优化,往往对细胞活力产生很大的毒副作用。基于此,Dharm 查看更多>
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786-o cell用什么转染试剂
内毒素是革兰氏阴性菌细胞壁(cellwall)上的特有成分,主要是脂多糖中的类脂A,在细菌被裂解时被释放出来,由于其化学结构和特性,在质粒的纯化过程中很容易混入质粒DNA一同提取出来。内毒素的存在会严重的影响质粒转染细胞的效率,此外会激活造血细胞(如B细胞、巨噬细胞等)的非特异免疫反应,造成实验的假阳性,所以转染级质粒的提取纯化必须去除内毒素。

我先开个头哈:

现今基因导入是生物技术实验的家常便饭,常用的方法无非是转染、病毒感染、电转这几种。

几乎所有做细胞转染的战友们都面临过这样的尴尬。

效率低,

效率低、

效率好低。(烦恼的事也要说三遍)

于是,我们就开始寻找各种各样的转染试剂,遂经蒸煮炸烤,百般试验,

运气好还能拣个宝,点儿背的那就一千个

为了广大细胞转染的战友,为了大家心中不再有那个“物种”,特开此贴,大家贡献一下资源、分享一下心得、或者吐槽一下心中的不忿,忘大家顶起,顶起,再顶起!!!


如题,PolyplusTransfection转染试剂在中国区的代理商有哪些?求推荐1-2个靠谱的,谢谢!

相关疾病:肿瘤癌症支气管哮喘EntransterTM-invivo是英格恩生物公司(EngreenBiosystemCo,...
请问您具体需要购买什么产品呢?麻烦详细描述一下,方便小v准确为您解答。

有战友对比过罗氏X-tremeGENEDNATransfectionReagent和lipofectamine3000的优劣吗?求解答

近期,上海公卫临床研究中心的一位研究生应用两种转染试剂Turbofecttransfectionreagent(Thermo)和EntransterTM-R4000(Engreen)进行了一次RNA转染比较。比较情况如下:

实验方法

转染试剂:Turbofecttransfectionreagent(Thermo)和EntransterTM-R4000(EngreenBiosystemCo,Ltd)

待处理细胞:humanCD8+T细胞

1.针对Turbofect转染的方法

每孔培养体积均为100μL,细胞数目在105左右。

取0.5μLagomir,加入9.5μL无血清RPMI1640,充分混匀;

取0.2μLTurbofecttransfectionreagent和agomir稀释液充分混合。

转染复合物制备完成;混匀后室温下孵育15-20分钟,直接取10μL加入已铺好细胞的孔中,继续培养24h收取细胞,用PBS洗涤3次以上,以备RNA抽提。

转染Mix的配制:100nMago/N.C.:(0.5μLagomir+0.2μLTurbofect+9.3μL无血清的RPMI1640)×2.5=1.25+0.5+23.25

2.EntransterTM-R4000转染

每孔培养体积均为100μL,细胞数目在105左右。

取0.5μLagomir,加入9.5μL无血清RPMI1640,充分混匀,制成10μLagomir稀释液;

取0.25μLEntransterTM-R4000,然后加入9.75μL无血清稀释液体,充分混匀,制成10μLEntransterTM-R4000稀释液;

将EntransterTM-R4000稀释液和agomir稀释液充分混合(可用振荡器或加样器吹吸10次以上),室温静置15分钟。

转染复合物制备完成;

将20μL转染复合物加入孔中的细胞悬液中,前后移动培养皿,混合均匀;

转染后6h观察细胞状态,并更换培养基,继续培养24h后收取细胞,用PBS洗涤3次以上,以备RNA抽提。

转染Mix的配制:100nMago/N.C.:(0.5μLagomir+9.5μL无血清的RPMI1640)×2.5=1.25+23.75;Etranster稀释液:(0.25μLEtranster+9.75μL无血清的RPMI1640)×5=1.25+48.75(室温静置5分钟),取20μL至ago和N.C.管中,室温静置15分钟。

实验结果

结论:从目的miRNA表达水平的检测结果来看,转染24h后,英格恩生物公司(EngreenBiosystem)的EntransterTM-R4000(ago/NC:422912倍)转染试剂的效果优于Turbofect转染试剂(ago/NC:285870倍)。

讨论:从实验结果来看,英格恩生物公司(EngreenBiosystem)的EntranstenTM-R4000(ago/NC:422912倍)转染试剂的效果优于Turbofect转染试剂(ago/NC:285870倍)。EntransterTM-R4000是英格恩生物(EngreenBiosystem)最新研发合成的针对siRNA、microRNA、mimic、inhibitor、mRNA和shRNA等RNA的转染试剂。EntransterTM-R4000不仅可以转染小RNA,而且针对mRNA等长链RNA优化。该试剂可将RNA导入多种细胞系,包括原代细胞和悬浮细胞。无论有无血清、抗生素存在均可获得很高的转染效率。


转染试剂和DNA室温孵育太久会影响转染效率么?求助啊~
试剂方面,大致下面三个组分。DNA转染试剂制备复合物需要的基础培养基或者150mM氯化钠溶液。
Elisa生物试验是一种敏感性高,特异性强,重复性好的实验诊断方法。
但是在选择的时候,也需要注意其他的一些问题。
1、采用何种原料和抗体,是否高效、灵敏、特异
2、规范包被操作,吸附是否均匀
3、重复性、可靠性
6、是否提供技术服务
7、适用于血浆、血清、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等多种类型的样本
8、可检测动物类型是否丰富
9、可检测指标是否齐全
elisa试剂盒就查下博欧特生物
使用方法:
1、 血清:操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血红细胞迅速小心地分离。
2、 血浆:EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。
3、 细胞上清液:1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4、 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟,取上清液。
5、 保存:如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
表面活性剂原理及应用 图文123
蚌硼遇淌╮2017-10-03
悬浮细胞NB4用哪种转染试剂比较好
DXY721认为:
悬浮细胞和贴壁细胞在转染过程中差别不大,主要差别在于转染后的筛选,当然如果你做的是瞬时转染就不存在筛选的问题了。
其实转染的过程很简单,问题是能不能转的进去的,转染率能有多少,转进去是否可以稳定表达目的蛋白等等。
我们也是用脂质体做悬浮细胞的转染,说明书上都有具体的操作过程,将脂质体和目的基因按比例混合,然后加到细胞悬液里就OK了,说的简单,实际上还是有一些细节要注意的,比如脂质体和目的基因混合的比例,转染的细胞数,细胞的代数,细胞的状态,有的还要求在转染的前一天传代一次,不过不要怕,这些在脂质体说明书上都有明确的说明,按照说明书做就可以了。
jinghuanlv认为:
悬浮细胞和贴壁细胞转染还是有很大不同的。
脂质体转染的原理基于电荷吸引原理,先形成脂质体-DNA复合物,散布在细胞周围,然后通过细胞的内吞作用,将目的基因导入细胞内,而脂质体复合物与贴壁细胞的接触机会比悬浮细胞高出很多倍,所以,脂质体转染时悬浮细胞的转染效率要明显低于贴壁细胞。
我们实验室转染悬浮细胞是用的电穿孔法,目前为止,悬浮细胞转染的最好方法还是电转,我们实验室用的电转仪是Bio-Rad的,使用条件是电压250V,电容975uF,效果不错,不妨一用。
洗板机的应用范围 123
小靥79532017-10-03
厂家推荐的体积,是维持ip2000 1uL + 培养基 50uL这个比例.这个只是个参考,或者起始比列. 在实际操作当中,你可以同时试一下增高,减小这个比例.看看哪个效果最好,以后就用你试的那个比例.