pECMV-Ephb4-m-FLAG现货供应。质粒宿主：大肠杆菌、哺乳细胞、酵母菌、乳酸菌等质粒用途：基因模板片段类型：cDNA片段物种：小鼠原核抗性：Amp载体序列：GACGGATCGGGAGATCTCCCGATCCCCTATGGTGCACTCTCAGTACAATCTGCTCTGATGCCGCATAGTTAAGCCAGTATCTGCTCCCTGCTTGTGTGTTGGAGGTCGCTGAGTAGTGCGCGAGCAAAATTTAAGCTACAACAAGGCAAGGCTTGACCGACAATTGCATGAAGAATCTGCTTAGGGTTAGGCGTTTTGCGCTGCTTCGCGATGTACGGGCCAGATATACGCGTTGACATTGATTATTGACTAGTTATTAATAGTAATCAATTACGGGGTCATTAGTTCATAGCCCATATATGGAGTTCCGCGTTACATAACTTACGGTAAATGGCCCGCCTGGCTGACCGCCCAACGACCCCCGCCCATTGACGTCAATAATGACGTATGTTCCCATAGTAACGCCAATAGGGACTTTCCATTGACGTCAATGGGTGGAGTATTTACGGTAAACTGCCCACTTGGCAGTACATCAAGTGTATCATATGCCAAGTACGCCCCCTATTGACGTCAATGACGGTAAATGGCCCGCCTGGCATTATGCCCAGTACATGACCTTATGGGACTTTCCTACTTGGCAGTACATCTACGTATTAGTCATCGCTATTACCATGGTGATGCGGTTTTGGCAGTACATCAATGGGCGTGGATAGCGGTTTGACTCACGGGGATTTCCAAGTCTCCACCCCATTGACGTCAATGGGAGTTTGTTTTGGCACCAAAATCAACGGGACTTTCCAAAATGTCGTAACAACTCCGCCCCATTGACGCAAATGGGCGGTAGGCGTGTACGGTGGGAGGTCTATATAAGCAGAGCTCTCTGGCTAACTAGAGAACCCACTGCTTACTGGCTTATCGAAATTAATACGACTCACTATAGGGAGACCCAAGCTGGCTAGTTAAGCTTGGTACCGAGCTCGGATCCACTAGTCCAGTGTGGTGGAATTCTGCAGATATCCAGCACAGTGGCGGCCGCTCGAGTCTAGAGGGCCCTTCGACTACAAAGACCATGACGGTGATTATAAAGATCATGACATCGACTACAAGGATGACGATGACAAGTGAGTTTAAACCCGCTGATCAGCCTCGACTGTGCCTTCTAGTTGCCAGCCATCTGTTGTTTGCCCCTCCCCCGTGCCTTCCTTGACCCTGGAAGGTGCCACTCCCACTGTCCTTTCCTAATAAAATGAGGAAATTGC质粒图谱：上海圻明生物科技有限公司供应蛋白，多克隆抗体，单克隆抗体，重组蛋白等几万种，gibco血清大量现货、澳洲胎牛血清10099-141C、YMC-Pack ODS-A色谱柱 AA12S05-2546WT(4.6nm×250nm, 5μm)等大量现货供应。公司主营胎牛血清，新生牛血清，成牛血清，马血清、驴血清、猪血清、山羊血清、绵羊血清、兔血清、鸡血清、大鼠血清、小鼠血清、豚鼠血清，及牛血清白蛋白系列产品。化学试剂：氨基酸，蛋白质，抗生素，碳水化合物，酶，维生素，色素，缓冲剂，葡聚糖凝胶系列，透析袋等。标准品：植物提取产品数量多达2000多种，品类齐全。纯度高，质量，可提供图谱资料。黄曲m素标品。感受态细胞：克隆感受态细胞、表达感受态细胞、根瘤农杆菌感受态细胞、发根农杆菌感受态细胞、酵母感受态细胞、大肠杆菌质粒等。elisa试剂盒：种属涵盖大鼠小鼠，人，兔，牛，鸡，犬等。提供免费代测。所有产品仅供科研，不用于临床。

