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Theoretical MW
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Biomatik—供应生物试剂、免疫、基因、多肽/蛋白、抗体 Biomatik公司成立于2002年,致力于为全球科研工作者供应高质量的分子生物学、免疫学、药物研发等领域产品及服务。供应的产品囊括生物试剂,重组蛋白,ELISA试剂盒,定制基因、多肽及抗体等产品。此外,我们还提供完善的生物制品定制服务,包括基因、多肽/蛋白及抗体等。为研究人员提供zui优的产品和服务是我们赖以成功的保证,因此我们确保我们的产品与服务具有百分百的满意度保证。 Biomatik公司主要产品: 一、生物试剂系列产品:该系列产品含有360多款实验室常用的生化、酶类及PCR试剂,多款产品有不同的纯化级别(Biotechnology、 High Purity、 Ultra Pure、 Certifiable 、ACS 、USP等),这些产品备有存货,可尽快发货到实验室。 二、免疫检测产品系列:(ELISA /CLIA试剂盒):该产品系列包括7200多款ELISA /CLIA试剂盒,5300多款重组蛋白产品。 三、定制化合成基因:Biomatik在化学合成基因上有着丰富的经验,特别在长复杂基因合成上,可保证在zui短的时间内完成100%精确度的基因合成。 四、定制化多肽合成:Biomatik是高质量多肽合成领域中的佼佼者,所提供的合成产品纯度可从粗提至99%以上纯度(依据客户需要),合成量可从毫克到千克级。 五、定制化重组蛋白产品:Biomatik提供E.coli源重组蛋白产品,优质低价。未得到所要求蛋白全额退款。 六、定制抗体产品:Biomatik在定制抗体上执行着严酷的质量标准,所提供的单/多克隆产品定制服务可在两月内完成。
Biomatik公司于2002年在加拿大成立,是生物试剂一站式购物中心,提供7000多种ELISA试剂盒,5300多种重组蛋白,350多种生物试剂。 特色产品包括定制基因和多肽、以及PCR产品和酶。特色生化试剂包括三羟甲基氨基甲烷(Tris)、琼脂糖、白蛋白、核糖核酸酶A(RNase A0)\蛋白酶 A 和溶菌酶、半乳糖苷等。﹙网址:http://www.biomatik.com ) 日前,毕特博生物公司已成功取得Biomatik的授权和代理,Biomatik的各大产品均可在我司查询订购。 加拿大Biomatik成立于2002年,公司创建伊始就以为全世界的生命科学和药物研发工作者提供高质量的科研用品和服务为奋斗目标。 产品涵盖生化试剂、重组蛋白、ELISA试剂盒、基因定制和多肽合成及蛋白及抗体的定制生产等。 公司之所以能成功,因为我们始终把您的科研需要摆在第一位,为您独一无二的研究项目提供完美的产品和服务。 我们的长远目标是成为您科研道路上中可靠的合作伙伴。 Biomatik为您提供工业领先的创新产品和高效的客户服务。 公司在为您提供高质量的产品,满足您科研需要的同时,也为您节省研究经费,努力创造双赢的局面。 这为我们在业内带来持续不断的竞争力,成长和品牌认可,也是我们所推崇的高质量产品服务带来的回报。
ebiomall.com
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不知道发在这里合适不,实在是求助无门啊!版主手下留情。
百泰派克公司采用Thermo Fisher的Q ExactiveHF质谱平台,Orbitrap Fusion质谱平台,Orbitrap Fusion Lumos质谱平台结合Nano-LC,推出基于iTRAQ的定量蛋白组分析服务技术包裹,您只需要将您的实验目的告诉我们并将您的蛋白寄给我们,我们会负责项目后续所有事宜,包括蛋白酶切、肽段标价、肽段分离、质谱分析、质谱原始数据分析、生物信息学分析。
一、探针DNA标记方法
步骤 :
1.10ng~3ugDNA每管,双蒸水定量至总体积15ul
2.沸水水浴10分钟后迅速冰浴
3.加入 5号试剂 2ul , 6号试剂 2ul ,7号试剂 1ul
4.37度1小时~20小时
5.中止反应 加2ul 0.2M EDTA (pH 8.0) 和/或 65度 水浴 10分钟
二、标记效率检测
(一) 试剂配置
Solution Composition Preparation
Washing buffer 0.1 M Maleic acid, 0.15 M NaCl; pH 7.5 (20° C); 0.3% (v/v) Tween 20
Maleic acid buffer 0.1 M Maleic acid, 0.15 M NaCl; adjustwith NaOH (solid) to pH 7.5 (20° C)
Detection buffer 0.1 M Tris-HCl, 0.1 M NaCl, pH 9.5 (20° C)
TE-buffer 10 mM Tris-HCl, 1 mM EDTA, pH 8.0
Blocking stock solution Dissolve Blocking reagent (bottle 10) 10% (w/v) in Maleic
(10 × conc.) acid buffer underconstantly stirring on a heating block(65°C) or heat in a microwave oven,autoclave. The solution remains opaque
Blocking solution Prepare a 1 × working solution by dilutingthe 10 × Blocking solution 1:10in Maleic acid buffer.
