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病理学服务:原位末端凋亡法(Tunel)实验技术服务
来自 : mayitao
地区:北京/全国
简介:经过生物素标记和后续的DAB显色等步骤,即可在普通光学显微镜下观察到凋亡细胞
提供商:北京亿鸣复兴生物科技有限公司
服务名称:TUNEL细胞凋亡检测
TUNEL细胞凋亡检测(TUNELApoptosisAssay)是一种高灵敏度又快速简便的细胞凋亡检测方法。对于待检测的细胞或组织样品,经过生物素标记和后续的DAB显色等步骤,即可在普通光学显微镜下观察到凋亡细胞。细胞在发生凋亡时,会激活一些DNA内切酶,这些内切酶会切断核小体间的基因组DNA。细胞凋亡时抽提DNA进行电泳检测,可以发现180-200bp的DNAladder。
基因组DNA断裂时,暴露的3-OH可以在末端脱氧核苷酸转移酶(TdT)的催化下加上生物素(Biotin)标记的dUTP(Biotin-dUTP),随后和辣根过氧化物酶(HRP)标记的Streptavidin(Streptavidin-HRP)结合,最后在HRP的催化下通过DAB显色来显示凋亡细胞,从而可以通过普通光学显微镜检测到凋亡的细胞。
服务内容
  1. 组织切片/细胞爬片
  2. 常规TUNEL检测
  3. 荧光TUNEL试剂盒检测
  4. 数据整理及结果分析
  5. 根据客户需要对细胞核进行荧光染色
客户须知:
  1. 由客户提供荧光TUNEL检测试剂盒
  2. 本公司保证数据的客观性、准确性,但不保证与客户预期吻合
服务价格及周期:
服务项目服务内容 价格
组织切片常规切片20元/片
常规TUNELDAB显色法TUNEL检测,成像分析350元/样本
荧光TUNEL使用荧光TUNEL检测试剂盒,荧光成像分析280元/样本
数据分析成像分析及数据统计套餐内(免费)
 
交货时间:15~20天 
提供结果:
  1. 成像图片(或按客户需要排列图片,达到可直接发表水平)
  2. 实验详细流程
  3. 原始数据
  4. 标记后(处理后)的样本
样本要求:
  1. 悬浮生长培养细胞的甩片或涂片
  2. 贴壁生长的培养细胞 
  3. 冰冻切片 
  4. 常规石蜡切片 
取材保持组织新鲜(组织块以小于2cm×1.5cm×0.3cm为宜),立即放入固定液(固定液用10%福尔马林液或4%多聚甲醛缓冲液,体积为组织块的10倍以上)中,避免干燥;对于有血迹的样本,可用PBS液或生理盐水冲洗后直接放入固定液中;经固定后的样本必须在48小时内处理。
注意事项:
  1. 结果分析时注意:在坏死的晚期阶段或在高度增殖/代谢的组织细胞中可产生大量DNA片断,从而引起假阳性结果;而有些类型的凋亡性细胞死亡缺乏DNA断裂或DNA裂解不完全,以及细胞外的矩阵成分阻止TdT进入胞内反应,进而产生假阴性结果。
  2. 初次检测细胞凋亡,最好设置阳性对照片。血细胞含量高的组织,尽可能延长过氧化氢的灭活时间。苏木素的复染时间需要摸索。
  3. 每片所加试剂可调整,一般30~100ul不等,但也要防止液体挥发而干片,且反应均在放置湿盒内。


有需要细胞凋亡检测服务的老师请联系 印磊
手  机:17610828357
Q  Q:497335684
座  机:010-62895234
邮  箱:quling@esyan.cn
网  站:http://www.ymbio.com
 


 

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