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【求助】重组腺病毒的纯化
2021-07-20
问题描述:

现经过293细胞包装已经扩增出重组腺病毒,想通过离心的方法将其提纯,不知道具体该怎么做,实验条件如何控制,请大家指教。

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wang_xiaoxiao
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吉泰公司有腺病毒纯化试剂盒,你可以查一查
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chromatography
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先过离子交换,再上凝胶柱子就可以.
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zqw
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你直接取病毒液提DNA,然后做PCR就可以了,PCR条件取决于你的引物了。应该很简单的,TRY.
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徐伯舟
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AAV的纯化1)向病毒浓缩液中添加固体CsCl直到密度为1.41g/ml(折射率为1.372);2)将样品加入到超速离心管中,用预先配好的1.41g/mlCsCl溶液将离心管剩余空间填满;3)在175,000g下离心24小时,以形成密度梯度。按顺序分步收集不同密度的样品,取样进行滴度测定。收集富集有AAV颗粒的组分;4)重复上述过程一次。5)将病毒装入100kDa的透析袋,4度透析脱盐过夜。此即为纯化的AAV病毒下面这个网址上有具体的资料http://www.hanbio.net/cn/articles/item/300
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