本酵母电感受态细胞制备试剂是一种通过化学处理,高效快速制备酵母电感受态细胞,用于长期冻存以备后续转化的产品,它具有以下列特点
1.一次制备,-80度保存,多次使用。
2.操作简单,单溶液制备,除酵母培养的时间外,整个操作只需10分钟。
3.试剂盒含高效转换液,即开即用。
4.得到的感受态细胞的最高转换率在0.2-1X100000个转化子/ug质粒DNA。
5.适用于各种实验用酵母菌株,包括S.cerevisiae,C.aibicans,S.pombe,Pochia,pastoris等。也可用于携带有选择型质粒的酵母。
6.得到的感受态细胞可即刻转化各种线性或环状酵母穿梭质粒,例如YIP,YRP,YCP,YEP和YAC等,
7.可以用于定点突变(SITE—DirectMutagenesis),基因破坏(Gene Disruption),等位突变基因修复(Mutant Allele Recovery),酵母杂交系统等实验。
使用及效果
将一个酵母菌落接种到10ML的YPAD培养基中,30度摇晃培养直到OD600达到0.6-1.0,离心弃上清后再用5ML工作液(5ML溶液A+0.25ML溶液B,混匀后即得工作液)洗涤,再用0.2ML工作液将菌体重悬放-80度保存。