综述：白血病细胞的免疫分型
03
级交大教改班
史蔚
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白血病细胞的免疫分型
正常血细胞从多能干细胞分化、发育、成熟为功能细胞的过程中，细胞膜、细胞浆或胞核抗原的出现、
表达增多与减少甚至消失与血细胞的分化发育阶段密切相关，而且表现出与细胞系列及其分化程度相关的
特异性。因此，这些抗原的表达与否可作为鉴别和分类血细胞的基础。白血病是造血系统的恶性肿瘤，在
形态上变化虽相当大，但仍能表达正常血细胞所具有的抗原，因而仍可依据其抗原的表达谱对白血病进行
免疫分型。由于白血病细胞具有肿瘤细胞的特征，其抗原表达又不完全同于正常血细胞，常可出现某些抗
原缺乏、过度表达、系列交叉表达某一系列或阶段不应有的抗原，这又增加了白血病免疫分型的复杂性。
近年来白血病的免疫分型已成为诊断血液恶性肿瘤不可缺少的重要标准之一。国际上公认的通用的方
法是流式细胞术（
FCM
），此外还有免疫组化法，电镜和荧光显微镜也可以帮助诊断。其中流式细胞术（
F
CM
）和免疫组化法较为常用。
流式细胞术中，白血病免疫分型是利用荧光素标记的单克隆抗体（
McAb
）作分子探针，多参数分析白
血病细胞的细胞膜和细胞浆或细胞核的免疫表型，由此了解被测白血病细胞所属细胞系列及其分化程度。
因为
FCM
能快速，多参数，客观的定性又定量测定细胞膜，浆，核的抗原表达。另一个重要理由是至今尚
未发现白血病的特异抗原。所以能用正常血细胞的单抗来进行免疫分型是基于白血病形成的分化阻断学说
即白血病细胞基因异常，分化受阻于某阶段形成不同亚型的白血病。这群细胞充盈于骨髓。抗原表达与其
相应系列
/
阶段的血细胞无明显差异。与形态学检查相似仅能根据数量的差异来判断病变细胞的属性。单
参数免疫标志测定易将正常细胞包括在内。因此，近年来主张用设门（
gating
）方法。即用
CD45
与侧向
角（
sidescatter,SSC
），对数取样后可将骨髓细胞清晰地分出淋巴细胞，单核细胞，成熟粒细胞，幼稚
细胞和红细胞群，其理论依据是
CD45
是所有白细胞的抗原。其表达量在淋巴细胞最高，单核细胞，成熟
粒细胞，早期造血细胞（
blasts
）依次减弱。红细胞（中，晚幼红细胞，成熟红细胞）不表达
CD45
。
SSC
反映细胞的颗粒性，成熟粒细胞
SSC
最高，依次为单核细胞，淋巴细胞，
blasts
，红细胞。以
CD45/SSC
双参数，对数取样时即可把各细胞群区分出来。若同时加上一个，二个甚或三个荧光标记的单抗，则很容
易识别非正常细胞群所表达的抗原。这样可以排除正常细胞的干扰。在幼稚细胞％低的情况下或检测残存
白血病时尤为必要
。
FCM
分析白血病免疫表型时，测量细胞数量一般在
10000
～
50000
细胞之间，而且快
速、特异、准确，重复性好，能区分细胞起源、划分其分化发育阶段等，对白血病的诊断与分型、治疗方
案选择与预后判断、发病机理研究等有重要价值。
细胞免疫化学是细胞化学吸收了免疫学的理论和技术而发展起来的一门重要方法学
.
在现代医学领域
中被广泛应用
.
尤其在细胞学中该技术的应用是微观世界形态学研究从单一的形态学描述上升到结构、功
能和代谢为一体的动态观察。并可对细胞的属性、分化阶段和变异进行鉴别，有助于临床疾病的诊断。细
胞免疫标记技术的方法学建立至今仅为短短
30
年左右的时间，但其发展异常迅速，检测方法可多达
20
多
种以上。其基本原理是将组织和细胞作为抗原，与其相应的特异抗体产生抗原－抗体反应，并借助荧光色
素、酶、胶体金、铁蛋白等显示系统，在被测组织和细胞所相应的位置显示出来。由于抗原－抗体系统具
有高度的特异性和敏感性，能够将细胞形态学和功能代谢紧密的结合起来，进行观察和分析。免疫酶细胞
化学技术是将抗原－抗体反应的特异性与酶的高效，快速催化作用彼此结合，由此形成一种既具有免疫荧
光、放射免疫的优点，又避免了他们的缺点。这项技术的原理和操作与荧光法有许多相似之处，所不同的
是用酶来替代荧光素作为标志物，并采用底物被酶分解后的显色反应来显示抗原抗体的结合与否。
作为血液学中的细胞免疫组化染色，应该首选碱性磷酸酶
(AP)
显色系统。
因为在血液和骨髓细胞中
有一部分细胞含有非常丰富的内源性过氧化物酶，虽然在操作时可采取一些措施来抑制细胞内过氧化物
酶，但这种处理比较粗糙，往往不能完全抑制该细胞内源酶的活性
,
又可造成部分细胞表面抗原的破坏或
丢失。而对血液系统中许多恶性疾病的诊断，通常是检测其细胞表面的分化抗原。再则在血液和骨髓组织
中，还存在大量的成熟红细胞。其中的血红蛋白对本法也会产生强烈的干扰，
(
因血红蛋白具过氧化物酶
的功能
)
，可对被检标本的背景产生难以去除的非特异性染色。从而导致结果难以判断。
这里就以流式细胞术为主要研究方法对白血病细胞的免疫分型进行阐述。
骨髓血细胞是形态学分型的基础，
FCM
白血病免疫分型是对形态学分型的重要补充和进一步深化，国
际白血病
MIC
分型协作组认为免疫分型对每一例急性白血病都是必不可少的，对下列情况意义更大：
1
、