Antibody solution Centrifuge Anti-Digoxigenin-AP(vial 8) for 5 min at 10 000 rpm in theoriginal vial prior to each use, and pipet the necessary amount carefully from thesurface. Dilute Anti-
Digoxigenin-AP 1: 5 000 (150 mU/ml) in Blocking solution.
Colorsubstrate Add 40 _l of NBT/BCIP (vial 9) to 2 ml of Detection buffer.
solution Note: Store protected from light!
(二)对照的标记DNA(4号试剂)系列稀释
(三)步骤
1、取以上制备的管2~9各1ul,以及自己标记的探针1ul,点到一小片尼龙膜
2、通过紫外线或者120度半小时使核酸交连到膜上
3、膜置塑料盒中加Maleic acid buffer 20ml ,15~25度轻摇孵育2分钟
4、10ml Blocking solution 孵育30分钟
5、10ml Antibody solution 孵育30分钟
6、10ml Washing buffer 洗2次,每次15分钟
7、10ml Detection buffer中平衡2~5分钟
8、膜在2ml新鲜配制的 Colorsubstrate solution 中避光孵育。显色期间避免摇动
9、中止反应 用TE-buffer或者双蒸水洗5分钟
蛋白酶K预处理
三、样品检测与杂交
(一) 步骤
1、 稀释供试品及阳性对照DNA,点膜
2、 通过紫外线或者120度半小时使核酸交连到膜上
3、 将标记好的探针稀释到约25ng/ml, 煮沸5分钟后迅速冰浴
4、膜放入预热好的预杂交液(3.5ml/100cm2)中,充分混匀,避免起泡
5、倒掉预杂交液,加入杂交液及已变性的探针。杂交温度下至少孵育6小时
四、洗膜
1、2 × SSC, 0.1% SDS , 15-25° C,洗膜2次,每次5分钟。
2、0.5× SSC, 0.1% SDS ,预热至65~68° C,洗膜2次,每次5分钟
五、结果检测
(一) 试剂配制
Solution Composition Preparation
Washing buffer 0.1 M Maleic acid, 0.15 M NaCl; pH 7.5 (20° C); 0.3% (v/v) Tween 20
Maleic acid buffer 0.1 M Maleic acid, 0.15 M NaCl; adjustwith NaOH (solid) to pH 7.5 (20° C)
Detection buffer 0.1 M Tris-HCl, 0.1 M NaCl, pH 9.5 (20° C)
TE-buffer 10 mM Tris-HCl, 1 mM EDTA, pH 8.0
Blocking stock solution Dissolve Blocking reagent (bottle 10) 10% (w/v) in Maleic
(10 × conc.) acid buffer underconstantly stirring on a heating block(65°C) or heat in a microwave oven,autoclave. The solution remains opaque
Blocking solution Prepare a 1 × working solution by dilutingthe 10 × Blocking solution1:10in Maleic acid buffer.
Antibody solution Centrifuge Anti-Digoxigenin-AP(vial 8) for 5 min at 10 000 rpm in theoriginal vial prior to each use, and pipet the necessary amount carefully from thesurface. Dilute Anti-
Digoxigenin-AP 1: 5 000 (150 mU/ml) in Blocking solution.
Colorsubstrate Add 40 _l of NBT/BCIP (vial 9) to 2 ml of Detection buffer.
solution Note: Store protected from light!
(二) 步骤
1、Washing buffer洗膜1~5分钟
2、100ml Blocking solution 孵育30分钟
3、20ml Antibody solution 孵育30分钟
4、100ml Washing buffer 洗2次,每次15分钟
5、20ml Detection buffer中平衡2~5分钟
6、膜在10ml新鲜配制的 Colorsubstrate solution 中避光孵育。显色期间摇动
7、中止反应 用TE-buffer或者双蒸水50ml洗5分钟展开
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