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zhongmindai
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你用什么构建cDNA文库?有些试剂盒是要用mRNA开始反转录的,如STRATAGEN的 入 ZAP Vector(我用过,不过把其中需要放射性的东西都去掉了,最后有>10~6 pfu),CLONTEC 的试剂盒好像可以直接用total RNA 做的,最后经过PCR扩增富集cDNA,可能用起来会比较方便,Invitrogen 的Gateway 技术在把目的片段接到别的载体里时比较好用。如果你用的试剂盒要求用mRNA的话,最好还是抽提一下mRNA,QIAGEN 的Oligotex用起来还好,有能直接从组织中抽提的,也有从totalRNA中抽提的,还有别的公司的那种用磁珠上面连oligo dT的方法的,可能更方便,不过要有专门的仪器,还有一些用纤维素连oligo dT的,但是效果不好。
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litianswau
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谢谢zhongmindai战友的指教,我用的是Clontech的SMART™CDNALibraryConstructionKits。zhongmindai战友,你觉得这些试剂盒中哪款最好?
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竹风999
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我也想知道怎样去除rR2NA,有何办法啊?**方法,谢谢!
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