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Phenol/Chloroform Precipitation of DNA

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Phenol/ChloroformPrecipitationofDNA

1.Addanequalvolume(equaltosamplevolume)ofP/Ctosample.2.Mix(shake,don"tvortex).3.Takeaqueous(upper)layer.(Ifdirtysample,repeatPh/Chlstepuntilinterfaceisfairlyclean).4.Addequalvolumechloroform,mix(shake,don"tvortex).5.Spin3min.6.Takeaqueous(upper)layer.(Optional:repeatChloroformsteps).7.Add1/10volume3MNaOAc(->0.3M),mix(shake).8.Add2volumesice-coldEtOH(100%),mix(shake).9.Incubateonicefor15to30minutes.(Canstoreoniceorat-20°ree;Catthisstep).10.Spin10minutes,4°ree;C.11.Removesupernatant,beingcarefulnottodisturbpellet(DNA).12.Half-filltubewith70%EtOH,spinatleast2minutesat4°ree;C.(Opt:Re-rinseandspinagain).13.Pipetoffthesup,carefulnottotouchpellet.14.Air-dry(~1hour).15.Redissolvein10mMTris.

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发布于： 2018-12-26 阅读（127）

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