关键词:酵母双(单)杂交cDNA文库构建技术服务|实验技术服务
简介：世界品牌酵母双(单)杂交cDNA文库构建技术服务|实验技术服务原装，质量保证,价格优惠。
酵母双(单)杂交cDNA文库构建技术服务|实验技术服务pCzn1质粒+ArcticExpress宿主菌低温表达体系。
我们具备丰富的蛋白表达设计经验及实验操作技巧，承诺客户不成功不收费。我们所有的实验数据真实可信，我们提供原始的表达菌株和克隆质粒，客户可以依据我们的实验报告重复我们的实验结果。
产品品牌：酵母双(单)杂交cDNA文库构建技术服务|实验技术服务http://www.shi极china。。ｃｏｍ/goodsid/fenleiyi/2868603/1.html
测序实验流程：
原理
酵母双杂交技术产生以来，它主要应用在以下几方面：(1）检验一对功能已知蛋白间的相互作用。(2）研究一对蛋白间发生相互作用所必需的结构域。(3)用已知功能的蛋白基因筛选双杂交cDNA文库，以研究蛋白质之间相互作用的传递途径。(4)分析新基因的生物学功能，即以功能未知的新基因去筛选文库。
ProQuest系统依靠报告基因的转录激活来鉴定蛋白相互作用。将一个基因克隆到\'诱饵\'载体，pDEST32，并和GAL4蛋白的DNA结合域（DBD）表达为融合蛋白。将第二个基因或者编码可能的相互作用子蛋白的cDNA文库克隆到\'猎物\'载体，pDEST22，同GAL4的转录激活域（AD）表达为融合蛋白。当两个蛋白相互作用时，AD和DBD间距离被拉近，从而激活报告基因的表达
服务流程
1)提取总RNA，分离mRNA，反转录cDNA。
2)将cDNA与pDONR222载体进行BP重组反应，重组产物转化DH10B感受态细胞。
3)甘油保存大肠杆菌文库。
4)提取大肠杆菌文库质粒DNA，制备酵母感受态细胞
5)大肠杆菌文库质粒DNA转化酵母菌，测定转化效率，
6)收集酵母转化子，测定文库效价。
7)甘油保存酵母菌文库。
使用优点：在拥有相关组织基因文库的情况下
1）可以用来比对病变组织更快的找到突变基因或者导致变异的蛋白，更快的找到攻克方向。
2）可以用作大规模的蛋白筛选，在较短时间内对找到某些药物对相关组织主要的作用蛋白，对于药物的修饰和改进明确方向。
3）可以反复使用，培养时间短，适合大规模筛选使用。
4）作用信号是在融合基因表达后，在细胞内重建转录因子的作用而给出的，省去了纯化蛋白质的繁琐步骤。
5）检测在活细胞内进行，可以在一定程度上代表细胞内的真实情况。检测的结果可以是基因表达产物的积累效应，因而可检测存在于蛋白质之间的微弱的或暂时的相互作用。
试验步骤:
1.TotalRNA量不要多于1mg，用移液器取出所需RNA量到1.5ml离心管中，加RNase-freewater补足到500ul
2.根据表3加入适当体积的OBBBuffer和OligotexSuspension，轻弹1.5ml离心管彻底混匀
3.置于70℃水浴中3min
4.取出置于室温(20℃-30℃)10min
5.13000rpm室温离心2min，用移液器吸出上清到一个新的1.5ml离心管中，保留上清直到polyA被结合上。
6.用移液器取400ulOW2Buffer混匀沉淀物，将混合物转移到SpinColumn中，RT，13000rpm，离心1min
7.将SpinColumn转移到一个新的1.5ml离心管中，加400ulOW2，RT，13000rpm，离心1min
9.取出25ulOERBuffer(70℃)到Column中，用移液器吹打3-4次树脂，室温13000rpm，离心1min。
10.测OD,并电泳定量。
cDNA构建成功关键因素
1.保证获得数量足够的高质量的起始RNA
2.反转录成功与否及反转录效率是关键中的关键
3.层析柱cDNA分级很关键

仪器网-专业分析仪器服务平台,实验室仪器设备交易网,仪器行业专业网络宣传媒体。

相关热词：

等离子清洗机,反应釜,旋转蒸发仪,高精度温湿度计,露点仪,高效液相色谱仪价格,霉菌试验箱,跌落试验台,离子色谱仪价格,噪声计,高压灭菌器,集菌仪,接地电阻测试仪型号,柱温箱,旋涡混合仪,电热套,场强仪万能材料试验机价格,洗瓶机,匀浆机,耐候试验箱,熔融指数仪,透射电子显微镜。

GA1157-2014消防设施维护保养检测消防设施北京新宇胜利仪器有限责任公司依据《GA1157-2014消

消防设施维护保养检测设备北京新宇胜利仪器有限责任公司依据《GA1157-2014消防技术服务机构设备配备》研

关键词:酶联免疫(ELISA)技术服务|实验技术服务简介：世界顶尖品牌酶联免疫(ELISA)技术服务|实验技

关键词:酶联免疫(ELISA)服务|实验技术服务简介：世界顶尖品牌酶联免疫(ELISA)服务|实验技术服务原

关键词:酶联免疫(ELISA)|实验技术服务简介：世界顶尖品牌酶联免疫(ELISA)|实验技术服务原装正品，

关键词:简介：世界顶尖品牌原装正品，质量保证,价格优惠。抗体定制|实验技术服务pCzn1质粒+ArcticE

关键词:酵母双(单)杂交cDNA文库构建服务|实验技术服务简介：世界顶尖品牌酵母双(单)杂交cDNA文库构建

关键词:酵母双(单)杂交cDNA文库构建|实验技术服务简介：世界顶尖品牌酵母双(单)杂交cDNA文库构建|实

关键词:基因组文库(GenomicLibrary)构建技术服务|实验技术服务简介：世界顶尖品牌基因组文库(G