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제품특징
□ 항생 물질 Antibiotics
Clontech 에서는 세포 배양 및 세균의 선택에 이용하는 여러가지 항생 물질을 갖추고 있습니다.Tet System 유도제:
● Anhydrotetracycline는 항생 작용을 전혀 없는 tetracycline 유도체입니다. 본 제품은 PRO Bacterial Expression System 및
다른 tetracycline 제어 유전자 발현계 사용에 최적입니다.
● Doxycycline(Dox)는 tetracycline의 유도체로, Tet System에 추천하는 항생 물질입니다. Dox는 tetracycline의 100분의 1의
농도로 사용할 수 있습니다.
선별용 항생 물질:
● G418는 neomycine 내성 유전자를 포함한 벡터로 transfect 한 안정 진핵cell line를 선택, 보관 유지할 때에 사용합니다.
● hygromycine B는E. colihygromycine 내성 유전자를 포함한 벡터로 transfect 한 박테리아 및 진핵세포에 대해서 사용합니다.
● puromycine은 puromycine N-acetyl-transferase를 발현하는 벡터로 형질 전환한 포유류 cell line에 사용합니다.
□ 보관
메뉴얼 및 COA 참조(항생제 종류에 따라 상이)
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2、可逆抑制剂:包括
a、竞争性抑制剂,抑制剂与底物竞争性结合酶反应中心,使Km增大,而Vmax不变 b、非竞争性抑制剂,酶与抑制剂结合后还能与底物结合,但活性降低,使Vmax减小,而Km不变
c、反竞争性抑制剂,酶只能与底物结合后才能与抑制剂结合,Vmax与Km都减小
可逆抑制剂可用透析等方法除去,使酶恢复作用
1、测定酶比活力:底物需要过量么?测定时间多长?是否可以加入过量的底物,然后测定3min吸光度的增加值,从吸光度的变化值计算比活力。
2、在酶抑制剂筛选的过程中,是否需要保证底物过量?还是要水浴一定时间让反应完全?我看到文献说用终浓度为0.1μmol/mL的底物,终浓度为45U/ml的酶,我想问,假设总体积为1ml,那么终浓度为45U/ml的酶岂不是每分钟能转化4.8μmol的底物?那么0.1μmol/mL的底物不就几秒钟就反应完了?那么怎么测定初速度?
1.对于抑制剂筛选工作(求ic50)是不是体系内酶与底物的量(底物应该是过量的)对实验结果影响不大。
2.如果要求算Km值,是不是需要知道反应产物的绝对量。反应时间文献上都是5分钟,反应速度就用反应产物量除以反应时间即可。
3.酶是进口分装的,规格5U,一次用不完,用PBS稀释后如何保存
谢谢
《血管紧张素转换酶抑制剂在心血管病中应用的中国专家共识》.PDF(242.69k)
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