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BM0402 EHA101感受态细胞

BM0403 EHA101电转感受态细胞

BM0404 GV3101(pSoup)感受态细胞

BM0405 GV3101(pSoup)电转感受态细胞

BM0406 GV3101(pSoup-p19)感受态细胞

BM0407 GV3101(pSoup-p19)电转感受态细胞

BM0408 EHA105(pSoup)感受态细胞

BM0409 AGL1(pSoup)感受态细胞

BM0410 GV3101（pJIC SA_Rep）感受态细胞

BM0411 Ar A4感受态细胞

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BM0413 Ar Qual感受态细胞

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BM0415 MSU440感受态细胞

BM0416 MSU440电转感受态细胞

BM0417 C58C1感受态细胞

BM0418 Ar 1193感受态细胞

BM0419 K599感受态细胞

BM0420 ATCC15834电转感受态细胞

BM0421 Y1HGold感受态细胞

BM0422 Y2HGold感受态细胞

BM0423 Y187感受态细胞

BM0424 AH109感受态细胞

BM0425 EGY48感受态细胞

BM0426 NMY51感受态细胞

BM0427 INVSc1感受态细胞

BM0428 BY4741感受态细胞

BM0429 Y190感受态细胞

Y190感受态细胞产品说明

基因型

MATa, ura3-52, his3-200, ade2-101, lys2-801, trp1-901, leu2-3, 112, gal4Δ, gal80Δ, cyhr2, LYS2 : : GAL1

UAS-HIS3TATA-HIS3, MEL1 URA3 : : GAL1UAS-GAL1TATA-lacZ

● 产品说明

Y190 菌株是 Clontech 公司开发的 GAL4 系统酵母双杂实验用菌株，MATa 型，可直接转化质粒或与 MATα 型酵母菌株 Y187通过 mating 操作进行蛋白互作验证或筛库试验。Transformation marker 为：trp1，leu2，cyh2；报告基因为：lacZ，HIS3，MEL1。Y190-GAL4 酵母双杂系统需要两种质粒配套使用：(pGB 和 pACT2)或（pGBKT7 和 pGADT7）。质粒 pGB 由 pGBKT7改造而来，筛选标志为 TRP1，用于表达 DNA-BD(来自酵母转录因子 GAL4N 端 1~ 174 位氨基酸)与目标蛋白(Bait)的融合蛋白；质粒 ACT2 与 pGADT7 的结构和功能类似，筛选标志为 LEU，用于表达 AD(GAL4 C 端 768~881 位氨基酸)与目标蛋白(Prey)的融合蛋白。GAL4 系统原理：一个完整的酵母转录因子 AL4 可分为功能上相互独立的两个结构域：位于 N 端 1~174位氨基酸区段的 DNA 结合域 (DNA-BD)和位于 C 端 768~881 位氨基酸区段的转录激活域(AD)。DNA-BD 能够识别 GAL4-responsive gene 的上游激活序列 UAS，并与之结合。而 AD 可以启动 UAS 下游的基因进行转录。BD 和 AD 单独存在不能激活转录，但当二者接近时，则呈现完整的 GAL4 活性，使含有 UAS 的启动子下游基因转录表达。正常条件下，BD 不与 AD 结合，将要检测的蛋白质分别与 BD 和 AD 融合，形成 bait 融合蛋白(bait –BD)和 prey 融合蛋白 (prey-AD)，如果 bait 和 prey发生相互作用，就会促使 BD 和 AD 的相互接近，形成完整的 GAL4，从而激活报告基因的转录。Y190 感受态细胞经特殊工艺制作，-80℃可保存三个月，pGADT7 质粒检测转化效率 104 cfu/μg DNA。

● 操作方法

1. Carrier DNA 在每次使用前要通过加热处理使其变性为单链状态，步骤如下：Carrier DNA 放 95℃水浴或金属浴 3 min，快速插入冰中，静置 3 min，再次放 95℃水浴或金属浴 3 min，快速插入冰中，静置 3 min 以上。

2. 取 100 µl 冰上融化的 Y190 感受态细胞，依次加入预冷的目的质粒 0.5-3 µg，Carrier DNA10 µl，PEG/LiAc 500 µl 并吸打几次混匀，30℃水浴 30 min (15 min 时翻转 6-8 次混匀)。

3. 将管放 42℃水浴 15 min (7.5 min 时翻转 6-8 次混匀)。

4. 5000 rpm 离心 40 s 弃上清，ddH2O 400 µl 重悬，离心 30s 弃上清。

5. ddH2O 50 µl 重悬，涂板，29℃培养 48-96 h。