Overview | PrinterFriendlyVersion |
Ex/Em(nm) | 650/None |
MW | N/A |
CAS# | N/A |
Solvent | N/A |
Storage | F/D/L |
Category | SmallMoleculeDetection DiagnosticMolecules |
Related | CellMetabolism BiochemicalAssays |
1. PrepareserialdilutionsofAmmoniumChloride(0to1mM)solutions:
1.1 Add1μLof1.0MAmmoniumChlorideStandard(ComponentC)to999µLDPBStogenerate1.0mMstandard
ammoniumchloridesolution.
1.2 Take300μLof1.0mMstandardtoperform1:3serialdilutionstoget300,100,30,10,3,1,and0µMstandard
ammoniumchloridesolutions.
1.3 AddAmmoniumChlorideStandardsandammoniacontainingtestsamplesintoa96-wellclearbottommicroplateasdescribedinTables1and2.
Table1.Layoutofstandardsandtestsamplesinaclearbottom96-wellmicroplate:
BL | BL | TS | TS | …. | …. |
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AS1 | AS1 | …. | …. | …. | …. |
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AS2 | AS2 |
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AS3 | AS3 |
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AS4 | AS4 |
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AS5 | AS5 |
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AS6 | AS6 |
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AS7 | AS7 |
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Note:AS=AmmoniumChlorideStandards,BL=BlankControl,TS=TestSamples.
Table2.Reagentcompositionforeachwell:
AmmoniumChlorideStandard | BlankControl | TestSample |
Serialdilutions*:50μL | DPBS:50μL | 50μL |
*Note:Addtheseriallydilutedammoniumchloridestandardsfrom1to1000µMintowellsfromAS1toAS7induplicate.
2. RunAmmoniumChlorideAssay:
2.1 Add50μLofAssayBufferI(ComponentA)toeachwelloftheAmmoniumChlorideStandard,blankcontrol,andtestsamples(seeStep1.3)sothatthetotalassayvolumeis100µL/well.
Note:Fora384-wellplate,add25μLsample,25μLofAssayBufferIperwell.
2.2 Incubatethereactionfor5minutesatroomtemperature.
2.3 Add50μLofAssayBufferII(ComponentB)toeachwellsothatthetotalassayvolumeis150µL/well.
Note:Fora384-wellplate,add25μLAssayBufferII(ComponentB)toeachwell.
2.4 Incubateatroomtemperaturefor30-60minutes,andmonitortheabsorbanceincreaseat660-670nmusinganabsorbancemicroplatereader.
Note:ThecolorturnstoyellowafterAssayBufferII(ComponentB)isadded,andthewellswithAmmoniumChlorideStandardorsampleswillshowbluishgreencolorafterincubation.Theintensityofthecolorwillreachthemaximumin30-60minutes.
References&Citations | PrinterFriendlyVersion |
1. LohTP,TanKM,ChewS,ChanDS.(2013)Highpleuralammonianegativelyinterfereswiththemeasurementofadenosinedeaminaseactivity.BMJCaseRep,2013.
2. BakLK,WaagepetersenHS,SorensenM,OttP,VilstrupH,KeidingS,SchousboeA.(2013)Roleofbranchedchainaminoacidsincerebralammoniahomeostasisrelatedtohepaticencephalopathy.MetabBrainDis.
3. TranahTH,VijayGK,RyanJM,ShawcrossDL.(2013)Systemicinflammationandammoniainhepaticencephalopathy.MetabBrainDis,28,1.
4. HenryRP,LucuC,OnkenH,WeihrauchD.(2012)Multiplefunctionsofthecrustaceangill:osmotic/ionicregulation,acid-basebalance,ammoniaexcretion,andbioaccumulationoftoxicmetals.FrontPhysiol,3,431.
5. RothmanDL,DeFeyterHM,MaciejewskiPK,BeharKL.(2012)Isthereinvivoevidenceforaminoacidshuttlescarryingammoniafromneuronstoastrocytes?NeuRochemRes,37,2597.
6. StahlDA,delaTorreJR.(2012)Physiologyanddiversityofammonia-oxidizingarchaea.AnnuRevMicrobiol,66,83.
7. ShenJP,ZhangLM,DiHJ,HeJZ.(2012)Areviewofammonia-oxidizingbacteriaandarchaeainChinesesoils.FrontMicrobiol,3,296.
8. WrightPA,WoodCM.(2012)Seventhingsfishknowaboutammoniaandwedon"t.RespirPhysiolNeurobiol,184,231.
9. RoseCF.(2012)Ammonia-loweringstrategiesforthetreatmentofhepaticencephalopathy.ClinPharmacolTher,92,321.
10. deVilliersM,PuthanVeetilV,RajH,deVilliersJ,PoelarendsGJ.(2012)Catalyticmechanismsandbiocatalyticapplicationsofaspartateandmethylaspartateammonialyases.ACSChemBiol,7,1618.
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1.步骤简单,45分钟内完成测定,比经典Lowry法快4倍而且更加方便。
2.灵敏度高,检测浓度下限达到25μg/ml,最小检测蛋白量达到0.5μg,待测样品体积为1-20μl 。
3.BCA法测定蛋白浓度不受绝大部分样品中的去污剂等化学物质的影响,可以兼容样品中高达5%的SDS,5%的Triton X-100,5%的Tween 20,60,80。
4.在20-2000μg/ml浓度范围内有良好的线性关系。
5.检测不同蛋白质分子的变异系数远小于考马斯亮蓝法蛋白定量。
1.模板提取(一般为RNA):Trizol、氯仿、异丙醇、无水乙醇、DEPC处理水
2.模板浓度测定:分光光度计或NanoDrop
3.逆转录:逆转录试剂盒(或者一步法试剂盒),这一步可以用普通PCR做,也可以用水域做。
4.荧光定量PCR试剂:通常有用SYBR Green Mix做的,但是这里建议你用EvaGreen做,灵敏度和平行性都要好于SYBR Green,并且如果你那是ABI或者Stratagene的PCR如果用SYBR Green还需要加一步Rox很麻烦。
5.其他:除了以上的那些还需要离心管、PCR管或板(Axygen反应比较好)、移液枪等,暂时就想到这么多。
谢谢谢
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