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Southern Blot原理及实验方法
来自 : 蚂蚁淘
实验方法原理互补的核苷酸序列通过Walson-Crick碱基配对形成稳定的杂合双链分子DNA分子的过程称为杂交。杂交过程是高度特异性的,可以根据所使用的探针已知序列进行特异性的靶序列检测。杂交的双方是所使用探针和要检测的核酸。该检测对象可以是克隆化的基因组DNA,也可以是细胞总DNA或总RNA。根据使用的方法被检测的核酸可以是提纯的,也可以在细胞内杂交,即细胞原位杂交。分子杂交是通过各种方法将核酸分子固定在固相支持物上,然后用放射性或非放射性标记的探针与被固定的模板杂交,经显影或现色后检测出目的DNA或RNA分子所处的位置。
实验材料
试剂、试剂盒
仪器、耗材
实验步骤
1. 基因组DNA限制性内切酶酶切
 
(1)设置50ul反应体系,在200ulEP管中加入:
 
10ug基因组DNAxul
去离子水49-xul
10×buffer5ul
EcoRⅠ4ul
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