介 绍 RT007AMV逆转录酶分离自禽类成髓细胞瘤病毒(AMV)，其方法由Houts等人的方法改进而来。分离得到的酶是分子量为157KD的αβ全酶。本酶经高度纯化，完全无核酸酶污染。本酶可用于cDNA合成，也可用于RNA和DNA的双脱氧测序。RT007AMV逆转录酶以总RNA或polyA+RNA为模板，具有以RNA为模板的DNA聚合酶活性，DNA为模板的DNA聚合酶活性和RNaseH酶活性，最适反应温度在42-55℃，最高可达60℃，如果使用焦***酸钠，最适温度为37-41℃。专利配方的RT反应缓冲液根据不同用途可以作为5X或10X反应液使用（详见标准使用方法），同时可抑制RNaseH酶活性。按照标准使用方法可以得到长至10-12kbcDNA。RT007AMV逆转录酶比普通AMV逆转录酶和MMLV逆转录酶能耐受更高的温度和合成更长的cDNA。AMV逆转录酶与MMLV逆转录酶比较
酶 属性 | RT007AMV | 普通MMLV | RNaseH-MMLV |
反应温度 | 42-60℃ | 37-42℃ | 42-50℃ |
产物长度 | 10-12kb | 3-5kb | 6-8kb |
来源 | 禽源，全酶 | 鼠源 | 克隆表达 |
反应效率 | 5U/reaction | 200U/reaction | 200U/reaction |
RNaseH活性 | 弱，且被抑制 | 强 | 弱 |
灵敏度 | 高 | 低 | 高 |
价格 | 低 | 低 | 高 |
特 点1.高灵敏度2.高得率3.高达60℃的反应温度可有效打开RNA二级结构4.可合成长至10-12kb的cDNA5.专利配方RT反应液可适用不同用途
应 用①1μgHelatotalRNA在42℃，50℃，55℃，60℃经RT007AMV酶逆转录后进行PCR的产物电泳结果
②1μgHelatotalRNA经RT007AMV酶逆转录后扩增不同长度PCR产物的电泳结果，AMV酶可以转录长至9.6kb的mRNA
③1μgHelatotalRNA经以下各种逆转录酶逆转录后(按照各自Protocol)进行PCR的产物电泳结果
④1μgHelatotalRNA经以下各种逆转录酶逆转录后(按照各自Protocol)进行荧光PCR（SYBRGreenI）的结果，以下数值是Ct值
订购信息
Cat# | 产品名称 | 规格 | 价格 | 资料下载 | 备注 |
BSA01S2 | RT007AMV逆转录酶 | 200U | ￥300 | 说明书 | -15℃～-25℃保存 |
BSA01M2 | RT007AMV逆转录酶 | 1000U | ￥1300 | 说明书 | -15℃～-25℃保存 |
参考文献1.Houts,G.E.,Miyagi,M.,Ellis,C.,Beard,D.,andBeard,J.W.(1979)J.Virol.29(2):517-522.2.GuidetoMolecularCloningTechniques.MethodsinEnzymology,Volume152.pp316-325.EditedbyShelbyBergerandAlanR.Kimmel.AcademicPress,Inc.3.Divergentexpressionofalpha1-proteaseinhibitorgenesinmouseandhuman.NucleicAcidsRes.1998,26:3794-3799.4.Bulgedresiduespromotetheprogressionofaloop–loopinteractiontoastableandinhibitoryantisense–targetRNAcomplex.NucleicAcidsRes.2001,29:3145-3153.5.HIV-1inducesphenotypicandfunctionalperturbationsofBcellsinchronicallyinfectedindividuals.PNAS2001,98:10362-10367.6.Characterizationofexpression,andcloning,of?-D-xylosidaseandα-L-arabinofuranosidaseindevelopingandripeningtomato(LycopersiconesculentumMill.)fruit.J.Exp.Bot.2003,54:2615-2622.7.Secondarystructuremodelsofthe3untranslatedregionsofdiverseR2RNAs.RNA2004,10:978-987.8.RapidDiagnosticMethodforDetectionofMumpsVirusGenomebyLoop-MediatedIsothermalAmplification.J.Clin.Microbiol.2005,43:1625-1631.9.PolymerizationandRNaseHactivitiesofthereversetranscriptasesfromavianmyeloblastosis,humanimmunodeficiency,andMoloneymurineleukemiavirusesarefunctionallyuncoupled.JBiolChem.1991;266(12):7423-31.10.EnzymaticactivitiesassociatedwithavianandmurineretroviralDNApolymerases.Catalysisofandactivesiteinvolvementinpyrophosphateexchangeandpyrophosphorolysisreactions.JBiolChem.1980;255(5):2000-4
