ELISA实验中是以抗原和抗体的免疫反应为基础，ELISA试剂以及各种溶液如何配置？zui近刚做了下ELISA实验，把各种ELISA配置方法汇总如下：1、ELISA实验包被缓冲液2、ELISA实验洗涤缓冲液3、ELISA实验稀释液4、ELISA实验终止液5、ELISA底物缓冲液6、ELISA实验TMB四甲基联苯胺、使用液7、ELISA实验ABTS使用液8、ELISC

试剂

1、ELISA实验包被缓冲液(PH9.6 0.05M碳酸盐缓冲液)：

NaHCO31.59gNaHCO32.93g加蒸馏水至1000ml

2、ELISA实验洗涤缓冲液(PH7.4 PBS)：0.15M

KH2PO4 0.2gNa2HPO4·12H2O2.9gNaCl 8gKCl0.2gTween-20 0.05%0.5ml加蒸馏水至1000ml

3、ELISA实验稀释液：牛血清白蛋白(BSA) 0.1g加洗涤缓冲液至100ml或以羊血清、兔血清等血清与洗涤液配成5～10%使用。

4、ELISA实验终止液(2M H2SO4)：蒸馏水178.3ml，逐滴加入浓硫酸98%、21.7ml。

5、ELISA底物缓冲液(PH5.0磷酸棗柠檬酸)：

0.2M Na2HPO4(28.4g/L) 25.7ml0.1M 柠檬酸(19.2g/L)24.3ml加蒸馏水50ml

6、ELISA实验TMB(四甲基联苯胺)使用液：

TMB(10mg/5ml无水乙醇)0.5ml底物缓冲液(PH5.5)10ml0.75%H2O2 32μl

7、ELISA实验ABTS使用液：

ABTS0.5mg底物缓冲液(PH5.5)1ml3%H2O22μl

8、ELISA实验封闭液：牛血清白蛋白(BSA) 5g加洗涤缓冲液至100ml值得一提的是有的封闭液中含有脱脂奶粉，不适合长期保存。

为了保证ELISA实验的准确性，实验操作中加入的缓冲液和各组分一定要，将洗涤液加入酶标板中的时候防止加入的试剂混入另外一个酶标孔，严防交叉污染。