方案18.3 细胞增殖的密度限制实验一细胞增殖的密度限制实验
| 实验方法原理 | 细胞在无限制培养基中培养，生长至包和密度。用放射自显影测定3H-胸腺嘧啶脱氧核苷标记细胞的百分比。 | ||||||||
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| 实验材料 | 传代用的细胞 试剂、试剂盒 | 生长培养基维持培养基D-PBSA胰蛋白酶 仪器、耗材 | 24孔培养板培养皿 实验步骤 | 一、材料
注意事项 | 1. 处理3H-胸腺嘧啶脱氧核苷必须十分小心，虽然它只能发射低能量的β射线，但它能掺入DNA，从而引起放射线损伤。因此操作时必须戴上手套，不要在垂直层流罩中操作H3-胸腺嘧啶脱氧核苷，而应在生物危害或细胞毒存物层流罩中操作，按照处理放射性同位素的德方法规处理废弃的液体和固体。 2. 将盖玻片转移至24孔培养板，进行胰蛋白酶处理，以利于进行放射自显影。细胞可在悬浮状态下进行固定，然后滴于载玻片上进行染色制备（见方案16.7，无需进行低渗处理），也可用甩片机将细胞离心至载玻片上（见方案16.4）或通过真空抽滤吸附到滤纸上（见方案16.5）。 |
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发布于 ： 2018-08-06
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